Name: מתן אורו-לוע של בלאומיצין במודל העכברי של פיברוזיס ריאתי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 3 s
Description: חקור מנגנוני חיסון בפיברוזיס ריאתי באמצעות מודל עכברי בלאומיצין עם שאיבה אורו-לועית. שיטה זו מאפשרת חקירה מדויקת של שינויים פיברוטיים ותגובות חיסוניות בזיהוי מולקולרי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>נגד עכבר CD45, Brlliant Violet 605</td><td>BioLegend</td><td>103155</td><td></td></tr><tr><td>נגד עכבר CD64, AlexaFluor 647</td><td>BioLegend</td><td>139322</td><td></td></tr><tr><td>נגד עכבר Ly6G, AlexaFluor 700</td><td>BioLegend</td><td>127622</td><td></td></tr><tr><td>נגד עכבר MerTK, PE/Cy7</td><td>BioLegend</td><td>151522</td><td></td></tr><tr><td>נגד עכבר SiglecF, PE</td><td>BD Biosciences</td><td>552126</td><td></td></tr><tr><td>מתאמי BD Luer-Stub</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>13-681-21</td><td></td></tr><tr><td>Bleomycin</td><td>McKesson</td><td>1129996</td><td>מ- NorthStar Rx 16714088601</td></tr><tr><td>ערכת אינטובציה של עכבר אנדוטרכיאלי</td><td>קנט סיינטיפיק</td><td>ETI-MSE</td><td></td></tr><tr><td>ניתן לתיקון חי/מת סגול</td><td>תרמו</td><td>L34955</td><td></td></tr><tr><td>FlowJo v10 תוכנה</td><td>FlowJo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>gentleMACS Dissociator</td><td>Miltenyi</td><td>130-093-235</td><td></td></tr><tr><td>ערכת בדיקת הידרוקסיפרולין</td><td>Sigma</td><td>MAK463</td><td></td></tr><tr><td>Liberase TM</td><td>Roche</td><td>5401127001</td><td></td></tr><tr><td>Moria Vessel Clamp</td><td>Fine Science Tools</td><td>18350-11</td><td></td></tr><tr><td>ערכת אינטובציה אנדוטרכיאלית של עכבר</td><td>קנט</td><td>ETI-MSE</td><td></td></tr><tr><td>צעד פיפטה</td><td>Dymax</td><td>TI15469</td><td></td></tr><tr><td>עכברי Wildtype C57BL/6&nbsp;</td><td>מעבדות ג'קסון</td><td>JAX, כתם #000664</td><td></td></tr></tbody></table>

מתן אורו-לוע של בלאומיצין במודל העכברי של פיברוזיס ריאתי

Oropharyngeal Administration of Bleomycin in the Murine Model of Pulmonary Fibrosis

הפרוטוקול המתואר כאן מסכם את מסלול השאיפה של הפה והלוע במודל עכברי הבלאומיצין. בניסויים אלה, בעלי חיים טופלו בבלאומיצין (0.75U/kg משקל גוף) או PBS לבקרת דמה. בימים 7, 14 ו-21, עכברים הורדמו, ריאותיהם הושתלו ורקמותיהם תוקנו, כפי שתואר קודםלכן 35. פיברוזיס הוערכה באמצעות צביעה היסטולוגית של המטוקסילין ואאוזין (H&amp;E). ביום השביעי ניתן לראות שינוי פיברוטי של המחיצה המכתשית, יחד עם שינויים דלקתיים/פיברוטיים קטנים, בהשוואה לביקורת PBS (איור 3A,B). ביום ה...

Interstitial lung disease (ILD) represents a broad spectrum of disorders characterized by the progressive and often irreversible scarring of the lung ...

oropharyngeal-administration-bleomycin-murine-model-pulmonary

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

מאמר זה מציג שיטה מהירה ופשוטה לניהול בליאומיצין ישירות לתוך קנה הנשימה העכבר באמצעות אינטובציה. יתרונות עיקריים של שיטה זו הם כי הוא מאוד לשחזור, קל לשלוט, ואינו דורשים ציוד מיוחד או פעמי החלמה ממושכות.

שיטה משופרת עבור אינטובציה מהירה של קנה הנשימה של עכברים

אנו מתארים הדמיה גישה המבוססת על מיקרו-CT וקרינה פלואורסצנטית טומוגרפיה מולקולרית להערכת האורך של המודל פיברוזיס הריאות העכבר המושרה על ידי החדרה intratracheal כפול של bleomycin יחידנית או פולשני משולבת.

