Name: ייצור ושימוש בתבניות אגרוז הניתנות להתאמה אישית לתרבית זקיקי שחלות עכבר ללא פיגומים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-24T13:10:00.000+00:00
Duration: 9 min 50 s
Description: חקור שיטה לתרבית זקיקי שחלות עכבר ללא פיגומים באמצעות תבניות אגרוז מתכווננות. השיטה משפרת צמיחת זקיקים ושיעורי ביוץ תוך שמירה על יציבות הורמונלית ותאימות לדימות תהליכי חיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td><חזק>חומרים וכימיקלים</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; צינורות צנטריפוגה פוליסטירן בנפח 50 מ"ל</td><td>גלוב סיינטיפיק</td><td>941-11017-CS</td><td></td></tr><tr><td>צינורות מיקרוצנטריפוגה 1.5 מ"ל</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>MCT-150</td><td>להקפיא במהירות ולאחסן מדיה</td></tr><tr><td>צלחת 100 מ"מ, לא מטופלת</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>08-757-100D&nbsp;</td><td>ליצור ולאחסן מיקרותבניות אגרוז</td></tr><tr><td>100% אתנול</td><td>מרצדס סיינטיפיק</td><td>1200</td><td>עיבוד רקמות</td></tr><tr><td>1000 ומיקרו; L&nbsp; טיפים לפיפטה, שמירה נמוכה</td><td>MIDSCI</td><td>PR-1000BK</td><td>טיפים תרבותיים &nbsp;</td></tr><tr><td>200 ומיקרו; L&nbsp; טיפים לפיפטה, שמירה נמוכה</td><td>MIDSCI</td><td>PR-200BK</td><td>טיפים תרבותיים &nbsp;</td></tr><tr><td>פלטת 24 בארות</td><td>קורנינג</td><td>353047</td><td>תרבות</td></tr><tr><td>צלחות 35 מ"מ</td><td>פלקון</td><td>351008</td><td>לבודד שחלות ולדגור במדיה אניזמטית</td></tr><tr><td>95% אתנול</td><td>מרצדס סיינטיפיק</td><td>1210</td><td>עיבוד רקמות</td></tr><tr><td>אגרוז</td><td>הופר</td><td>GR140</td><td>מיקרו-מולד</td></tr><tr><td>שמן מינרלי BioXtra, שמן קל, מתאים לתרבות תאי עובר של עכבר</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>M5310-500ML</td><td>משמש כסוכן להסרת תבניות ביוקואמילנטי</td></tr><tr><td>אלבומין סרום בקר&nbsp;</td><td>ביומדיקל MP</td><td>103700</td><td>מדיה צמיחה</td></tr><tr><td>אבקת ניקוי, 10 אונקיות, חבילה של 6</td><td>Office Depot&nbsp;</td><td>110284</td><td>אוויר דחוס</td></tr><tr><td>שרף Clear V4 1 ליטר</td><td>פורמלאבס, בע"מ</td><td>RS-F2-GPCL-04</td><td>שרף הדפסה תלת-ממדית</td></tr><tr><td>קורנינג פלסטיק רב-פעמי בצורת נמוכה 100 מ"ל, בקבוק פוליפרופילן, מדורג</td><td>קורנינג</td><td>1000P-100</td><td>בקבוק לערבוב רכיבי סיליקון&nbsp;</td></tr><tr><td>DNAse I</td><td>קיאגן</td><td>79254</td><td>מדיה אנזימטית</td></tr><tr><td>Ecoflex 00-45 קרוב לניקוי</td><td>סמות-און, בע"מ</td><td>B09M8Y9PTV</td><td>חומר סיליקון</td></tr><tr><td>F-12 + גלוטמקס</td><td>גיבקו</td><td>31765-035</td><td>מדיה צמיחה</td></tr><tr><td>פיטואין בקר עוברי</td><td>סיגמא</td><td>F-3385</td><td>מדיה צמיחה</td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי (FBS)</td><td>סרום השיא</td><td>PS-FB2</td><td>Dissection Media, Enzymatic Media,&nbsp; מדיה תחזוקה & מדיית התבגרות</td></tr><tr><td>פישרברנד&nbsp; שקי עיקור</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>01-812-50&nbsp;</td><td>שקי עיקור</td></tr><tr><td>הורמון מגרה זקיקים (FSH)</td><td>EMD סרונו, בע"מ.</td><td>גונאל-F מרשם בלבד&nbsp;</td><td>מדיה וצמיחה מדיית התבגרות</td></tr><tr><td>Gibco&nbsp; DPBS, סידן, מגנזיום</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>14-040-182&nbsp;</td><td>המלח הממופר בפוספט של דולבקו</td></tr><tr><td>גונדוטרופין כוריוני אנושי (hCG)</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>C1063-1VL</td><td>מדיית התבגרות</td></tr><tr><td>אינסולין-טרנספרין-סלניום (ITS)</td><td>תרמופישר</td><td>41400045</td><td>מדיה צמיחה</td></tr><tr><td>גשושי מולקולות של Invitrogen Rhodamine