Name: הקמת מערכת גידול תריפס צילי (Scirtothrips dorsalis Hood) לבדיקת אלימות של פטריות אנטומופתוגניות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-18T15:50:00.000+00:00
Duration: 11 min 35 s
Description: למדו פרוטוקול ביו-אסיי עלים נתלים לגידול מוני של תריפס צ'ילי (Scirtothrips dorsalis) במיכלי זכוכית עם אגר. השיטה מבטיחה שרידות גבוהה ופיתוח מסונכרן של זחלי הגיל השני לבדיקת אלימות פטריות אנטומופתוגניות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Kumar, V., Kakkar, G., McKenzie, C. L., Seal, D. R., Osborne, L. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKumar%2C+V+%22Weed+and+pest+control-conventional+and+new+challenges%22">Weed and pest control-conventional and new challenges</a>. , 53-77 (2013).</li>
<li>Hoddle, M. Scirtothrips dorsalis (chilli thrips). <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHoddle%2C+M+%22CABI+Compendium%22">CABI Compendium</a>. , Wallingford, CT, USA. (2022).</li>
<li>Liburd, O. E., Panthi, B. R., Phillips, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chilli+thrips+on+blueberries+in+Florida%3A+ENY2053%2FIN1298%5BTitle%5D)+AND+%22EDIS%22%5BJournal%5D)">Chilli thrips on blueberries in Florida: ENY2053/IN1298.</a> EDIS. 2020 (6), (2020).</li>
<li>Gopal, K., Krishna Reddy, M., Reddy, M., Muniyappa, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transmission+of+peanut+yellow+spot+virus+%28PYSV%29+by+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+in+groundnut%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Phytopathol+Plant+Prot%22%5BJournal%5D)">Transmission of peanut yellow spot virus (PYSV) by thrips, Scirtothrips dorsalis Hood in groundnut.</a> Arch Phytopathol Plant Prot. 43 (5), 421-429 (2010).</li>
<li>Prasada Rao, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+host+range+of+tobacco+streak+virus+in+India+and+transmission+by+thrips%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Appl+Biol%22%5BJournal%5D)">The host range of tobacco streak virus in India and transmission by thrips.</a> Ann Appl Biol. 142 (3), 365-368 (2003).</li>
<li>Chang, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Construction+and+selection+of+an+entomopathogenic+fungal+library+from+soil+samples+for+controlling+Spodoptera+litura%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Sustain+Food+Syst%22%5BJournal%5D)">Construction and selection of an entomopathogenic fungal library from soil samples for controlling Spodoptera litura.</a> Front Sustain Food Syst. 5, 596316(2021).</li>
<li>Yang, C. J., Nai, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+aphidicidal+effect+of+entomopathogenic+fungi+against+mustard+aphid%2C+Lipaphis+erysimi+%28Kalt.%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Assessment of aphidicidal effect of entomopathogenic fungi against mustard aphid, Lipaphis erysimi (Kalt.).</a> J Vis Exp. (197), e65312(2023).</li>
<li>Liu, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+selection+of+entomopathogenic+fungi+from+soil+samples+and+evaluation+of+fungal+virulence+against+insect+pests%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation and selection of entomopathogenic fungi from soil samples and evaluation of fungal virulence against insect pests.</a> J Vis Exp. (175), e62882(2021).</li>
<li>Aristizábal, L., Chen, Y., Cherry, R., Cave, R., Arthurs, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+biorational+insecticides+against+chilli+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%2C+infesting+roses+under+nursery+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Entomol%22%5BJournal%5D)">Efficacy of biorational insecticides against chilli thrips, Scirtothrips dorsalis (Thysanoptera: Thripidae), infesting roses under nursery conditions.</a> J Appl Entomol. 141 (4), 274-284 (2017).</li>
