Name: ניתוח מקיף של טסיות דם מקרישות המציגות מאפיינים של נמק, אפופטוזיס והפעלת טסיות דם (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 37 s
Description: למד ניתוח מקיף של טסיות דם מקרישות המציגות מאפיינים של נמק, אפופטוזיס והפעלת טסיות דם. שיטה זו מסייעת לחוקרים לזהות ביומרקרים חדשים ומטרות טיפוליות במצבי קרישת יתר.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Munnix, I., Cosemans, J., Auger, J., Heemskerk, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+response+heterogeneity+in+thrombus+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Platelet response heterogeneity in thrombus formation.</a> Thromb Haemost. 102 (12), 1149-1156 (2009).</li>
<li>Heemskerk, J. W. M., Mattheij, N. J. A., Cosemans, J. M. E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet-based+coagulation%3A+Different+populations%2C+different+functions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Platelet-based coagulation: Different populations, different functions.</a> J Thromb Haemost. 11 (1), 2-16 (2013).</li>
<li>Podoplelova, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coagulation+factors+bound+to+procoagulant+platelets+concentrate+in+cap+structures+to+promote+clotting%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Coagulation factors bound to procoagulant platelets concentrate in cap structures to promote clotting.</a> Blood. 128 (13), 1745-1755 (2016).</li>
<li>Mann, K. G., Butenas, S., Brummel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dynamics+of+thrombin+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">The dynamics of thrombin formation.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 23 (1), 17-25 (2003).</li>
<li>Jackson, S. P., Schoenwaelder, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Procoagulant+platelets%3A+Are+they+necrotic%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Procoagulant platelets: Are they necrotic.</a> Blood. 116 (12), 2011-2018 (2010).</li>
<li>Hua Vivien Mun Yee, V. M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Procoagulant+platelets+and+the+pathways+leading+to+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Thromb+Hemost%22%5BJournal%5D)">Procoagulant platelets and the pathways leading to cell death.</a> Semin Thromb Hemost. 41 (04), 405-412 (2015).</li>
<li>Dale, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coated-platelets%3A+An+emerging+component+of+the+procoagulant+response%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Coated-platelets: An emerging component of the procoagulant response.</a> J Thromb Haemost. 3 (10), 2185-2192 (2005).</li>
<li>Vulliamy, P., Armstrong, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelets+in+hemostasis%2C+thrombosis%2C+and+inflammation+after+major+trauma%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Platelets in hemostasis, thrombosis, and inflammation after major trauma.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 44 (3), 545-557 (2024).</li>
<li>Vulliamy, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histone+H4+induces+platelet+ballooning+and+microparticle+release+during+trauma+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Histone H4 induces platelet ballooning and microparticle release during trauma hemorrhage.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 116 (35), 17444-17449 (2019).</li>
<li>Aliotta, A., Bertaggia Calderara, D., Zermatten, M. G., Marchetti, M., Alberio, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombocytopathies%3A+Not+just+aggregation+defects-the+clinical+relevance+of+procoagulant+platelets%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Thrombocytopathies: Not just aggregation defects-the clinical relevance of procoagulant platelets.</a> J Clin Med. 10 (5), 894(2021).</li>
<li>Kirkpatrick, A. C., Vincent, A. S., Dale, G. L., Prodan, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coated+platelets+predict+stroke+at+30+days+following+TIA%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Coated platelets predict stroke at 30 days following TIA.</a> Neurology. 89 (2), 125-128 (2017).</li>
<li>Kirkpatrick, A. C., Tafur, A. J., Vincent, A. S., Dale, G. L., Prodan, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coated+platelets+improve+prediction+of+stroke+and+transient+ischemic+attack+in+asymptomatic+internal+carotid+artery+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Coated platelets improve prediction of stroke and transient ischemic attack in asymptomatic internal carotid artery stenosis.</a> Stroke. 45 (10), 2995-3001 (2014).</li>
