Name: מדידת הזדקנות תאית בודדת עם סמן ביולוגי מבוסס דימות של כרומטין והזדקנות אפיגנטית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-30T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 10 s
Description: למדו את שיטת ImAge המבוססת על דימות כרומטין וגיל אפיגנטי לניתוח הזדקנות ברזולוציית תא בודד. שיטה זו מציעה חלופה יעילה ולא הרסנית לשעוני מתילציית DNA מסורתיים במחקרי הזדקנות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Alvarez-Kuglen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ImAge+quantitates+aging+and+rejuvenation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Aging%22%5BJournal%5D)">ImAge quantitates aging and rejuvenation.</a> Nat Aging. 4, 1308-1327 (2024).</li>
<li>Zampino, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomarkers+of+aging+in+real+life%3A+three+questions+on+aging+and+the+comprehensive+geriatric+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22GeroScience%22%5BJournal%5D)">Biomarkers of aging in real life: three questions on aging and the comprehensive geriatric assessment.</a> GeroScience. 44 (6), 2611-2622 (2022).</li>
<li>Moqri, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomarkers+of+aging+for+the+identification+and+evaluation+of+longevity+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Biomarkers of aging for the identification and evaluation of longevity interventions.</a> Cell. 186 (18), 3758-3775 (2023).</li>
<li>Bell, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+methylation+aging+clocks%3A+challenges+and+recommendations%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">DNA methylation aging clocks: challenges and recommendations.</a> Genome Biol. 20 (1), 249(2019).</li>
<li>Horvath, S., Raj, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+methylation-based+biomarkers+and+the+epigenetic+clock+theory+of+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">DNA methylation-based biomarkers and the epigenetic clock theory of ageing.</a> Nat Rev Genet. 19 (6), 371-384 (2018).</li>
<li>Field, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+methylation+clocks+in+aging%3A+Categories%2C+causes%2C+and+consequences%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell%22%5BJournal%5D)">DNA methylation clocks in aging: Categories, causes, and consequences.</a> Mol Cell. 71 (6), 882-895 (2018).</li>
<li>Galow, A. M., Peleg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+slow+down+the+ticking+clock%3A+Age-associated+epigenetic+alterations+and+related+interventions+to+extend+life+span%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">How to slow down the ticking clock: Age-associated epigenetic alterations and related interventions to extend life span.</a> Cells. 11 (3), 468(2022).</li>
<li>Westneat, D. F., Wright, J., Dingemanse, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biology+hidden+inside+residual+within-individual+phenotypic+variation%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Rev+Camb+Philos+Soc%22%5BJournal%5D)">The biology hidden inside residual within-individual phenotypic variation.</a> Biol Rev Camb Philos Soc. 90 (3), 729-743 (2015).</li>
<li>Lähnemann, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eleven+grand+challenges+in+single-cell+data+science%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">Eleven grand challenges in single-cell data science.</a> Genome Biol. 21 (1), 31(2020).</li>
<li>Ninomiya, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ImAge%3A+quantifying+epigenetic+ageing+with+single-cell+images%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">ImAge: quantifying epigenetic ageing with single-cell images.</a> Nat Rev Cancer. 25, 755(2025).</li>
<li>Stepanov, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+encoded+epigenetic+sensors+for+visualization+of+H3K9me3%2C+H3K9ac+and+H3K4me1+histone+modifications+in+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Genetically encoded epigenetic sensors for visualization of H3K9me3, H3K9ac and H3K4me1 histone modifications in living cells.</a> Biochem Biophys Res Commun. 733, 150715(2024).</li>
<li>Farhy, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+drug+discovery+using+image-based+multiparametric+analysis+of+the+epigenetic+landscape%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Improving drug discovery using image-based multiparametric analysis of the epigenetic landscape.</a> Elife. 8, e49683(2019).</li>
<li>ImAge_workflow. , 
 <a target="_blank" href="https://github.com/terskikh-lab/ImAge_workflow">https://github.com/terskikh-lab/ImAge_workflow</a> (2025).</li>
<li>Chondronasiou, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-omic+rejuvenation+of+naturally+aged+tissues+by+a+single+cycle+of+transient+reprogramming%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Multi-omic rejuvenation of naturally aged tissues by a single cycle of transient reprogramming.</a> Aging Cell. 21 (3), e13578(2022).</li>
<li>Linkert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metadata+matters%3A+access+to+image+data+in+the+real+world%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Metadata matters: access to image data in the real world.</a> J Cell Biol. 189 (5), 777-782 (2010).</li>
<li>The Open Microscopy Environment. , bioformats. 
 <a target="_blank" href="https://github.com/ome/bioformats">https://github.com/ome/bioformats</a> (2025).</li>
<li>González-Ramírez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+contribution+to+gene+expression+prediction+of+histone+modifications+at+enhancers+or+promoters%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Comput+Biol%22%5BJournal%5D)">Differential contribution to gene expression prediction of histone modifications at enhancers or promoters.</a> PLoS Comput Biol. 17 (9), e1009368(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>אלבומין סרום בקר</td><td>סיגמא-אלדריץ' &nbsp;</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן משני מסוג Donkey Anti-Mouse IgG (H+L) בעל ספיגת צולב גבוהה, Alexa 488&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>A-21202</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן משני מסוג Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L) שנספח מאוד, Alexa 555</td><td>Invitrogen</td><td>A-31572</td><td></td></tr><tr><td>גליצין</td><td>ביו-ראד</td><td>161-0718</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן Histone H3K27ac (mAb)&nbsp;</td><td>מוטיב פעיל</td><td>39685</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן Histone H3K27me3 (pAb)&nbsp;</td><td>מוטיב פעיל</td><td>39155</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Invitrogen</td><td>H3570</td><td></td></tr><tr><td>ערכת בידוד גרעינים: Nuclei EZ Prep</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>NUC101</td><td></td></tr><tr><td>מצלם תוכן גבוה של אופרה CLS</td><td>Revvity</td><td>https://www.revvity.com/au-en/product/operetta-cls-system-hh16000020</td><td></td></tr><tr><td>פרפורמלדהיד 16% תמיסה מימית בדרגת EM</td><td>מדעי מיקרוסקופיית אלקטרונים</td><td>15710-S</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>תרמו פישר</td><td>AM9624</td><td></td></tr><tr><td>מיקרופלטה 384-באר פנופלייט</td><td>Revvity</td><td>6057302</td><td></td></tr><tr><td>טריטון-X</td><td>סיגמא</td><td>T8787</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue Solution, 0.4% &nbsp;</td><td>Gibco&nbsp;</td><td>15250061&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

