Name: מודל ex vivo explant לחקר אינטראקציות גליה ברשתית העכבר (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-15T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: חקור מודל explant ex vivo לחקר אינטראקציות גליה ברשתית העכבר. הפרוטוקול משמר את הסביבה הטבעית של התאים ומאפשר חקירה מדויקת של תפקודים פיזיולוגיים בנוירואינפלמציה ובגלאוקומה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Quigley, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+glaucomatous+optic+neuropathy%3A+the+synergy+between+clinical+observation+and+investigation%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Understanding glaucomatous optic neuropathy: the synergy between clinical observation and investigation.</a> Annu Rev Vis Sci. 2, 235-254 (2016).</li>
<li>Alqawlaq, S., Flanagan, J. G., Sivak, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((All+roads+lead+to+glaucoma%3A+induced+retinal+injury+cascades+contribute+to+a+common+neurodegenerative+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">All roads lead to glaucoma: induced retinal injury cascades contribute to a common neurodegenerative outcome.</a> Exp Eye Res. 183, 88-97 (2019).</li>
<li>Tham, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+prevalence+of+glaucoma+and+projections+of+glaucoma+burden+through+2040%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Global prevalence of glaucoma and projections of glaucoma burden through 2040: a systematic review and meta-analysis.</a> Ophthalmology. 121 (11), 2081-2090 (2014).</li>
<li>Margeta, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apolipoprotein+E4+impairs+the+response+of+neurodegenerative+retinal+microglia+and+prevents+neuronal+loss+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Apolipoprotein E4 impairs the response of neurodegenerative retinal microglia and prevents neuronal loss in glaucoma.</a> Immunity. 55 (9), 1627-1644 (2022).</li>
<li>Vecino, E., Rodriguez, F. D., Ruzafa, N., Pereiro, X., Sharma, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glia-neuron+interactions+in+the+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Glia-neuron interactions in the mammalian retina.</a> Prog Retin Eye Res. 51, 1-40 (2016).</li>
<li>Livne-Bar, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte-derived+lipoxins+A4+and+B4+promote+neuroprotection+from+acute+and+chronic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Astrocyte-derived lipoxins A4 and B4 promote neuroprotection from acute and chronic injury.</a> J Clin Invest. 127 (12), 4403-4414 (2017).</li>
<li>Liddelow, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurotoxic+reactive+astrocytes+are+induced+by+activated+microglia%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neurotoxic reactive astrocytes are induced by activated microglia.</a> Nature. 541 (7638), 481-487 (2017).</li>
<li>Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mystery+and+magic+of+glia%3A+a+perspective+on+their+roles+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The mystery and magic of glia: a perspective on their roles in health and disease.</a> Neuron. 60 (3), 430-440 (2008).</li>
<li>Verkhratsky, A., Nedergaard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+astroglia%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Physiology of astroglia.</a> Physiol Rev. 98 (1), 239-389 (2018).</li>
<li>Colonna, M., Butovsky, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+function+in+the+central+nervous+system+during+health+and+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Microglia function in the central nervous system during health and neurodegeneration.</a> Annu Rev Immunol. 35, 441-468 (2017).</li>
<li>Tezel, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+regulation+of+neuroinflammation+in+glaucoma%3A+current+knowledge+and+the+ongoing+search+for+new+treatment+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Molecular regulation of neuroinflammation in glaucoma: current knowledge and the ongoing search for new treatment targets.</a> Prog Retin Eye Res. 87, 100998(2022).</li>
<li>Sappington, R. M., Carlson, B. J., Crish, S. D., Calkins, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+microbead+occlusion+model%3A+a+paradigm+for+induced+ocular+hypertension+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">The microbead occlusion model: a paradigm for induced ocular hypertension in rats and mice.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 51 (1), 207-216 (2010).</li>
<li>Schlamp, C. L., Li, Y., Dietz, J. A., Janssen, K. T., Nickells, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+ganglion+cell+loss+and+optic+nerve+degeneration+in+DBA%2F2J+mice+is+variable+and+asymmetric%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Progressive ganglion cell loss and optic nerve degeneration in DBA/2J mice is variable and asymmetric.</a> BMC Neurosci. 7, 66(2006).</li>
<li>Paschalis, E. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permanent+neuroglial+remodeling+of+the+retina+following+infiltration+of+CSF1R+inhibition-resistant+peripheral+monocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Permanent neuroglial remodeling of the retina following infiltration of CSF1R inhibition-resistant peripheral monocytes.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 115 (48), E11359-E11368 (2018).</li>
<li>Rutigliani, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Widespread+retina+and+optic+nerve+neuroinflammation+in+enucleated+eyes+from+glaucoma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol+Commun%22%5BJournal%5D)">Widespread retina and optic nerve neuroinflammation in enucleated eyes from glaucoma patients.</a> Acta Neuropathol Commun. 10 (1), 118(2022).</li>
<li>Foo, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+method+for+the+purification+and+culture+of+rodent+astrocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Development of a method for the purification and culture of rodent astrocytes.</a> Neuron. 71 (5), 799-811 (2011).</li>
