הערכת תכונות נוגדות חמצון ואנטלמינטיות של תמציות Tithonia diversifolia כנגד ביצי נמטודות במערכת העיכול באמצעות מבחני מבחנה

המחקר שלי מתמקד בפרזיטולוגיה, כיום חוקר רכיבים טבעיים בצמחים כדי לשלוט בטפילים פנימיים במעלים קטנים. אנחנו רוצים לשלב ידע מסורתי ושיטות חלופיות לשליטה באוכלוסיית מעלים קטנים בעולם. כיום, אנו משתמשים יותר ויותר בטכנולוגיות כמו מידול חיזוי, מונים אוטומטיים וכלים מולקולריים לזיהוי התראות ספציפיות.

יתרה מזאת, מספר מכונים ברחבי העולם מפתחים אב-טיפוס של חיסון נגד עיוותי המונכוס. זהו צעד משמעותי קדימה. אחרים משתמשים במנועים אורגניים כדי להפחית את התלות בבעלי חיים במעבדה, דבר שחשוב מבחינה אתית ומדעית.

בסך הכול, יש מאמץ עולמי חזק ומתואם לקידום כלי אבחון ומחקר, במטרה לפתח אסטרטגיות חדשניות וברות קיימא לשליטה בטפילים ברחבי העולם, ולמנוע עמידות לתרופות. כדי להתחיל, ערבבו 30 גרם מכל דגימת צואה עם 50 מיליליטר של תמיסת מלח רוויה בצפיפות של 1.2 גרם למיליליטר כדי להכין לבדיקות קופרולוגיה. הומוגניזציה של שלושה גרם דגימת צואה בתמיסת נתרן כלוריד רוויה ב-50 מיליליטר, וסיננו את התערובת דרך בד גבינה.

בדקו את השקופית תחת מיקרוסקופ בהגדלה פי 10, וספרו ביצים מסוג סטרונגיל. חשב ביצים לגרם באמצעות הנוסחה הניתנת. סנן את הצואה פעמיים עם גזה סטרילית.

לאחר מכן, לסנן את המתלה שנוצר ולהעביר אותו למסננת. שטפו את החומר השמור על המסננת במים מזוקקים, ואספו את המתלים השטופים לצינורות של 15 מיליליטר. הניחו את הדגימות בצנטריפוגה שולחנית עם רוטור דלי מתנדנד, וסובבו בטמפרטורה של כ-4,800 גרם במשך חמש דקות בטמפרטורת החדר.

החזירו את הביצים ואת ה-PBS, וכוונו את ריכוז הביציות ל-100 ביצים למיליליטר לצורך הכנת הבדיקה. הכינו את הבקרה החיובית על ידי המסה של פנבנדזול ב-PBS לקבלת תמיסת מלאי של 1,000 מיקרוגרם למיליליטרים. לאחר הוספת תערובת אחת לאחת של תמצית ותליית ביצים, הוסיפו כ-100 ביצים למיליליטר לכל באר בצלחת עם 48 בארות.

האתגר המרכזי בטכניקה זו טמון בשונות תגובת בקיעת הביצה. גם לאחר כל שלבי הפרוטוקול, בקיעת הביצים עשויה להתרחש בין 48 ל-72 שעות, ובמקרים מסוימים כלל לא. ההשפעה המעכבת של תמצית Tithonia diversifolia על בקיעת הביצים הראתה דפוס תלוי במינון המשתקף בערך EC50 של 521.6 מיקרוגרם למיליליטר.

תוצאה זו מצביעה על כך שריכוזים מתונים של התמצית הגסה נדרשים להשגת עיכוב של 50%, מה שמרמז על נוכחות תרכובות ביואקטיביות עם פוטנציאל אנטילמינטי. במינונים נמוכים של 150 עד 300 מיקרוגרם למיליליטר, העיכוב היה מינימלי, והשונות נותרה נמוכה, בהתאם לחשיפה לא מספקת שתפריע להיווצרות עובריות או להופעת זחלים. השונות הגיעה לשיא במינון ביניים של 1,200 מיקרוגרם למיליליטר, בהתאם לאזור המעבר הלא-ליניארי של עקומת תגובת המינון, שבו הבדלים ביולוגיים או ניסיוניים קטנים עלולים לגרום לשינויים גדולים בתוצאה.

זה צפוי בתמציות צמחיות גולמיות המכילות מספר תרכובות פעילות. בסך הכול, התוצאות מאשרות את פעילות האנטי-בקיעה של Tithonia diversifolia עם יעילות גוברת במינונים גבוהים יותר. זיקוק או חלוקה של התמצית עשויים לשפר את העוצמה, וממליצים מחקרים פיטוכימיים נוספים ומחקרים בחיים כדי להעריך את יעילותה בתוכניות שליטה בטפילים.

הממצאים שלנו מראים פעילות חוץ-גופית, המאשרים את הפוטנציאל האנטי-טפיל. אלה שמייצגים תגלית משמעותית ואת היישום הקליני הפוטנציאלי לשיפור בריאות בעלי החיים. בנוסף, העלות הנמוכה והגישה האתית של מבחן זה מאשרות את השימוש בידע המסורתי בנוגע למחקרים עתידיים.

תוצאות המחקר שלנו מספקות תובנות מבוססות ראיות על אסטרטגיות אנטילמינטיות, רכיבים ידידותיים לסביבה מאומתים לתמיכה באסטרטגיות בקרה להפחתת התלות בתרופות.