<li>Suzuki, J., Umeda, M., Sims, P. J., Nagata, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium-dependent+phospholipid+scrambling+by+TMEM16F%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Calcium-dependent phospholipid scrambling by TMEM16F.</a> Nature. 468 (7325), 834-838 (2010).</li>
<li>Prodan, C. I., Vincent, A. S., Dale, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coated+platelet+levels+correlate+with+bleed+volume+in+patients+with+spontaneous+intracerebral+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Coated platelet levels correlate with bleed volume in patients with spontaneous intracerebral hemorrhage.</a> Stroke. 41 (6), 1301-1303 (2010).</li>
<li>Josefsson, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consensus+report+on+markers+to+distinguish+procoagulant+platelets+from+apoptotic+platelets%3A+Communication+from+the+Scientific+and+Standardization+Committee+of+the+ISTH%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Consensus report on markers to distinguish procoagulant platelets from apoptotic platelets: Communication from the Scientific and Standardization Committee of the ISTH.</a> J Thromb Haemost. 21 (8), 2291-2299 (2023).</li>
<li>Kulkarni, P. P., Sonkar, V. K., Gautam, D., Dash, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AMPK+inhibition+protects+against+arterial+thrombosis+while+sparing+hemostasis+through+differential+modulation+of+platelet+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">AMPK inhibition protects against arterial thrombosis while sparing hemostasis through differential modulation of platelet responses.</a> Thromb Res. 196, 175-185 (2020).</li>
<li>Ekhlak, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necroptosis+executioner+MLKL+plays+pivotal+roles+in+agonist-induced+platelet+prothrombotic+responses+and+lytic+cell+death+in+a+temporal+order%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Differ%22%5BJournal%5D)">Necroptosis executioner MLKL plays pivotal roles in agonist-induced platelet prothrombotic responses and lytic cell death in a temporal order.</a> Cell Death Differ. 30 (8), 1886-1899 (2023).</li>
<li>Kholmukhamedov, A., Janecke, R., Choo, H. -J., Jobe, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mitochondrial+calcium+uniporter+regulates+procoagulant+platelet+formation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">The mitochondrial calcium uniporter regulates procoagulant platelet formation.</a> J Thromb Haemost. 16 (11), 2315-2321 (2018).</li>
<li>Choo, H. -J., Saafir, T. B., Mkumba, L., Wagner, M. B., Jobe, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+calcium+and+reactive+oxygen+species+regulate+agonist-initiated+platelet+phosphatidylserine+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial calcium and reactive oxygen species regulate agonist-initiated platelet phosphatidylserine exposure.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 32 (12), 2946-2955 (2012).</li>
<li>Jobe, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+role+for+the+mitochondrial+permeability+transition+pore+and+cyclophilin+D+in+platelet+activation+and+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Critical role for the mitochondrial permeability transition pore and cyclophilin D in platelet activation and thrombosis.</a> Blood. 111 (3), 1257-1265 (2008).</li>
<li>Leytin, V., Allen, D. J., Mykhaylov, S., Lyubimov, E., Freedman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombin-triggered+platelet+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Thrombin-triggered platelet apoptosis.</a> J Thromb Haemost. 4 (12), 2656-2663 (2006).</li>
<li>Lopez, J. J., Salido, G. M., Pariente, J. A., Rosado, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombin+induces+activation+and+translocation+of+Bid%2C+Bax+and+Bak+to+the+mitochondria+in+human+platelets%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Thrombin induces activation and translocation of Bid, Bax and Bak to the mitochondria in human platelets.</a> J Thromb Haemost. 6 (10), 1780-1788 (2008).</li>