Phalloidin</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>R415</td><td>כתם שלד תא ביצה</td></tr><tr><td>מנות IVF</td><td>תרמו-סיינטיפיק</td><td>150260</td><td>לבודד, לבחור ולאזן מראש את הזקיקים</td></tr><tr><td>לייבוביץ' 15 (L15)</td><td>גיבקו</td><td>11415-064</td><td>Dissection Media & מדיה אנזימטית</td></tr><tr><td>ליברז</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>5401119001</td><td>מדיה אנזימטית</td></tr><tr><td>מם? + GlutaMAX</td><td>גיבקו</td><td>32561-037</td><td>Maintenance Media,&nbsp; מדיה וצמיחה מדיית התבגרות</td></tr><tr><td>גורם גדילה אפידרמלי של העכבר (EGF)</td><td>BD ביוסיינסס</td><td>354010</td><td>מדיית התבגרות</td></tr><tr><td>מייבש פוליקרבונט שקוף Nalgene Classic Design</td><td>תרמו-סיינטיפיק</td><td>5311-0250</td><td>מייבש ואקום&nbsp;</td></tr><tr><td>פרפין</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>83-30</td><td>עיבוד רקמות ועיבוד רקמות הטמעה</td></tr><tr><td>פניצילין-סטרפטומיצין</td><td>גיבקו</td><td>15140-122</td><td>מדיית דיסקציה, מדיה אנזימטית & מדיה תחזוקה</td></tr><tr><td>טיפים לחשפניות</td><td>אוריג'יו</td><td>MXL3-200</td><td>תרבות</td></tr><tr><td>מדיום הרכבה נגד פייד VECTASHIELD PLUS עם DAPI</td><td>מעבדות וקטור</td><td>H-2000</td><td>כתם גרעין הביצה</td></tr><tr><td>קסילן</td><td>מרצדס סיינטיפיק</td><td>9840</td><td>עיבוד רקמות</td></tr><tr><td>&alpha;-Tubulin (11:10) ארנב mAb (Alexa Fluor 488 Conjugate)</td><td>טכנולוגיית איתות סלולרי</td><td>5063S</td><td>כתם ביצה טובולין</td></tr><tr><td><חזק>ציוד</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>בנה פלטפורמה 2</td><td>פורמלאבס, בע"מ</td><td>BP-F3-02-01&nbsp;</td><td>רכיב מדפסת תלת-ממד</td></tr><tr><td>Dino-Lite Edge AF4915ZTL, USB 2.0</td><td>דינו-לייט</td><td>AF4915ZTL</td><td>Imager להגדרת טיימלפס</td></tr><tr><td>מיכל שרף צורה 3 v2.1&nbsp;</td><td>פורמלאבס, בע"מ</td><td>RT-F3-02-01</td><td>רכיב מדפסת תלת-ממד</td></tr><tr><td>מדפסת תלת-ממד טופס 3B+</td><td>פורמלאבס, בע"מ</td><td>מדפסת F3B-P</td><td>מדפסת תלת-ממד סטריאוליתוגרפיה (SLA) של Formlabs</td></tr><tr><td>Form cure&nbsp;</td><td>פורמלאבס, בע"מ</td><td>FH-CU-01</td><td>פלטפורמת ריפוי &nbsp;</td></tr><tr><td>שטיפת צורה</td><td>פורמלאבס, בע"מ</td><td>FH-WA-01</td><td>פלטפורמת כביסה</td></tr><tr><td>בקבוק ריסוס עם משאבה מאדה</td><td>VWR</td><td>0309-3005</td><td>למרוח חומר הסרת תבניות</td></tr><tr><td>פקק פוקוס/קונקנטרטור אור לסדרת Edge (למעט דגמי T5 ו-T8)</td><td>דינו-לייט</td><td>N3C-R</td><td>רכיב Imager להגדרת טיימלפס</td></tr><tr><td>חבילת מחזיק הרכבת המשלבת את מתקן ה-RK-10 והרחבת הזרוע RK-10-EX</td><td>דינו-לייט</td><td>RK-10A</td><td>רכיב Imager להגדרת טיימלפס</td></tr><tr><td>הטמעת רקמות</td><td>לייקה</td><td>היסטוקור ארקדיה</td><td>להטמעת מיקרו-תבניות</td></tr><tr><td>מעבד רקמות</td><td>לייקה</td><td>TP1020</td><td>לעיבוד מיקרו-תבניות</td></tr><tr><td>211DS אינקובטור רעידות (Orbital Shaker)</td><td>לבנט אינטרנשיונל</td><td>I-5211-DS</td><td>לדגור שחלות במדיה אנזימטית לשחרור זקיקים</td></tr><tr><td>Software&nbsp; </חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>אוטודסק פיוז'ן</td><td>Autodesk, Inc</td><td></td><td>תוכנת עיצוב בעזרת מחשב (CAD). Autodesk מציעה גישה חינוכית חינמית דרך תוכנית Autodesk Education.</td></tr><tr><td>DinoCapture 3.0 גרסה 1.1.1.3&nbsp;</td><td>דינו-לייט</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>המכונים הלאומיים לבריאות</td><td></td><td>לנתח תמונות OCT ולמדידת זקיקים</td></tr><tr><td>PreForm</td><td>פורמלאבס, בע"מ</td><td></td><td>תוכנת הכנת הדפסה חופשית שנועדה לעבוד עם מדפסות סטריאוליתוגרפיה (SLA) של Formlabs.&nbsp;</td></tr></tbody></table>

