Name: בידוד תאים המכילים רטינואיד ריאה על ידי מיון תאים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-11T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 47 s
Description: למדו לבודד תאים המכילים רטינואיד מרקמת ריאה באמצעות מיון תאים פלואורסצנטי (FACS). השיטה מאפשרת חקר תפקיד הוויטמין A בשמירה על בריאות הריאה ובהגנה מפני פציעות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>פיפטה סרולוגית 10 מ"ל</td><td>Avantor/VWR</td><td>76452-284</td><td></td></tr><tr><td>100 ומיקרו; מסננת M&nbsp;</td><td>גריינר ביו-וואן</td><td>542000</td><td></td></tr><tr><td>צינור בז 15 מ"ל</td><td>קורנינג</td><td>352099</td><td></td></tr><tr><td>40 ומיקרו; מסננת M&nbsp;</td><td>גריינר ביו-וואן</td><td>542040</td><td></td></tr><tr><td>צינור בז 50 מ"ל</td><td>קורנינג</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>צלחת תרבית תאים, 35 מ"מ וחריפה; 10 מ"מ</td><td>קורנינג</td><td>430165</td><td></td></tr><tr><td>אמצעי מיון תאים</td><td>Gibco</td><td>A59688DJ</td><td></td></tr><tr><td>קולגנאז מסוג IV&nbsp;</td><td>תאגיד הביוכימיה וורת'ינגטון</td><td>LS004188&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>מערכת מיון תאים Cytek Aurora&nbsp;</td><td>Cytek Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dispase II</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4693</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>DN25</td><td></td></tr><tr><td>Falcon מותג Falcon צינור תחתון עגול 5 מ"ל פוליפרופילן, 12 מ"מ וחריף; 75 מ"מ</td><td>Corning</td><td>352063</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Falcon מותג Falcon צינור עגול תחתון פוליסטירן 5 מ"ל עם מכסה מסננת תאים, 12 מ"מ וחריף;</td> 352235 <td></td><td>קורנינג</td> 75 מ"מ</tr><tr><td>תוכנת FlowJo&nbsp;</td><td>Becton Dickinson</td><td></td><td>זרימה ציטומטריית</td></tr><tr><td>תוכנה HBSS עם Ca2+/Mg2+</td><td>Gibco</td><td>14925-092</td><td></td></tr><tr><td>HBSS ללא Ca2+/Mg2+</td><td>Gibco</td><td>14175-095</td><td></td></tr><tr><td>Nalgene Rapid-Flow סטרילי חד פעמי בקבוק למעלה מסננים ThermoFisher</td><td></td><td>595-3320</td><td></td></tr><tr><td>Red Cell lysis מאגר</td><td>תוכנת Sigma-Aldrich</td><td>R7757</td><td></td></tr><tr><td>SpectroFlo CS&nbsp;</td><td>Cytek Biosciences</td><td>גרסה 1.3.0&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>עיצוב כירורגי Royaltek נירוסטה להבי אזמל כירורגיים</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>22-079-683</td><td></td></tr><tr><td>SYTOX כתם תאים מתים ירוק</td><td>Invitrogen</td><td>S34860</td><td></td></tr><tr><td>Tamoxifen</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T2859</td><td></td></tr></tbody></table>

בידוד תאים המכילים רטינואיד ריאה על ידי מיון תאים

Isolation of Lung Retinoid-Containing Cells by Cell Sorting

בידוד תאים המכילים רטינואיד ריאה ריאות עכברים (מעכברי Lrat+/+ ו-Lrat-/-) עוכלו אנזימטית, ותרחיפים חד-תאיים הוכנו ועברו ל-FACS בהתאם לנוהל המתואר לעיל. מיון תאים ואיסוף נתונים בוצעו במערכת מיון תאים של Cytek Aurora™ המופעלת על ידי תוכנת SpectroFlo CS גרסה 1.3.0 באמצעות זרבובית של 100 מיקרומטר ולחץ של 15 psi. ראשית, עלילות לפיזור קדימה (גובה פיזור קדימה/FSC-H לעומת אזור פיזור קדימה/FSC-A) יושמו על בחירה ושער של תאים בודד...

Retinoids (vitamin A and its metabolites) are an essential lipid component of the alveolar microenvironment, and cell-type specific retinoid metabolism is ...

isolation-of-lung-retinoid-containing-cells-by-cell-sorting

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

הכנה מטוהרים של ריאות תאים דנדריטים עכבר מתואר. דגש ספציפי ניתנת הבידוד של תת קונבנציונאלי תאים דנדריטים.

בידוד של ריאות תאים דנדריטים עכבר

סרטון זה מדגים את ההליך לבידוד תאי גנגליון רשתית ראשוניים (RGCs) באמצעות ציטומטריית זרימה. שיטה זו מאפשרת מחקר עתידי של RGCs, במטרה להבין טוב יותר את הירידה הגדולה בחדות הראייה הנובעת מאובדן RGCs פונקציונליים במחלות נוירודגנרטיביות.