<li>Wolf, B. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calpain+functions+in+a+caspase-independent+manner+to+promote+apoptosis-like+events+during+platelet+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Calpain functions in a caspase-independent manner to promote apoptosis-like events during platelet activation.</a> Blood. 94 (5), 1683-1692 (1999).</li>
<li>Kim, O. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatal+dysfunction+and+disintegration+of+thrombin-stimulated+platelets%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Fatal dysfunction and disintegration of thrombin-stimulated platelets.</a> Haematologica. 104 (9), 1866-1878 (2019).</li>
<li>Schoenwaelder, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+distinct+pathways+regulate+platelet+phosphatidylserine+exposure+and+procoagulant+function%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Two distinct pathways regulate platelet phosphatidylserine exposure and procoagulant function.</a> Blood. 114 (3), 663-666 (2009).</li>
<li>Abbasian, N., Millington-Burgess, S. L., Chabra, S., Malcor, J. -D., Harper, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Supramaximal+calcium+signaling+triggers+procoagulant+platelet+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Adv%22%5BJournal%5D)">Supramaximal calcium signaling triggers procoagulant platelet formation.</a> Blood Adv. 4 (1), 154-164 (2020).</li>
<li>Le, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+inner+activation+gate+controls+TMEM16F+phospholipid+scrambling%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">An inner activation gate controls TMEM16F phospholipid scrambling.</a> Nat Commun. 10 (1), 1846(2019).</li>
<li>Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TMEM16F+forms+a+Ca2%2B-activated+cation+channel+required+for+lipid+scrambling+in+platelets+during+blood+coagulation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">TMEM16F forms a Ca2+-activated cation channel required for lipid scrambling in platelets during blood coagulation.</a> Cell. 151 (1), 111-122 (2012).</li>
<li>Mattheij, N. J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+mechanism+of+integrin+closure+in+procoagulant+platelets%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Dual mechanism of integrin closure in procoagulant platelets.</a> J Biol Chem. 288 (19), 13325-13336 (2013).</li>
<li>Liu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrially+mediated+integrin+%CE%B1iIb%CE%B23+protein+inactivation+limits+thrombus+growth%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Mitochondrially mediated integrin αiIbβ3 protein inactivation limits thrombus growth.</a> J Biol Chem. 288 (42), 30672-30681 (2013).</li>
<li>van Kruchten, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Both+TMEM16F-dependent+and+TMEM16F-independent+pathways+contribute+to+phosphatidylserine+exposure+in+platelet+apoptosis+and+platelet+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Both TMEM16F-dependent and TMEM16F-independent pathways contribute to phosphatidylserine exposure in platelet apoptosis and platelet activation.</a> Blood. 121 (10), 1850-1857 (2013).</li>
<li>Goelz, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelets+express+adaptor+proteins+of+the+extrinsic+apoptosis+pathway+and+can+activate+caspase-8%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Platelets express adaptor proteins of the extrinsic apoptosis pathway and can activate caspase-8.</a> PLOS ONE. 16 (1), e0244848(2021).</li>
<li>Shlomovitz, I., Speir, M., Gerlic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flipping+the+dogma+-+phosphatidylserine+in+non-apoptotic+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Commun+Signal%22%5BJournal%5D)">Flipping the dogma - phosphatidylserine in non-apoptotic cell death.</a> Cell Commun Signal. 17 (1), 139(2019).</li>
<li>Nadine, J. A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coated+platelets+function+in+platelet-dependent+fibrin+formation+via+integrin+%CE%B1IIb%CE%B23+and+transglutaminase+factor+XIII%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Coated platelets function in platelet-dependent fibrin formation via integrin αIIbβ3 and transglutaminase factor XIII.</a> Haematologica. 101 (4), 427-436 (2016).</li>