<li>Francis, J. R., Manchegowda, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+phylogenetic+identification+of+Metarhizium+and+Beauveria+and+their+bio-efficacy+against+chilli+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Trop+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">Molecular phylogenetic identification of Metarhizium and Beauveria and their bio-efficacy against chilli thrips, Scirtothrips dorsalis.</a> Int J Trop Insect Sci. 43 (3), 909-918 (2023).</li>
<li>Arthurs, S. P., Aristizábal, L. F., Avery, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+entomopathogenic+fungi+against+chilli+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of entomopathogenic fungi against chilli thrips, Scirtothrips dorsalis.</a> J Insect Sci. 13 (1), 31(2013).</li>
<li>Subramaniam, M. S. R., Babu, A., Deka, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lecanicillium+lecanii+%28Zimmermann%29+Zare+%26+Gams+as+an+efficient+biocontrol+agent+of+tea+thrips%2C+Scirtothrips+bispinosus+Bagnall+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Egypt+J+Biol+Pest+Control%22%5BJournal%5D)">Lecanicillium lecanii (Zimmermann) Zare & Gams as an efficient biocontrol agent of tea thrips, Scirtothrips bispinosus Bagnall (Thysanoptera: Thripidae).</a> Egypt J Biol Pest Control. 31, 1-14 (2021).</li>
<li>Panyasiri, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+efficacy+of+Purpureocillium+lilacinum+against+chilli+thrips+%28Scirtothrips+dorsalis%29+on+chili+plant%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Control efficacy of Purpureocillium lilacinum against chilli thrips (Scirtothrips dorsalis) on chili plant.</a> Insects. 13 (8), 684(2022).</li>
<li>Perera, M., Senanayake, N., Dissanayake, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+Amblyseius+swirskii+%28predatory+mite%29+and+Orius+laevigatus+as+biological+control+agents+of+chilli+thrips+%28Scirtothrips+dorsalis%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ceylon+J+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of Amblyseius swirskii (predatory mite) and Orius laevigatus as biological control agents of chilli thrips (Scirtothrips dorsalis).</a> Ceylon J Sci. 50 (4), 541(2021).</li>
<li>Han, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+pupation+environment+on+pupal+development+and+eclosion+of+chilli+thrips+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Entomol%22%5BJournal%5D)">Effect of pupation environment on pupal development and eclosion of chilli thrips (Thysanoptera: Thripidae).</a> Environ Entomol. 54 (1), 223-230 (2025).</li>
<li>Tatara, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+temperature+and+host+plant+on+the+development%2C+fertility+and+longevity+of+Scirtothrips+dorsalis+Hood+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Entomol+Zool%22%5BJournal%5D)">Effect of temperature and host plant on the development, fertility and longevity of Scirtothrips dorsalis Hood (Thysanoptera: Thripidae).</a> Appl Entomol Zool. 29 (1), 31-37 (1994).</li>
<li>Kumar, V., Seal, D. R., Osborne, L. S., McKenzie, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coupling+scanning+electron+microscopy+with+DNA+barcoding%3A+a+novel+approach+for+thrips+identification%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Entomol+Zool%22%5BJournal%5D)">Coupling scanning electron microscopy with DNA barcoding: a novel approach for thrips identification.</a> Appl Entomol Zool. 49, 403-409 (2014).</li>
<li>Silva, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seasonal+abundance+of+cotton+thrips+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+across+crop+and+non-crop+vegetation+in+an+Australian+cotton-producing+region%5BTitle%5D)+AND+%22Agric+Ecosyst+Environ%22%5BJournal%5D)">Seasonal abundance of cotton thrips (Thysanoptera: Thripidae) across crop and non-crop vegetation in an Australian cotton-producing region.</a> Agric Ecosyst Environ. 256, 226-238 (2018).</li>