<li>Batiuk, M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+immunoaffinity-based+method+for+isolating+ultrapure+adult+astrocytes+based+on+ATP1B2+targeting+by+the+ACSA-2+antibody%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">An immunoaffinity-based method for isolating ultrapure adult astrocytes based on ATP1B2 targeting by the ACSA-2 antibody.</a> J Biol Chem. 292 (21), 8874-8891 (2017).</li>
<li>Timmerman, R., Burm, S. M., Bajramovic, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+in+vitro+methods+to+study+microglia%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">An overview of in vitro methods to study microglia.</a> Front Cell Neurosci. 12, 242(2018).</li>
<li>Batiuk, M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+region-specific+astrocyte+subtypes+at+single+cell+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Identification of region-specific astrocyte subtypes at single cell resolution.</a> Nat Commun. 11 (1), 1220(2020).</li>
<li>Cullen, P. F., Sun, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocytes+of+the+eye+and+optic+nerve%3A+heterogeneous+populations+with+unique+functions+mediate+axonal+resilience+and+vulnerability+to+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Ophthalmol+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">Astrocytes of the eye and optic nerve: heterogeneous populations with unique functions mediate axonal resilience and vulnerability to glaucoma.</a> Front Ophthalmol (Lausanne). 3, 1217137(2023).</li>
<li>Cullen, P. F., Gammerdinger, W. J., Ho Sui, S. J., Mazumder, A. G., Sun, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+profiling+of+retinal+astrocytes+identifies+a+specific+marker+and+points+to+functional+specialization%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Transcriptional profiling of retinal astrocytes identifies a specific marker and points to functional specialization.</a> Glia. 72 (9), 1604-1628 (2024).</li>
<li>Cullen, P. F., Mazumder, A. G., Sun, D., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+isolation+of+intact+retinal+astrocytes%3A+a+novel+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol+Commun%22%5BJournal%5D)">Rapid isolation of intact retinal astrocytes: a novel approach.</a> Acta Neuropathol Commun. 11 (1), 154(2023).</li>
<li>Li, F., Jiang, D., Samuel, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+in+the+developing+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Dev%22%5BJournal%5D)">Microglia in the developing retina.</a> Neural Dev. 14 (1), 12(2019).</li>
<li>Jeon, C. J., Strettoi, E., Masland, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+major+cell+populations+of+the+mouse+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The major cell populations of the mouse retina.</a> J Neurosci. 18 (21), 8936-8946 (1998).</li>
<li>Wolfes, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+culturing+stellate+astrocytes+reveals+spatially+distinct+Ca2%2B+signaling+and+vesicle+recycling+in+astrocytic+processes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gen+Physiol%22%5BJournal%5D)">A novel method for culturing stellate astrocytes reveals spatially distinct Ca2+ signaling and vesicle recycling in astrocytic processes.</a> J Gen Physiol. 149 (1), 149-170 (2017).</li>
<li>Johnson, T. V., Martin, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+an+adult+retinal+explant+organotypic+tissue+culture+system+as+an+in+vitro+intraocular+stem+cell+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of an adult retinal explant organotypic tissue culture system as an in vitro intraocular stem cell transplantation model.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49 (8), 3503-3512 (2008).</li>
<li>Tao, C., Zhang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+proteoglycans+act+as+cellular+receptors+for+basement+membrane+assembly+to+control+astrocyte+migration+and+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Retinal proteoglycans act as cellular receptors for basement membrane assembly to control astrocyte migration and angiogenesis.</a> Cell Rep. 17 (7), 1832-1842 (2016).</li>
<li>Schaeffer, J., Delpech, C., Albert, F., Belin, S., Nawabi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+mouse+retina+explants%3A+from+ex+vivo+to+in+vivo+model+of+central+nervous+system+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Adult mouse retina explants: from ex vivo to in vivo model of central nervous system injuries.</a> Front Mol Neurosci. 13, 599948(2020).</li>
<li>Vagaja, N. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+murine+hyalocytes+are+valuable+early+indicators+of+ocular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Changes in murine hyalocytes are valuable early indicators of ocular disease.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 53 (3), 1445-1451 (2012).</li>
<li>Alarautalahti, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viability+of+mouse+retinal+explant+cultures+assessed+by+preservation+of+functionality+and+morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Viability of mouse retinal explant cultures assessed by preservation of functionality and morphology.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 60 (6), 1914-1927 (2019).</li>
<li>Rodrigues, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+vital+dyes+in+ocular+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Surv+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The use of vital dyes in ocular surgery.</a> Surv Ophthalmol. 54 (5), 576-617 (2009).</li>
<li>Shamir, E. R., Ewald, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+organotypic+culture%3A+experimental+models+of+mammalian+biology+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional organotypic culture: experimental models of mammalian biology and disease.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 15 (10), 647-664 (2014).</li>