<li>Michelson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+activation+by+thrombin+can+be+directly+measured+in+whole+blood+through+the+use+of+the+peptide+GPRP+and+flow+cytometry%3A+Methods+and+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Coagul+Fibrinolysis%22%5BJournal%5D)">Platelet activation by thrombin can be directly measured in whole blood through the use of the peptide GPRP and flow cytometry: Methods and clinical applications.</a> Blood Coagul Fibrinolysis. 5 (1), 121-131 (1994).</li>
<li>Taylor, M. R., Couto, J. R., Scallan, C. D., Ceriani, R. L., Peterson, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactadherin+%28formerly+BA46%29%2C+a+membrane-associated+glycoprotein+expressed+in+human+milk+and+breast+carcinomas%2C+promotes+Arg-Gly-Asp+%28RGD%29-dependent+cell+adhesion%5BTitle%5D)+AND+%22DNA+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Lactadherin (formerly BA46), a membrane-associated glycoprotein expressed in human milk and breast carcinomas, promotes Arg-Gly-Asp (RGD)-dependent cell adhesion.</a> DNA Cell Biol. 16 (7), 861-869 (1997).</li>
<li>Andersen, M. H., Graversen, H., Fedosov, S. N., Petersen, T. E., Rasmussen, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+analyses+of+two+cellular+binding+domains+of+bovine+lactadherin%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Functional analyses of two cellular binding domains of bovine lactadherin.</a> Biochemistry. 39 (20), 6200-6206 (2000).</li>
<li>Tan, C. W., Bourcy, M., Pasalic, L., Chen, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow+cytometry+assessment+of+procoagulant+platelets+using+a+dithiol-reactive+probe+functional+disulfide+bonds%3A+Methods+and+protocols%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Flow cytometry assessment of procoagulant platelets using a dithiol-reactive probe functional disulfide bonds: Methods and protocols.</a> Methods Mol Biol. 1967, 305-321 (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>תמיסת חומצה ציטראט דקסטרוז (ACD) (עבור 1000 מ"ל)</td><td></td><td></td><td>טרי-סודיום ציטראט-&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 22 גרם חומצת לימון-&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 8 גרם דקסטרוז-&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 24.5 גרם<> מים-&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; נפח איפור עד 1000 מ"ל&nbsp;</td></tr><tr><td>ערכת תיוג חלבון Alexa Fluor 488</td><td>Invitrogen</td><td>A10235</td><td></td></tr><tr><td>APC עכבר אנטי אנושי CD62P</td><td>BD Pharmingen</td><td>550888</td><td></td></tr><tr><td>בקר Prothrombin</td><td>Prolytix</td><td>BCP-1010</td><td></td></tr><tr><td>Buffer A (הכנת טסיות דם)</td><td></td><td></td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; מ.ו&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Conc. in 1X&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; עבור תמיסת 100 מ"ל 10X HEPES&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 238.30&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 20 מ"מ&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 4.766 גרם NaCl&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 58.44&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 134 מ"מ&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 7.83 גרם KCl&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 74.55&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 2.9 מ"מ&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 216.19 מ"ג MgCl2&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 203.30&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 1 מ"מ&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 203.30 מ"ג NaH2PO4&nbsp; &nbsp; &nbsp; 156.01&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 0.34 מילימטר&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 53.04 מ"ג NaHCO3&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 84 01&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 12 מ"מ &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 1.01 גרם מים ל-100 מ"ל לאחר התאמת ה-pH ל-6.2 לדלל תמיסת 10X 1:10 (v/v) במי Milli Q ממש לפני הכנת טסיות הדם כדי לקבל את תמיסת ה-1X שיש להשלים עם הדברים הבאים &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Conc. in 1X&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; עבור תמיסה 1X של 1 מ"ל EGTA &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 1 מ"מ &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; הוסף 10 &mu; L (1:100 v/v) 100 מ"מ EGTA&nbsp; גלוקוז &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 5 מ"מ &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; הוסף 5 &mu; L (1:200 v/v) 1 M גלוקוז PGE1 &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 3 &mu; M &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; הוסף 3 &mu; L (1:333 v/v) תמיסת PGE1 1 מ</td></tr><tr><td>"מ מאגר B (הכנת טסיות דם)</td><td></td><td></td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; מ.