<li>Venette, R., Davis, E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVenette%2C+R+%22Chilli+thrips%2Fyellow+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+mini+pest+risk+assessment%22">Chilli thrips/yellow thrips, Scirtothrips dorsalis Hood (Thysanoptera: Thripidae) mini pest risk assessment</a>. , Univ Minnesota Tech Bull. (2004).</li>
<li>Mandi, N., Senapati, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+chemical%2C+botanical+and+microbial+insecticides+for+control+of+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+infesting+chilli%5BTitle%5D)+AND+%22J+Plant+Prot+Sci%22%5BJournal%5D)">Integration of chemical, botanical and microbial insecticides for control of thrips, Scirtothrips dorsalis Hood infesting chilli.</a> J Plant Prot Sci. 1 (1), 92-95 (2009).</li>
<li>Samota, R., Jat, B., Choudhary, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+newer+insecticides+and+biopesticides+against+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+in+chilli%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacogn+Phytochem%22%5BJournal%5D)">Efficacy of newer insecticides and biopesticides against thrips, Scirtothrips dorsalis Hood in chilli.</a> J Pharmacogn Phytochem. 6 (4), 1458-1462 (2017).</li>
<li>Panthi, B. R., Renkema, J. M., Lahiri, S., Liburd, O. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+short-range+movement+of+Scirtothrips+dorsalis+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+and+rate+of+spread+of+feeding+injury+among+strawberry+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Entomol%22%5BJournal%5D)">The short-range movement of Scirtothrips dorsalis (Thysanoptera: Thripidae) and rate of spread of feeding injury among strawberry plants.</a> Environ Entomol. 50 (1), 12-18 (2021).</li>
<li>Priyanka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology+and+morphometrics+of+Thrips+parvispinus+%28Karny%29+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+on+chilli%2C+Capsicum+annuum+L%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Hortic+Ecosyst%22%5BJournal%5D)">Biology and morphometrics of Thrips parvispinus (Karny) (Thysanoptera: Thripidae) on chilli, Capsicum annuum L.</a> Pest Manag Hortic Ecosyst. 30 (1), 85-92 (2024).</li>
<li>Hemalatha, S., Ramaraju, K., Jeyarani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+entomopathogenic+fungi+and+delivery+methods+for+management+of+thrips+in+chillies%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Veg+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of entomopathogenic fungi and delivery methods for management of thrips in chillies.</a> Int J Veg Sci. 23 (3), 246-259 (2017).</li>
<li>Xu, X. M., Guerin, L., Robinson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+temperature+and+relative+humidity+on+conidial+germination+and+viability%2C+colonization+and+sporulation+of+Monilinia+fructigena%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">Effects of temperature and relative humidity on conidial germination and viability, colonization and sporulation of Monilinia fructigena.</a> Plant Pathol. 50 (5), 561-568 (2001).</li>
<li>Lee, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+response+of+bean+bug+%28Riptortus+pedestris%29+upon+infection+with+entomopathogenic+fungus%2C+Beauveria+bassiana+JEF-007%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Sci%22%5BJournal%5D)">Transcriptional response of bean bug (Riptortus pedestris) upon infection with entomopathogenic fungus, Beauveria bassiana JEF-007.</a> Pest Manag Sci. 75 (2), 333-345 (2019).</li>
<li>Yang, Y. -T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Up-regulation+of+carbon+metabolism-related+glyoxylate+cycle+and+toxin+production+in+Beauveria+bassiana+JEF-007+during+infection+of+bean+bug%2C+Riptortus+pedestris+%28Hemiptera%3A+Alydidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Fungal+Biol%22%5BJournal%5D)">Up-regulation of carbon metabolism-related glyoxylate cycle and toxin production in Beauveria bassiana JEF-007 during infection of bean bug, Riptortus pedestris (Hemiptera: Alydidae).</a> Fungal Biol. 120 (10), 1236-1248 (2016).</li>