<li>Antonetti, D. A., Silva, P. S., Stitt, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+understanding+of+the+molecular+and+cellular+pathology+of+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Current understanding of the molecular and cellular pathology of diabetic retinopathy.</a> Nat Rev Endocrinol. 17 (4), 195-206 (2021).</li>
<li>Kinuthia, U. M., Wolf, A., Langmann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+and+inflammatory+responses+in+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Microglia and inflammatory responses in diabetic retinopathy.</a> Front Immunol. 11, 564077(2020).</li>
<li>Reboussin, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+neuroprotective+and+immunomodulatory+properties+of+mesenchymal+stem+cells+in+an+ex+vivo+retinal+explant+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">Evaluation of neuroprotective and immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells in an ex vivo retinal explant model.</a> J Neuroinflammation. 19 (1), 63(2022).</li>
<li>Do, M. T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melanopsin+and+the+intrinsically+photosensitive+retinal+ganglion+cells%3A+biophysics+to+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Melanopsin and the intrinsically photosensitive retinal ganglion cells: biophysics to behavior.</a> Neuron. 104 (2), 205-226 (2019).</li>
<li>Yu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+target+synaptic+sites+early+during+excitatory+circuit+disassembly+in+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">Microglia target synaptic sites early during excitatory circuit disassembly in neurodegeneration.</a> iScience. 28 (4), 112201(2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>#11 להבי אזמל</td><td>בארד-פרקר</td><td>3,71,311</td><td></td></tr><tr><td>1 מ"ל פיפט ('Pipetman P1000')</td><td>גילסון</td><td>F144059M</td><td></td></tr><tr><td>צלחת פטרי 100 מ"מ</td><td>פלקון</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>16% פרפורמלדהיד</td><td>טד פלה בע"</td>מ <td>18,505</td><td>מדולל ל-4% לקיבוע</td></tr><tr><td>24 באר פלקון פלקון</td><td></td><td>353047</td><td>לקיבוע, חסימה ו דגירה של נוגדנים</td></tr><tr><td>35 מ"מ צלחת פטרי</td><td>Falcon</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>צלחת 6 בארות וערכת הכנסה</td><td>Greiner bio-one</td><td>657641</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488-Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L)</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc.&nbsp;</td><td>711-545-152</td><td>1:800 דילול</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 חמור נגד חולדות IgG (H+L) נספג מאוד</td><td>Invitrogen</td><td>A-21209</td><td>1:800 דילול</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594-F(ab')2 חמור נגד עכבר IgG (H+L)&nbsp;</td><td>מעבדות ג'קסון למחקר חיסוני, בע"מ&nbsp;</td><td>715-586-150</td><td>1:800 דילול</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647-Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L)</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc.&nbsp;</td><td>706-605-148</td><td>1:800 דילול</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647-F(ab')2 חמור נגד עוף IgY (IgG) (H+L)&nbsp;</td><td>מעבדות ג'קסון למחקר חיסוני, בע"מ&nbsp;</td><td>703-606-155</td><td>1:800 דילול</td></tr><tr><td>מלקחיים זוויתיים ('5/45')</td><td>FST / Dumont</td><td>11251-35</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן נגד Brn3a (עכבר)</td><td>Chemicon</td><td>MAB1585</td><td>1:200 דילול</td></tr><tr><td>נוגדן נגד CD206 (חולדה)</td><td>Biorad</td><td>MCA2235</td><td>1:200 דילול</td></tr><tr><td>נוגדן נגד GFAP (עוף)</td><td>Abcam</td><td>ab4674</td><td>1:1000 דילול</td></tr><tr><td>נגד Iba1 נוגדן (ארנב)</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation</td><td>019-19741</td><td>1:500 דילול</td></tr><tr><td>אנטי-Tmem119 נוגדן (שרקן)</td><td>מערכות סינפטיות</td><td>400 004</td><td>1:500 דילול</td></tr><tr><td>B-27, 50x</td><td>Gibco (Thermofisher)</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים מעוקלים קהים ('Extra Fine Graefe)FST</td><td></td> <td>11152-10</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר אלבומין</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>A9647</td><td>השתמש ב-1% w/v לחסימה ודגירת נוגדנים</td></tr><tr><td>ערכת סינון (0.2 ומיקרו; m קרום aPES, מסנן עליון בקבוק 150 מ"ל)&nbsp;</td><td>FisherScientific</td><td>FB12566508</td><td></td></tr><tr><td>מברשת עדינה, גודל 3/0</td><td>Princeton Art & Brush Co.</td><td>06435-1030</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMax</td><td>Gibco (Thermofisher)</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>מגבוני מעבדה (מגבוני קים)&nbsp;</td><td>KIMTECH</td><td>34155</td><td></td></tr><tr><td>N-2, 100x</td><td>Gibco (Thermofisher)</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>Neurobasal-A Medium, מינוס פנול</td><td>אדום Gibco (Thermofisher)</td><td>12349015</td><td></td></tr><tr><td>סרום חמור רגיל</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc.&nbsp;</td><td>017-000-121</td><td>שימוש ב-10% לחסימה ודגירת נוגדנים</td></tr><tr><td>פניצילין-סטרפטומיצין</td><td>גיבקו (תרמופישר)15140122</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>טיפים לפיפט, 1000 ומיקרו; L</td><td>TipOne</td><td>1126-7810</td><td></td></tr><tr><td>מספריים קפיצים ('Cohan-Vannas')</td><td>FST</td><td>15000-11</td><td></td></tr><tr><td>מים סטריליים ('Dnase, Rnase free')</td><td>Invitrogen</td><td>10977-015</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Gibco</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים ישרים ('מיני')</td><td>FST / Dumont</td><td>11200-14</td><td></td></tr><tr><td>פיפט העברה, 5.8 מ"ל</td><td>FisherScientific</td><td>13-711-9AMMD</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Thermo Scientific Chemicals</td><td>A16046. שימוש</td><td>ב-AP ב-0.5% לחסימה ודגירת נוגדנים</td></tr></tbody></table>