ייצור ושימוש בתבניות אגרוז הניתנות להתאמה אישית לתרבית זקיקי שחלות עכבר ללא פיגומים

Production and Use of Customizable Agarose Molds for Scaffold-Free Mouse Ovarian Follicle Culture

The ovarian follicle is the functional unit of the ovary that produces hormones and gametes needed to sustain female reproductive function and health. The ...

production-use-customizable-agarose-molds-for-scaffold-free-mouse

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

שיטה חדשה אנקפסולציה השחלות זקיק ברשת 3D הפיברין-אלגינט interpenetrating מתואר. מערכת זו משלבת תמיכה מבנית עם השפלה פרוטאוליטי כדי לתמוך בפיתוח של זקיקים בשלים לייצר ביציות בוגרות. שיטה זו עשויה להיות מיושם אגרגטים תא התרבות לשמור תאים תאים מגעים ללא הגבלת ההתרחבות.

שיטה Encapsulation השחלות זקיק ותרבות מערכת 3 מתכלה Proteolytically מימדי

התרבות של תאים נורמליים בהקשר שלהם תלת ממדי מייצג שיטה חלופית לחקור אירועים מוקדם נדרש שינוי tumorigenesis הסלולר. שיטה זו משמשת לגדול השחלות נורמלי תאים oviductal ללמוד האירועים מוקדם להיווצרות סרטן השחלות.

אלגינט הידרוג לתרבות תלת ממדי איברים של השחלות Oviducts

פרוטוקול זה מתאר את התרבות העיקרית / שיתוף התרבות של רקמת השחלה עכבר, באמצעות השחלות מעכברים בילוד וזקיקים בשחלות בודדות מעכברים לפני גיל בגרות מיניים. טכניקות התרבות לתמוך בפיתוח באופן פיסיולוגי מאוד, המאפשר חקירה של ההשפעה של סוכנים חיצוניים בשחלה, ושל יחסי גומלין בין זקיקים בשחלות.