ו&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Conc. in 1X&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; עבור תמיסת 100 מ"ל 10X HEPES&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 238.30&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 20 מ"מ&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 4.766 גרם NaCl&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 58.44&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 134 מ"מ&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 7.83 גרם KCl&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 74.55&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 2.9 מ"מ&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 216.19 מ"ג MgCl2&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 203.30&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 1 מ"מ&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 203.30 מ"ג NaH2PO4&nbsp; &nbsp; &nbsp; 156.01&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 0.34 מילימטר&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 53.04 מ"ג NaHCO3&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 84 01&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 12 מ"מ &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 1.01 גרם מים ל-100 מ"ל לאחר התאמת pH ל-7.4 לדלל תמיסת 10X 1:10 (v/v) במי Milli Q ממש לפני הכנת טסיות הדם כדי לקבל את תמיסת ה-1X שיש להשלים עם הדברים הבאים &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Conc. in 1X&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; עבור 1 מ"ל תמיסה 1X גלוקוז &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 5 מ"מ &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; הוסף 5 &mu; L (1:200 v/v) 1 M גלוקוז&nbsp;</td></tr><tr><td>CaCl2 (0.5 מ') (עבור 50 מ"ל)</td><td></td><td></td><td>משקל מולקולרי של CaCl2.2H2O = 147.02 ממיסים 3.675 גרם של CaCl2.2H2O ב-50 מ"ל מילי-Q מים</td></tr><tr><td>CellEvent Caspase-3/7 ריאגנטים לזיהוי ירוק</td><td>Invitrogen</td><td>C10423</td><td>מגיב לזיהוי אפופטוזיס</td></tr><tr><td>Convulxin</td><td>Enzo Life Sciences</td><td>ALX-350-100</td><td></td></tr><tr><td>EDTA (0.5 מ'; pH 8) (עבור 100 מ"ל)</td><td></td><td></td><td>משקל מולקולרי של EDTA Na2.2H2 O: 372.24g שוקל 18.612 גרם ומשהה ב-50 מ"ל מים Milli Q ובדוק את ה-pH (pH~4) הוסף לאט 10N NaOH תוך ערבוב ופקח על ה-pH. EDTA מתחיל להתסיס בסביבות pH 7 והוא מסיס לחלוטין ב-pH 8. הרכיב את הנפח ל-100 מ"ל עם מי Milli Q.</td></tr><tr><td>EGTA (100 מ"מ; pH 7.4) (עבור 100 מ"ל)</td><td></td><td></td> <td>משקל מולקולרי: 380.4 הוסף 3.804 גרם EGTA ב-50 מ"ל מים Milli Q ובדוק את ה-pH (pH~3) הוסף 10 N NaOH טיפה תוך כדי ערבוב ועקוב אחר ה-pH EGTA הופך מסיס ב-pH 7.0 (בערך) התאם את ה-pH ל-7.4 הרכיב את הנפח ל-100 מ"ל עם מי</td></tr> <tr><td>Milli QFITC עכבר אנטי אנושי PAC-1</td><td>BD</td><td>340507</td><td></td></tr><tr><td>FITC-IETD-FMK Caspase 8 (פעיל) ערכת צביעה</td><td>Abcam</td><td>ab65614</td><td></td></tr><tr><td>Mitotracker Red CMXRos (צבע תיוג מיטוכונדריה)</td><td>Invitrogen</td><td>M7512</td><td>מלאי = 1 מ"מ (50 ומיקרו; G מומס ב-90 ומיקרו; l DMSO) תת-מלאי = 100 ומיקרו; M (10 ומיקרו; l מלאי + 90 ומיקרו; l DMSO) ריכוז עבודה = 500 ננומטר (0.5 ומיקרו; l ב-100 ומיקרו; l)</td></tr> <tr><td>PE Annexin V</td><td>BD Pharmingen</td><td>560930</td><td></td></tr><tr><td>פרוסטגלנדין E1</td><td>Sigma</td><td>P5515</td><td>מלאי = 20 מ"מ (1 מ"ג מומס ב-141 ומיקרו; L DMSO) תת-מלאי = 1 מ"מ (10 ומיקרו; l מלאי + 190 ומיקרו; L DMSO) ריכוז עבודה = 3 ומיקרו; M (3 ומיקרו; L ב-1 מ"ל)</td></tr><tr><td>Rhod-2 AM</td><td>Invitrogen</td><td>R1244</td><td>מלאי = 5 מ"מ (1 מ"ג מומס ב-178 ומיקרו; L DMSO) תת-מלאי = 100 ומיקרו; M (10 ומיקרו; L מלאי + 90 ומיקרו; L DMSO) ריכוז עבודה = 500 ננומטר (0.5 ומיקרו; L ב-100 ומיקרו; L)</td></tr> <tr><td>תרומבין מפלזמה אנושית</td><td>Sigma</td><td>T7572</td><td></td></tr></tbody></table>