מודל ex vivo explant לחקר אינטראקציות גליה ברשתית העכבר

An Ex Vivo Explant Model for Studying Glial Interactions in the Mouse Retina

בקנה מידה מאקרוסקופי, הרשתית המושתל נותר ללא שינוי בנקודות זמן של יום אחד ושלושה, אם כי בפעם האחרונה הן הופכות לשבריריות יחסית, מה שמחייב טיפול זהיר לפני קיבוע או נקודות קצה ניסיוניות אחרות. הרשתית צריכה להיות שטוחה יחסית, ללא קיפול (מה שעלול לגרום להפרעה מקומית לדיפוזיה של חמצן וחומרים מזינים), וצריכה להיות תלויה במדיה בין ממשק האוויר-נוזל לתוספת תרבית התא. ביום השלישי עלול להיווצר פס קלוש בתחתית התוסף מתחת לרקמה התלויה; בדיקה עם מיקרוסקופ ניגודיות פאזה ברייטפילד מצביעה על כמות מתונה של נשירה של פסולת תאית, ככל הנראה המ...

The role of glia in glaucoma is an increasingly prominent research topic, but much remains unknown about how populations of these support cells - namely ...

an-ex-vivo-explant-model-for-studying-glial-interactions-mouse

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

כאן אנו מציגים שתי טכניקות מניפולציה ביטוי גנים בתאי הגנגליון ברשתית Murine (RGCs) על...

ב electroporation ברחם לשעבר vivo על ביטוי גנים בתאים עכבר גנגליון רשתית

מאמר זה מדגים וידאו הקמת organotypic תרבויות wholemount הרשתית הליך cytospin לניתוח תופעות המושרה exogenously. Organotypic תרבויות wholemount רשתית לחקות...

בשנת vivo, כמו תרבות Wholemount Murine Organotypic רשתית

כאן אנו מפתחים את הכלים הדרושים...

Ex vivo הדמיה חיה של חלוקות תא יחיד בNeuroepithelium מאוס

סרטון זה מדגים את הרבייה של תאי גליה מולר (MG) שבודדו מרשתיות עכבר. הרשתית מנותקת לתרחיף חד-תאי באמצעות אנזימי עיכול. לאחר מכן מגדלים תאים בתווך עם גורם גדילה המקדם התרבות תאי MG ותמותת תאים עצביים. תאי עצב מתים מוסרים תוך כדי מעבר, ותאי MG גדלים לניתוח נוסף.