<li>Qayyum, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Entomopathogenic+fungi%3A+prospects+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Entomopathogenic+Fungi%3A+Prospects+and+Challenges%22%5BJournal%5D)">Entomopathogenic fungi: prospects and challenges.</a> Entomopathogenic Fungi: Prospects and Challenges. , 57-79 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>#00 סיכת חרקים</td><td>אנטוסופינקס&nbsp;</td><td>DMM0220</td><td>תוצרת בריטניה</td></tr><tr><td>צינור צנטריפוגה 1.5 מ"ל</td><td>קורנינג התאגדה</td><td>MCT-175-C</td><td>תוצרת ארה"ב</td></tr><tr><td>10 &mu; L לולאת חיסון</td><td>NEST מדעי</td><td>718201</td><td>תוצרת ארה"ב</td></tr><tr><td>סולם DNA 100 bp III</td><td>ג'נאיד</td><td>DL007</td><td>תוצרת טייוואן.</td></tr><tr><td>2x SuperRed PCR מאסטר מיקס</td><td>ביו-כלים</td><td>TE-SR01</td><td>תוצרת טייוואן</td></tr><tr><td>צלחת פטרי 6 ס"מ</td><td>אלפא פלוס סיינטיפיק</td><td>16021</td><td>תוצרת טייוואן</td></tr><tr><td>אגר</td><td>ביומן סיינטיפיק</td><td>AGR001.1</td><td>כיתה מיקרוביולוגיה</td></tr><tr><td>אגרוז</td><td>ביומן סיינטיפיק</td><td>PB1200</td><td>תוצרת טייוואן</td></tr><tr><td>מאגר ג'ל DNA בטוח של BioGreen</td><td>ביומן סיינטיפיק</td><td>SDB001T</td><td>תוצרת טייוואן</td></tr><tr><td>ערכת רקמות מיצוי DNA קלה במהירות גבוהה</td><td>פישר ביוטק</td><td>ET-100</td><td>https://www.fisherbiotec.com.au/wp-content/uploads/2021/11/FB-EDNA-DNA-Kits-flyer-11Nov21.pdf (תוצרת אוסטרליה)</td></tr><tr><td>פריימר קדמי: LCO 1490</td><td>גנומיקה&nbsp;</td><td>PO-PR220919G6</td><td>רצף: 5'-GGT CAA CAA ATC ATA AAG ATA TTG G-3'</td></tr><tr><td>ערכת ג'ל/PCR של GenepHlow</td><td>ג'נאיד</td><td>DFH300</td><td>http://www.protech-bio.com/UserFiles/file/Gene-Spin%20Genomic%20DNA%20Kit.pdf</td></tr><tr><td>מיכל גידול זכוכית&nbsp;</td><td>חברת סאנשיין לאב ציוד</td><td></td><td>גודל: 35 מ"מ גובה, 45 מ"מ קוטר פנימי. ניתן להחלפה בכל גודל דומה של פלסטיק או זכוכית.</td></tr><tr><td>המוציטומטר</td><td>פול מרינפלד</td><td>640030</td><td>תוצרת גרמניה</td></tr><tr><td>חממה</td><td>הייפוינט</td><td>F740</td><td>תוצרת טייוואן</td></tr><tr><td>חותך עור</td><td>סדנת עבודת יד אמיתית</td><td></td><td><a href="https://shopee.tw/jj891004?categoryId=100636&amp; entryPoint=ShopByPDP& itemId=16023929406">https://shopee.tw/jj891004? categoryId=100636& entryPoint=ShopByPDP& itemId=16023929406</a></td></tr><tr><td>MiniAmp תרמי Cycler</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>א37834</td><td>תוצרת ארה"ב</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ אופטי&nbsp;</td><td>ניקון</td><td>&nbsp; סי-ל</td><td>תוצרת יפן</td></tr><tr><td>מכחול ציור</td><td>חברת מברשות טיאן צ'נג</td><td>4716608400352</td><td>ניתן להחליף במברשת צבעי מים עדינה, שוות ערך למברשת עגולה בגודל 0 או 1.</td></tr><tr><td>מגבת נייר</td><td>מאי פורח</td><td>BLS007-8</td><td>תוצרת טייוואן</td></tr><tr><td>פרפילם מ</td><td>במיס</td><td>PM-996</td><td>תוצרת ארה"ב</td></tr><tr><td>עלי גלולה</td><td>ביומן סיינטיפיק</td><td>GT100R</td><td>תוצרת טייוואן</td></tr><tr><td>פריימר הפוך: HCO 2198</td><td>גנומיקה&nbsp;</td><td>PO-PR220919G6</td><td>רצף: 5'-TAA ACT TCA GGG TGA CCA AAA AAT CA-3'</td></tr><tr><td>מרק דקסטרוז Sabouraud</td><td>היימדיה</td><td>MH033-500G</td><td>תוצרת הודו</td></tr><tr><td>סטריאומיקרוסקופ</td><td>סופטופ</td><td>שנז'ן71</td><td>תוצרת טייוואן</td></tr><tr><td>מאגר TAE 50X</td><td>ביומן סיינטיפיק</td><td>TAE501000</td><td>תוצרת טייוואן</td></tr><tr><td>טווין 80</td><td>PanReac AppliChem</td><td>142050.1661</td><td>תוצרת טייוואן</td></tr><tr><td>תיק רוכסן</td><td>חברת פלסטיק וונצ'ן</td><td>1809000061</td><td>גודל: רוחב 12 ס"מ ואורך 17 ס"מ. (תוצרת טייוואן)</td></tr></tbody></table>