ניתוח מקיף של טסיות דם מקרישות המציגות מאפיינים של נמק, אפופטוזיס והפעלת טסיות דם

Comprehensive Analysis of Procoagulant Platelets Exhibiting Features of Necrosis, Apoptosis and Platelet Activation

חלק מהטסיות המופעלות הופכות ל"פרו-קרישות" עם עלייה אופיינית בביטוי פני השטח של פוספטידילסרין (PS) ו-P-סלקטין, מה שמבדיל אותן מטסיות "אפופטוטיות" שהן חיוביות רק לחשיפה ל-PS כמו גם טסיות "פרו-אגרגטוריות" שהן חיוביות לביטוי P-selectin. מצאנו כי תרומבין גורם לעלייה תלוית מינון בשיעור טסיות הדם החיוביות הן לביטוי P-selectin והן לביטוי PS כפי שזוהה על ידי קשירה של נוגדן FITC-anti-CD62P ו-PE-Annexin V, בהתאמה (איור 2). יצירת טסיות דם פרו-קרישה תלויה בזרם הסידן המיטוכונדריאלי18,19<...

Platelets circulating in the bloodstream are relatively quiescent but become "activated" upon encountering stimulants or "agonists" at the site of blood ...

comprehensive-analysis-procoagulant-platelets-exhibiting-features

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

כאן אנו מדווחים טכניקה ניסויית של מיקרוסקופיה intravital פלואורסצנטי לדמיין אינטראקציות heterotypic טסיות דם נויטרופילים על האנדותל הופעל במהלך דלקת כלי דם והיווצרות קרישים בעכברים חיים. טכנולוגיה מיקרוסקופית זה תהיה יקרה כדי לחקור את המנגנון המולקולרי של מחלת כלי דם ולבדוק סוכנים תרופתיים בתנאי pathophysiological.

הדמיה בזמן אמת של אינטראקציות heterotypic טסיות דם-נויטרופילים על האנדותל הופעל במהלך דלקת של כלי דם והיווצרות קרישים בעכברים חיים

עבודה זו מתארת ​​שיטה מבוססת מיקרוסקופיה פלואורסצנטי לחקר הדבקה טסיות, התפשטות, והפרשה תחת זרימה. פלטפורמה רב-תכליתית זו מאפשרת חקירת תפקוד טסיות למחקר מכניסטי על פקקת והמוסטאזיס.

Live-cell הדמיה של degranulation טסיות והפרשה תחת זרימה

היווצרות טסיות דם מעודדות נקשרה עם סיכון מוגבר לפקקת. מוצג כאן פרוטוקול מדויק לבידוד טסיות דם שטופות מדם אדם, שנועד לכמת את החשיפה של פוספטידיל-סרין ושחרור מיקרו-שלפוחית, שהם מאפיינים ייחודיים של טסיות מעודדות.