תרבות ושיתוף התרבות של עכבר שחלות וזקיקים בשחלות

פרוטוקול זה מתאר פלטפורמה בדיית רקמות עצמית שהורכב טבעות בגדלים משתנים באמצעות תבנית מותאמת אישית פלסטיק מודפס 3D. PDMS התשלילים נרפאים ב כייר מודפס 3D; אז agarose הוא ליהק את התשלילים PDMS נרפא. התאים הם נזרע לתוך בארות agarose וכתוצאה מכך היכן הם מצטברים לטבעות רקמות.

ייצור של בארות Agarose מותאם אישית עבור תא זריעה וטבעת רקמות הרכבה עצמית תוך שימוש בתבניות מודפס 3D

מוצגים כאן שני פרוטוקולים לתחינה של ציטים שונים בתנאי תרבות תלת-מידוד. בתחילה, קומפלקסים cumulus-oocyte (COCs) הם עטוף חרוזים fibrin-אלגינט. בשנייה, הם מוקפים פלואורציה אתילן פרופילן אבקת חלקיקי (microbioreactors). שתי המערכות מבטיחות תנאים אופטימליים לשמירה על ארגון תלת-מיוד.

הידרוג'לים אלג'ינאט מפורקים ופרוטאוליטית ומיקרוביו-סיבה לאנקלוסציה של פורצין אוציט

כאן, ארבע שיטות ליצירת אורגנואידים אשכים מתאי אשכים מורין ילודים ראשוניים מתוארים כלומר, מטריצה חוץ תאית (ECM) וסביבות תרבות 2D ותלת-מיוד ללא ECM. טכניקות אלה יש יישומי מחקר מרובים והם שימושיים במיוחד ללימוד פיתוח האשכים ופיזיולוגיה במבחנה.

אקסטרה סלולר מבוסס מטריצה ודור נוסף ללא מטריקס סלולרי של אורגנואידים אשכים Murine

הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקה לייצור ספרואידים רקמתיים בקנה מידה גדול וחסכוניים באמצעות מכשיר דמוי בול מודפס בתלת-ממד.

יצירת כדורי רקמות באמצעות מכשיר דמוי בול מודפס בתלת מימד

פרוטוקול זה מתאר מודל תרבית תלת מימדי חדש (3-D) המשתמש בהידרוג'ל היאלורונן המקושר לטירמין כדי לעטוף ולתרבית זקיקים פרה-אנטרליים משחלת העכבר. אנו מפרטים גם שתי גישות לשימור הקפאה של זקיקי השחלות על ידי ויטריפיקציה.

יישום של הידרוג'ל היאלורונן חדשני לתרבית זקיקים תלת מימדית ומתודולוגיה לשימור הקפאה של זקיקי שחלות עכבר

מחקר זה מציג מתודולוגיה חסכונית ויעילה ליצירת מבני תאים תלת מימדיים באמצעות מערכת מבוססת חותמת ליצירת מיקרו-בארות בתבניות אגרוז. המערכת מקדמת היווצרות של ספרואידים/אורגנואידים אחידים, ובכך משפרת את האינטראקציות בין התאים. גישה זו מפחיתה את השונות הניסויית ותומכת ביישומים בבדיקות תרופות והנדסת רקמות.

יצירת ספרואידים/אורגנואידים תלת מימדיים מתרביות תאים דו-ממדיות באמצעות מכשיר חותמת חדשני

אנו מתארים שיטות לבידוד תאי סומטיקה של שחלות העכבר מחלק מועשר בסטרומה של השחלה וליצירת אורגנואידים סומטיים של שחלות העכבר בגישה ללא פיגומים.

חקירת מיקרו-סביבת השחלות: שיטות לבידוד, תרבית דו-ממדית ותרבות אורגנואידית של תאי סומטיקה בשחלות בעכברים

חקור שיטה לתרבית זקיקי שחלות עכבר ללא פיגומים באמצעות תבניות אגרוז מתכווננות. השיטה משפרת צמיחת זקיקים ושיעורי ביוץ תוך שמירה על יציבות הורמונלית ותאימות לדימות תהליכי חיים.

ייצור ושימוש בתבניות אגרוז הניתנות להתאמה אישית לתרבית זקיקי שחלות עכבר ללא פיגומים

גלה סרטונים נוספים