בידוד תאי גנגליון רשתית מורין באמצעות מיון תאים המופעלים על ידי פלואורסצנטיות

כאן, אנו מספקים פרוטוקול אופטימלי לבידוד ושיבוט של ישות תאי T הנדירה של תאי T Vδ1+CD4+ היקפיים, שהיא, כפי שהראינו לאחרונה, אב תאי T αβ חוץ-תימיים. טכניקה זו מאפשרת לבודד כמותי, לשכפל ולהרחיב ביעילות תאים אלה בתרבית ex vivo.

ובידוד<em&gt; Ex Vivo</em&gt; תרבות של Vδ1<sup&gt; +</sup&gt; CD4<sup&gt; +</sup&gt; תאי T γδ, Extrathymic αβT-תא אב

פרוטוקול זה מתאר טכניקת בידוד לקבלת תאי סטרומה mesenchymal תושב ריאה הראשית של חולדות, באמצעות עיכול אנזימטי, הפרדת שיפוע צפיפות, דבקות פלסטיק CD146 + מבחר חרוז מגנטי.

בידוד של CD146<sup&gt; +</sup&gt; תאי סטרומה mesenchymal ריאות התושב מריאות העכברוש

פציעות כבדות מלוות הרחבת תא ובתאים מייצגים אוכלוסייה הטרוגנית תא. סיווג רומן של תא הסלולר זה מאפשר הבחנה של תת מרובים. השיטה המתוארת כאן ממחישה את הזרימה cytometry ניתוח ובידוד טוהר גבוה של תת שונים שיכול לשמש מבחנים נוספים.

בידוד והעשרה של קבוצות משנה כבדים ובתאים המזוהים על ידי שילוב מרקר Surface Novel

מיליוני אנשים סובלים ממחלות ניוונית של הרשתית הגורמות עיוורון בלתי הפיך. מרכיב נפוץ של רבים ממחלות אלה הוא אובדן תאי הגנגליון ברשתית (RGCs). פרוטוקול מפורט זה מתאר את הבידוד של RGCs Murine העיקרי על ידי בחירה חיובית ושלילית עם cytometry הזרימה.

בידוד של תאים ראשיים Murine הרשתית גנגליון (RGCs) על ידי זרימת cytometry

מאמר זה מספק מתודולוגיה מפורטת לגישות דיסוציאציה של רקמות ופירוק תאי, המאפשרות העשרה של תאי אפיתל בני קיימא מאזורים פרוקסימליים ודיסטליים של הריאה האנושית. כאן גישות אלה מיושמות לניתוח פונקציונלי של תאי אב אפיתל ריאה באמצעות שימוש במודלים של תרביות אורגנואידים תלת-ממדיות.

בידוד והעשרה של תאי אב אפיתל הריאה האנושיים לתרבית אורגנואידית

פרוטוקול זה מתאר שיטה לבידוד תאי אנדותל רשתית לאחר הלידה הממוטבת לתפוקת התאים, טוהר וכדאיות. תאים אלה מתאימים לגישות ריצוף מהדור הבא.

בידוד תאי אנדותל רשתית מורין לריצוף הדור הבא

למרות שהוא מאתגר, הבידוד של תאי אנדותל ריאתיים חיוני למחקרים על דלקת ריאות. הפרוטוקול הנוכחי מתאר הליך לבידוד בעל תפוקה גבוהה וטוהר גבוה של תאי אנדותל מקרו-וסקולריים ומיקרו-וסקולריים.

בידוד וטיהור תאי אנדותל מיקרו-וסקולריים ומקרו-וסקולריים מדגימות שמקורן בריאה

מוצגת כאן שיטה ניתנת לשחזור, משתלמת וחזקה לבידוד והרחבה של תאי אפיתל סימפונות ראשוניים עבור ביו-בנקאות לטווח ארוך ויצירת תאי אפיתל ממוינים על ידי תרבית בממשק אוויר-נוזל.

בידוד תאי אפיתל של הסימפונות מרקמת ריאה שנכרתה לצורך ביו-בנקאות והקמת תרביות ממשק אוויר-נוזל ממוינות היטב

פרוטוקול זה מפרט את הבידוד של אוכלוסיות חיסוניות ולא מחוסנות מריאות העכבר במצב יציב ובעקבות זיהום בשפעת. הוא גם מספק אסטרטגיות שער לזיהוי תת-קבוצות של תאים אפיתל ומיאלואידים.

בידוד אוכלוסיות תאים מיאלואידיים ואפיתל חיים מריאת העכבר

למדו לבודד תאים המכילים רטינואיד מרקמת ריאה באמצעות מיון תאים פלואורסצנטי (FACS). השיטה מאפשרת חקר תפקיד הוויטמין A בשמירה על בריאות הריאה ובהגנה מפני פציעות.

בידוד תאים המכילים רטינואיד ריאה על ידי מיון תאים

גלה סרטונים נוספים