אפיון טסיות מעודדות קרישה על ידי מדידת חשיפה לפוספטידיל-סרין ושחרור מיקרו-שלפוחיות מטסיות אדם מטוהרות

ניתן להעריך את תפקוד טסיות הדם תחת זרימה ולדמות החייאה המוסטטית באמצעות מכשיר מיקרופלואידי, שיש לו יישומים ברפואת טראומה ועירוי.

מיקרופלואידיקה בהערכת תפקוד טסיות הדם

ציטומטריית זרימה רב-צבעונית עבור טסיות יכולה לזהות תת-סוגים חדשים של טסיות דם בתוך תת-אוכלוסיות טסיות קלאסיות, כגון טסיות מנוחה, אגרגטוריות, פרוקו-קרישה ואפופטוטיות. זה מאפשר השוואה של דפוסי תת-אוכלוסייה שונים המושרים על ידי אגוניסטים שונים של טסיות דם. כאן מתואר בפירוט הליך להקמת פאנל ציטומטריית זרימה רב צבעוני.

ניתוח תת-אוכלוסיות טסיות על ידי ציטומטריית זרימה רב-צבעונית

עבודה זו מתארת בדיקה מיקרופלואידית המשתמשת במאמץ גזירה כדי להפעיל יצירת קרישי דם בדם ומאפיינת את הקריק באמצעות ממדים מרובים של קריאה. הבדיקה יכולה למדוד את הנטייה הפרותרומבוטית של דגימות דם, ולכן היא שימושית באבחון מחלות, גילוי תרופות, וכן במחקרים מכניים בסיסיים הקשורים לטרומבוזיס.

מבחן פרופיל תרומבוס: פלטפורמה מבוססת מיקרופלואידיקה לאפיון מקיף של תרומבוגנזה ביומכנית

באתר האונקולוגית החזי פותחה כדי לשמש כמאגר נתונים מקיפה עבור קליניים ומעבדתיים למטרות מחקר translational. המאגר ישמש חוקרי סרטן translational במסגרת תוכנית החזה אונקולוגיה המחקר. באתר זה ניתנת להתאמה מודלים סרטן אחרים, כמו גם מחלות אנושיות אחרות.

הדור של מסד נתונים מקיף החזה אונקולוגיה - כלי למחקר Translational

הערכות המטרה של המנגנונים הפיזיולוגיים תמיכה בנאום יש צורך לעקוב אחר התקדמות המחלה אצל אנשים עם ALS ו לכמת את השפעות הטיפול בניסויים קליניים. בסרטון הזה, אנו מציגים מקיף, מכשור מבוססי פרוטוקול לכימות מנוע הביצועים דיבור בקרב אוכלוסיות קליניות.

פרוטוקול הערכה מקיפה של תפקוד לקוי בבית ממחלת טרשת לרוחב amyotrophic (ALS)

טכניקה מבוסס למדוד את הפלישה של monolayer תא האנדותל על ידי תאים סרטניים חשמל התנגדות בזמן אמת

התערבות RNA (RNAi) הוא בעל יתרונות רבים על פני בנוקאאוט הגן נעשה שימוש נרחב ככלי במחקרים גנים תפקודיים. המצאת ה-DNA וקטור מבוססי RNAi הטכנולוגיה הפכה לטווח ארוך הגן מושרה מציאה אפשרי, גם הגדילה את הכדאיות של השתקת...

וקטור מבוסס DNA התערבות RNA ללמוד לתפקד גנים סרטן

למד ניתוח מקיף של טסיות דם מקרישות המציגות מאפיינים של נמק, אפופטוזיס והפעלת טסיות דם. שיטה זו מסייעת לחוקרים לזהות ביומרקרים חדשים ומטרות טיפוליות במצבי קרישת יתר.

ניתוח מקיף של טסיות דם מקרישות המציגות מאפיינים של נמק, אפופטוזיס והפעלת טסיות דם

גלה סרטונים נוספים