הקמת מערכת גידול תריפס צ'ילי (scirtothrips dorsalis hood) לבדיקת אלימות של פטריות אנטומופתוגניות

Establishment of a Chilli Thrips (Scirtothrips dorsalis Hood) Rearing System for Virulence Screening of Entomopathogenic Fungi

תרשים הזרימה הניסיוני שהוצג במחקר זה הראה כי ניתן לבסס את מערכת הגידול היציבה של תריפס הצ'ילי, החל מאיסוף השדה ועד לסינון האלימות של מבודדי EPF (איור 1). למרות שתצפית מורפולוגית יכולה להבחין בין תריפס צ'ילי לתריפסים אחרים של פרחים, השימוש ברצף COI החלקי כסמן מולקולרי, כולל גודל אמפליקון PCR וריצוף COI, יכול לאשר עוד יותר את הזיהוי של תריפסים שנאספו בשדה כתריפס צ'ילי (איור 3). מערכת גידול העלים המנותקים מספקת סביבת בקרה טובה יותר ...

הקמת מערכת גידול תריפס צ'ילי (Scirtothrips dorsalis Hood) לבדיקת אלימות של פטריות אנטומופתוגניות

The chilli thrips (Scirtothrips dorsalis Hood) is an economically significant pest of ornamental and food crops in Taiwan. Entomopathogenic fungi (EPF) ...