הקמת תרבית תאי גליה מולר המתקבלת מרשתיות עכבר

מקור: בוסקו, א., .  In vivo דינמיקה של הפעלת מיקרוגליה ברשתית במהלך ניוון עצבי: הדמיה אופטלמוסקופית קונפוקלית ומורפומטריית תאים בגלאוקומה של עכברים. J. Vis. Exp. (2015)} סרטון זה מדגים הדמיה in vivo של מיקרוגליה ברשתית במודל עכבר של גלאוקומה. עכבר טרנסגני עם מיקרוגליה ברשתית המבטאת חלבון פלואורסצנטי ממוקם מתחת לאופטלמוסקופ. תאורת אינפרא אדום משמשת לאיתור ראש עצב הראייה (ONH), ומישור המוקד נוצר באמצעות כלי דם ברשתית כציוני דרך. לאחר מכן משתמשים בהדמיה פלואורסצנטית כדי להמחיש את המיקרוגליה...

הדמיה in vivo של מיקרוגליה ברשתית במודל עכבר של גלאוקומה

בדו ח זה, היתרונות של תרבויות organotypic ותרבויות הפומבית העיקרי של העכבר, נגזר שורש העזוב הגרעינים מודגשים לחקור מגוון רחב של מנגנונים הקשורים אינטראקציה נוירון-גליה, והנוירולוגיה הפלסטית, neuroinflammation, בתגובה זיהום ויראלי.

Explant של עכבר למבוגרים DRG הפומבית תא מודלים לחקור והנוירולוגיה הפלסטית ואת התגובות עלבונות סביבתי כולל זיהום ויראלי

הvivo לשעבר פרוסה מאפשרת העצב outculמניע העצבים כדי להיות בתמונה בזמן אמת. פרוסות מופקים על ידי הטבעת e 10.5 איי. איי. או. עוברי העוברים ב-agarose, הפרוסות על הרטט, וגדלים בחממה בשלב העליון. התפקיד של מסלולים הדרכה אקסון מוערך על ידי הוספת מעכבי התקשורת התרבות.

לשעבר Vivo Oculomotor ניע את התרבות של מעובריים GFP-הביע עכברים עבור זמן הדמיה של מניע העצבי החיצוני

הפרוטוקול מתאר explants organotypic שלרשתית נוירוהעכבר , מעובד יחד עם אפיתל פיגמנט הרשתית שלה (RPE), במדיום R16 מוגדר, ללא סרום ואנטיביוטיקה. שיטה זו פשוטה יחסית לביצוע, זולה יותר וגוזלת זמן בהשוואה לניסויי vivo, וניתן להתאים אותה ליישומים ניסיוניים רבים.

טווח ארוך, טיפוח ללא סרום של אורגנוטיפי עכבר רשתית explants עם אפיתל פיגמנט רשתית שלם

הדמיית in vivo היא כלי רב עוצמה לחקר הביולוגיה בבריאות ובמחלות. פרוטוקול זה מתאר הדמיה טרנס-אימונית של רשתית העכבר באמצעות מיקרוסקופ סטנדרטי של שני פוטונים. הוא גם מדגים שיטות שונות של הדמיה חיה כדי לתייג פלואורסצנטיות קבוצות תאים מרובות של הרשתית.

הדמיה טרנס-אימונית של שני פוטונים In vivo של רשתית העכבר

פרוטוקול זה מציג ומתאר שלבים לבידוד, דיסקציה, התרבות והכתמה של צמחי רשתית המתקבלים מעכבר בוגר. שיטה זו מועילה כמודל ex vivo לחקר מחלות נוירו-וסקולריות שונות ברשתית כגון רטינופתיה סוכרתית.

השתלת הרשתית של הרשתית של עכבר בוגר כמודל ex vivo לחקר מחלות נוירו-וסקולריות ברשתית

מאמר זה מדגים שיטה לדמיון וכימות תנועתיות מיקרוגליה ומגע עם פונקטות פוסט-סינפטיות ברשתית באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית של דיסק מסתובב.

הדמיה חיה ואפיון של דינמיקת מיקרוגליה ואינטראקציות עם סינפסות ברשתית עכברים חולים

חקור מודל explant ex vivo לחקר אינטראקציות גליה ברשתית העכבר. הפרוטוקול משמר את הסביבה הטבעית של התאים ומאפשר חקירה מדויקת של תפקודים פיזיולוגיים בנוירואינפלמציה ובגלאוקומה.

מודל ex vivo explant לחקר אינטראקציות גליה ברשתית העכבר

גלה סרטונים נוספים