יחידנית או משולבת הדמיה גישה המבוססת על מיקרו-CT וקרינה פלואורסצנטית טומוגרפיה מולקולרית להערכת האורך של ריאות הנגרמת Bleomycin פיברוזיס בעכברים

אנו מתארים שיטה כדי לשפר באופן משמעותי את engraftment orthotopic של סרטן ריאות תאים לריאות מאתר על ידי מיזוג מראש את דרכי הנשימה עם פציעה. גישה זו ויכול להיות מיושם גם ללמוד אינטראקציות סטרומה בתוך הריאות microenvironment, הפצתו גרורתי, morbidities משותף של סרטן ריאות, לייצר ביעילות רבה יותר החולה נגזר xenografts.

מיזוג מראש את דרכי הנשימה של עכברים עם Bleomycin מגדיל את היעילות של Orthotopic ריאות סרטן תא Engraftment

כאן אנו מציגים שיטה יעילה כדי לחקור את הפעילות האנטיפיברוטית של תאים בעלי מזון מסטרומה האנושית מתוך הגוף הפנימי שהתקבלו מן החבל הטבור כולו בעקבות אינדוקציה של פגיעה בריאה על ידי הזרקה אנדוקנה של ליאומיצין ב C57BL /6 עכברים. פרוטוקול זה ניתן להרחיב בקלות לבדיקה טרום קלינית של therapeutics אחרים.

אינדוקציה של פגיעה בריאות העכבר על ידי הזרקת אנדוקנה של ליאומיצין

מודלים שונים של בעלי חיים של פיברוזיס ריאתי הוקמו באמצעות בלומיצין כדי להבהיר את הפתוגנזה של פיברוזיס ריאתי ולמצוא מטרות תרופות חדשות. עם זאת, רוב המודלים פיברוזיס ריאתי המכוונים לרקמת הריאה יש מתן תרופות לא אחיד. כאן, אנו מציעים מודל של פיברוזיס ריאתי אחיד המושרה על ידי nebulization בלומיצין האף.

מודל עכבר של פיברוזיס ריאתי המושרה על ידי נבוליזציה של בלומיצין באף

פרוטוקול זה מתאר את הבידוד של מקרופאגים אינטרסטיציאליים ריאתיים (IMs) ואת העברתם המאומצת לאחר גירוי IL-33 של נאדיות הריאה במודל עכבר, אשר יכול להקל על מחקר in vivo של פיברוזיס ריאתי אידיופתי (IPF).

העברה מאומצת של מקרופאגים מעוררי IL-33 למודלים של עכברים הנגרמים על ידי בלומיצין כדי לחקור את השפעתם על פיברוזיס ריאתי אידיופתי in vivo

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לשימוש בטומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (מיקרו-CT) כדי לכמת אזורים מאווררים במודל פיברוזיס ריאתי חד צדדי המושרה על ידי בלאומיצין באמצעות החדרה תוך קנה הנשימה בצד הנגע.

ניתוח נפח ריאות חד צדדי באמצעות מיקרו-CT להערכה משופרת של פיברוזיס ריאתי במודלים פרה-קליניים

פרוטוקול זה מתאר שיטה להשראת פיברוזיס ריאתי בעכברים באמצעות מתן חוזר ונשנה של בלאומיצין, המניב מאפיינים פתולוגיים הדומים מאוד לאלה של פיברוזיס ריאתי אידיופטית.

מודל עכברי מעודן של פיברוזיס ריאתי אידיופטי

כאן אנו מציגים פרוטוקול למידול פיברוזיס ריאתי בעכברים באמצעות בלומיצין אירוסולי המועבר דרך קנה הנשימה. שיטה אופטימלית זו מאפשרת מסירה אחידה, כמותית ומדויקת ללא חתך כירורגי, ומשפרת את השחזור והאמינות של פיברוזיס הנגרמת על ידי בלומיצין.

שיטה משופרת מבוססת אירוסולים להעברת בלומיצין תוך-קנה הנשימה למודלים של עכברים ניתנים לשחזור ומינימום פולשני של פיברוזיס ריאתי

ההליך הכירורגי לזירוז של איסכמיה hindlimb החד צדדית באה לידי ביטוי, עם אישור של איסכמיה על ידי הדמיה זלוף דופלר לייזר.

דגם Murine של איסכמיה Hindlimb

חקור מנגנוני חיסון בפיברוזיס ריאתי באמצעות מודל עכברי בלאומיצין עם שאיבה אורו-לועית. שיטה זו מאפשרת חקירה מדויקת של שינויים פיברוטיים ותגובות חיסוניות בזיהוי מולקולרי.

מתן אורו-לוע של בלאומיצין במודל העכברי של פיברוזיס ריאתי

גלה סרטונים נוספים