תריפס צ'ילי הוא מזיק שנחקר היטב בגידולים מרובים. המחקר שלנו מתמקד בשיפור מערכת הרבייה של תריפס הצ'ילי ומרחיב את יישומיה על סינון פטרייתי אנטומופתוגני לניסויים עתידיים מחקרים אחרונים התמקדו בגידול המוני של תריפס צ'ילי על צמחים שלמים בתוך כלובים. חלקם בוחנים חלופות כמו עלים מנותקים, אך השיטות הברורות והמפורטות עדיין אינן מתוארות היטב.מחקר זה ביסס שיטות גידול המוני חדשות של תריפס המבוססות על עלים מנותקים, שיכולות להבטיח מושבות יציבות של תריפס צ'ילי. בנוסף, פותחה מערכת בדיקה ביולוגית יציבה וניתנת לשחזור לבדיקת אלימות פטריות אנטומופתוגניות. פרוטוקול זה מטפל בהיעדר שיטה סטנדרטית ברורה לשליטה בתריפסים באמצעות דיסק עלים, תוך התמקדות בשיפור ניהול הבמה והפחתת השימוש במשאבים.פרוטוקול זה מפשט את בקרת שלב ההתפתחות, מפחית את צרכי המקום והעבודה, ומספק אספקת תריפסים עקבית המתאימה לבדיקות ביולוגיות בקנה מידה גדול ואמינות. המעבדה שלנו תתמקד באופטימיזציה של שיטות גידול המוני ויישום פרוטוקול זה על מיני תריפסים שונים, שיפור תנאי הסביבה והטיפול כדי להבטיח אוכלוסיות עקביות ובריאות לבדיקות ביולוגיות. חוץ מזה, ניתן להרחיב את מערכת הגידול ההמוני לשימוש בניסוי חממה.כדי להתחיל, חותכים עלים ופרחים שורצים תריפס צ'ילי. העבירו אותם לשקית רוכסן מפלסטיק, והקפידו לאטום את השקית עם קצת אוויר בפנים כדי לשמור על הקרעים בחיים. לאחר מכן, השג מיכל גידול זכוכית בגובה 35 מילימטרים ובקוטר פנימי של 45 מילימטרים.הניחו שלוש שכבות של מגבת נייר עגולה, כל אחת בקוטר 40 מילימטרים, בתחתית המיכל. הוסף 8 עד 10 טיפות מים מסוננים על מגבות הנייר כדי לשמור על הלחות. כעת, שטפו היטב עלה מנגו צעיר.בדוק אותו במיקרוסקופ אופטי כדי לבדוק אם יש ביצי חרקים או זיהום חרקים אחר. בעזרת חותך עור חותכים את עלה המנגו לדיסק עגול בקוטר 40 מילימטרים ומניחים אותו על מגבת הנייר הרטובה בתוך מיכל גידול הזכוכית. צפו בתריפס הצ'ילי תחת מיקרוסקופ אופטי בהגדלה של פי 10.בעזרת מכחול ציור עדין, העבירו 10 תריפסים בוגרים הכוללים חמישה זכרים וחמש נקבות לתוך מיכל גידול הזכוכית המוכן. לאחר מכן אטמו כל מיכל גידול זכוכית בשתי שכבות של Parafilm. צור כ-40 חורים קטנים בפרפילם באמצעות סיכת חרקים מספר 0-0 כדי להבטיח אוורור נאות.הכניסו את מיכל גידול הזכוכית האטום לחממה למשך 48 שעות. התבונן ברקמות העלים תחת מיקרוסקופ סטריאו כדי לאשר נוכחות של ביציות המעידות על מיקום הביציות. לאחר מכן מניחים דיסק עלי מנגו טרי על העלה עם ביצים ומוסיפים 8 עד 10 טיפות מים מסוננים על מגבת הנייר כדי לשמור על לחות.לתחזוקת התריפסים, העבירו ישירות את העלה המכיל זחלי כוכב ראשון למיכל גידול זכוכית חדש. שימו לב לתריפס הצ'ילי מדי יום. לגידול המוני של תריפס הצ'ילי, אסוף תחילה תריפסים בוגרים נקבות מהאוכלוסייה המתוחזקת.העבירו 10 תריפסים בוגרים נקבות למיכל גידול מוכן לקבלת ביצים. לאחר מכן העבירו בעדינות כ-120 זחלי כוכב ראשון למיכל גידול זכוכית חדש באמצעות מכחול עדין. לזיהוי מולקולרי, אספו תריפס צ'ילי בוגר אחד לתוך צינור צנטריפוגה של 1.5 מיליליטר.הומוגניזציה של תריפס הצ'ילי בעזרת עלי גלולה. לאחר מכן לבודד DNA גנומי באמצעות ערכה מסחרית על פי פרוטוקול היצרן ולהגביר באמצעות PCR Master Mix. בדוק את אמפליקון ה-PCR על ידי אלקטרופורזה בג'ל אגרוז 1% כדי לאמת את תוצאת ההגברה.הסר את רצועת המטרה בגודל של כ-658 זוגות בסיסים מהג'ל. בצע חיפוש פיצוץ במסד הנתונים של NCBI באמצעות פרמטרי ברירת מחדל כדי לאשר את זהות המין. להכנת פטריות אנטומופתוגניות, הוסף שניים עד שלושה מיליליטר של 0.03% טווין 80 לפני השטח של תרבית פטרייתית בת 10 עד 14 יום שגדלה על 1/4 חוזק אגר דקסטרוז של סבורו.מגרדים בעדינות את הקונידיה באמצעות לולאה סטרילית. העבירו את התרחיף הפטרייתי לצינור צנטריפוגה נקי של 15 מיליליטר. ואז הומוגניזציה של המתלים על ידי מערבולת במהירות מרבית.סנן את המתלה דרך נייר סינון כדי להסיר פסולת היפיל ולקבל מתלה קונידיה טהור. השתמש בהמוציטומטר כדי לבדוק את מספר הקונידיות תחת מיקרוסקופ אור. יש לדלל את המתלים כדי להשיג ריכוז של 10 בחזקת 8 קונידיות למיליליטר.לאחר מכן העבירו את המתלה הקונידיאלי למיקרו מרסס מעוקר באור אולטרה סגול ליישום ביו-בדיקה לאחר מכן. אוספים ושוטפים עלי אוכמניות צעירים מחוות אוכמניות. לאחר ייבושם באוויר, בדוק את פני השטח שלהם תחת מיקרוסקופ סטריאו כדי לבדוק אם נותרו פרוקי רגליים או ביצים והסר אותם אם קיימים.כעת, חותכים דיסק עלים בקוטר 2.8 ס"מ בעזרת חותך עור. לאחר מכן יש לחטא את דיסק העלים בתמיסת נתרן היפוכלוריט של 1%. ושלושה שוטפים אותו פעמיים במים מעוקרים כדי להסיר שאריות אקונומיקה.לאחר מכן, שפכו שלושה מיליליטר של אגר מים 2.5% למיכלי זכוכית קטנים בתוך מכסה זרימה למינרית. לאחר מכן העבירו בעדינות את הצד האדאקסיאלי של דיסק העלים כלפי מעלה על האגר והטמיעו אותו מעט כך שרק חלק קטן יישאר חשוף מעל פני השטח. לאחר שהאגר מתמצק לחלוטין, שקול את מיכלי הזכוכית מוכנים לבדיקה ביולוגית.לפני היישום, מערבל היטב את המתלה הקונידיאלי. בעזרת מרסס מיקרו יש למרוח באופן שווה 0.1 מיליליטר מהמתלה על פני כל דיסק עלה ממרחק של כ -10 סנטימטרים בתוך מיכל הזכוכית. כעת השתמש במברשת צבע עדינה כדי להעביר זחלי כוכב של 10 שניות לכל מיכל זכוכית.אטמו כל מיכל בשתי שכבות של Parafilm. צור כ-30 חורים קטנים לאוורור בפרפילם באמצעות סיכת חרקים מספר 0-0. לאחר מכן הניחו את המכולות בחממה למשך שבעה ימים.התבונן ורשום את התמותה של תריפס צ'ילי תחת מיקרוסקופ סטריאו בהגדלה של פי 10 מדי יום למשך שבעה ימים. שמור את הזחלים המתים בתוך מיכל הזכוכית לתצפית על מיקוזיס כדי לאשר זיהום פטרייתי אנדו-פתוגני. לבדיקה ביולוגית של פטריות אנטומופתוגניות נבחרות, הכינו שלושה ריכוזים של מתלים קונידיאליים.חסנו את המתלים למיכלי גידול שונים. שנה את נתוני התמותה של כל זן פטרייתי באמצעות טרנספורמציה ארקסינית לפני ביצוע ANOVA חד כיווני כדי לקבוע הבדלים משמעותיים בין הטיפולים. לאחר מכן חשב את הזמן הקטלני החציוני ואת ערכי הריכוז הקטלני החציוני באמצעות ניתוח רגרסיה של צוואה.מאפיינים מורפולוגיים של תריפס צ'ילי בשלבי חיים שונים נצפו בבירור, כולל שלב הזחל המוקדם, שלב הזחל המאוחר והשלב הבוגר. הגברת תגובת שרשרת פולימראז המכוונת לגן COI החלקי ייצרה פס המאשר את זהותם של תריפסים שנאספו בשדה כתריפס צ'ילי. מערכת גידול העלים המנותקת תמכה בהצלחה בהקמת מושבת תריפס צ'ילי עם שיעור הישרדות של 90% שנצפה בקבוצת הביקורת במהלך תקופת התצפית של שבעה ימים.מבין מבודדי הפטרייה האנטומופתוגניים שנבדקו, Cordyceps cateniannulata NCHU-213 גרם לתמותה הגבוהה ביותר בזחלי תריפס צ'ילי שבעה ימים לאחר החיסון, ואחריו Cordyceps cateniannulata NCHU-298, בעוד Beauveria bassiana הראה אלימות נמוכה יותר. ערך ה-LT50 של 10 בחזקת 8 קונידיות למיליליטר של Cordyceps cateniannulata NCHU-213 ו-Cordyceps cateniannulata NCHU-298 הראה ערכים דומים והציג ימים קצרים יותר מאשר Beauveria bassiana. מיקוזיס נצפתה באופן גלוי על גופות תריפס הנגועות בבידוד קורדיספס כפי שניתן לראות בצמיחת הפטרייה המכסה את גופם.עלייה תלוית מינון בתמותה ניכרה בתריפסים שטופלו בקורדיספס קטניאנולאטה NCHU-213 בארבעה וחמישה ימים לאחר החיסון, בעוד שהתמותה הגבוהה ביותר של 71.4% נצפתה ב-10 בחזקת 7 קונידיות למיליליטר לאחר שבעה ימים, ואחריה 58.9% בחזקת 10 בחזקת 8 קונידיות למיליליטר, ו-44.4% בחזקת 10 בחזקת 6 קונידיות למיליליטר.

establishment-chilli-thrips-scirtothrips-dorsalis-hood-rearing-system

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

פרוטוקול זה מדגים שתי שיטות חיסון להציג entomopathogen...

הקמת Entomopathogens פטרייתיים כEndophytes: לקראת ההדברה ביולוגית Endophytic

כאן אנו מדווחים על השלבים השונים המעורבים בפיתוח המבוסס על ידע של קוטל חיטוי יעיל, כולל הבידוד, הזיהוי, ההקרנה וההבחנה של הפטרייה האנטומופתוגנית ה"מתאימה ביותר ", Metarhium anisopliae , לשליטה על מזיקים לחרקים בחקלאות .

פיתוח של<em&gt; מטריציום anisopliae</em&gt; כמקוטלת חיידקים: מהבידוד לביצועי שדה

להלן פרוטוקולים לאיסוף והזרקה זעירה של עוברי תירס קדם-תאיים לצורך שינוי הגנום שלהם באמצעות עריכת גנום מבוססת CRISPR/Cas9 או להוספת אלמנטים מסומנים הניתנים להעברה באמצעות טרנספורמציה של קו הנבט.

מיקרו-הזרקה של תירס פלנטהופר, Peregrinus maidis, עוברים לעריכת גנום CRISPR/Cas9

כאן אנו מציגים פרוטוקול המבוסס על מערכת פיתיון תולעי הארוחות (Tenebrio molitor) ששימשה לבידוד ובחירה של פטריות אנטומופתוגניות (EPF) מדגימות קרקע. נוסחת מספר קונידיה יעילה (ECN) משמשת לבחירת EPF עמיד בפני מתח גבוה המבוסס על מאפיינים פיזיולוגיים לבקרת מזיקים מיקרוביאלית בתחום.

בידוד ובחירה של פטריות אנטומופתוגניות מדגימות קרקע והערכה של אלימות פטרייתית נגד מזיקי חרקים

מושבות פטרייתיות אנטומופתוגניות מבודדות מדגימות קרקע טרופיות באמצעות פיתיון טנבריו , פיתיון גלריה , כמו גם מדיום מלאכותי סלקטיבי, כלומר, אגר דקסטרוז תפוחי אדמה מועשר בתמצית שמרים בתוספת כלוראמפניקול, תיאבנדזול וציקלוהקסימיד (מדיום CTC).

השוואה בין שיטות לבידוד פטריות אנטומופתוגניות מדגימות קרקע

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה אמינה ופשוטה לגידול, איסוף וסינון של Ditylenchus dipsaci.

גידול והקרנה של הנמטודה הטפילית הצמחית דיטלנכוס דיפסאצ'י

פרוטוקול זה מתאר את בדיקת ההזנה המחייבת להעריך את ההשפעה הרעילה, פוטנציאלית, של פיטוכימיקל על זחלי החרקים הלפידופטרניים. זוהי בדיקה ביולוגית של חרקים בעלת יכולת הרחבה גבוהה, שקל לייעל את המינון התת-קטלני והקטלני, את פעילות ההרתעה ואת ההשפעה הפיזיולוגית. זה יכול לשמש להקרנת קוטלי חרקים ידידותיים לסביבה.

פיתוח מערכת בדיקת האכלה להערכת ההשפעה קוטלת החרקים של פיטוכימיקלים על Helicoverpa armigera

פרוטוקול זה מציג מערכת ביו-אסאי אופטימלית של עלים מנותקים להערכת היעילות של פטריות אנטומופתוגניות (EPF) נגד כנימת החרדל (Lipaphis erysimi (Kalt.)), חרק פרתנוגנטי. השיטה מתארת את תהליך איסוף הנתונים במהלך ניסויים בצלוחית פטרי, ומאפשרת לחוקרים למדוד באופן עקבי את האלימות של EPF נגד כנימות חרדל וחרקים פרתנוגנטיים אחרים.

הערכת ההשפעה של פטריות אנטומופתוגניות נגד חרק פרתנוגנטי, כנימת חרדל, Lipaphis erysimi (Kalt.)

כאן אנו מציגים פרוטוקול לקבלת פטריות אנטומופתוגניות מבורר עצים ביער ודרך חלופית להעריך את פעילותן האנטומופתוגנית באמצעות חרק מודל קולאופטרן. שיטה זו יעילה ונוחה לחקר משאבים פטרייתיים אנטומופתוגניים ממזיקים חרקים משעממי עץ ביערות טבעיים.

בידוד, זיהוי התנהגותי והערכת פתוגניות של פטריות אנטומופתוגניות מבורר עצים ביער

וידאו זה מדגים את הטכניקות כללי המשמש האחורי אנופלס gambiae במעבדה. שיטות עבור הטיפול יתושים מעבדה הם הפגינו לאורך כל שלבי מחזור החיים של האורגניזם מ זחלים וגלמים אל על דם האכלה מבוגרים.

פרוטוקול לגידול יתושים (א gambiae)

למדו פרוטוקול ביו-אסיי עלים נתלים לגידול מוני של תריפס צ'ילי (Scirtothrips dorsalis) במיכלי זכוכית עם אגר. השיטה מבטיחה שרידות גבוהה ופיתוח מסונכרן של זחלי הגיל השני לבדיקת אלימות פטריות אנטומופתוגניות.

הקמת מערכת גידול תריפס צ'ילי (Scirtothrips dorsalis Hood) לבדיקת אלימות של פטריות אנטומופתוגניות

גלה סרטונים נוספים