מדידת הזדקנות תאית בודדת עם סמן ביולוגי מבוסס דימות של כרומטין והזדקנות אפיגנטית

Measuring Single-Cell Aging with an Imaging-based Biomarker of Chromatin and Epigenetic Aging

To advance personalized healthcare and assess potential rejuvenation strategies, biomarkers reflecting biological age are crucial. We have introduced ...

measuring-single-cell-aging-with-an-imaging-based-biomarker-chromatin

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

אנו מתארים שיטות photobleaching כולל שחזור הקרינה לאחר photobleaching (FRAP) והפסד הקרינה photobleaching (FLIP) כדי לעקוב אחר הדינמיקה חלבון הכרומטין בתוך גזע עובריים (ES) התאים. הכרומטין הדינמיקה חלבון, אשר נחשב אחד האמצעים ללמוד פלסטיות הכרומטין, מוגברת בתאים pluripotent.

מבחני photobleaching (FRAP &amp; FLIP) כדי למדוד Dynamics חלבון הכרומטין בתוך החיים בתאי גזע עובריים

מאמר זה מציג פרוטוקול מותאם לייצור שבבי microfluidic ואת ההתקנה של ניסויים microfluidic כדי למדוד את אורך החיים פנוטיפים הסלולר של תאי שמרים בודד.

באמצעות מכשירים microfluidic למדוד פנוטיפים תוחלת החיים סלולר בתאי שמרים ניצני יחיד

הזדקנות תאית, המדינה ההפיכה של מעצר מחזור התא, יכולה להיגרם על ידי מדגיש הסלולר שונה. כאן, אנו מתארים פרוטוקולים לגרום הזדקנות תאית שיטות להערכת סמנים של הזדקנות.

טכניקות כדי להשרות ולכמת סלולר הזדקנות

פרוטוקול זה מתאר שיטה לקביעת חלבון מחצית החיים של תאים חסיד חי אחד, באמצעות הדופק תיוג פלורסצנטיות הדמיה בצילום מואץ של חלבונים פיוז'ן SNAP-תג.

תא בודד כימות של חלבון השפלה המחירים על-ידי קרינה פלואורסצנטית זמן לשגות מיקרוסקופ בתרבות תא חסיד

כאן, אנו נדון סדרה של פרוטוקולים עבור אינדוקציה ואימות של הזדקנות ביולוגית התאית בתאים בתרבית. אנחנו מתמקדים גירויים שונים בתדר הזדקנות ביולוגית. ומתארות כימות של סמנים משותפים הקשורים הזדקנות ביולוגית. אנו מספקים פרטים טכניים באמצעות fibroblasts כמודל, אך ניתן להתאים את הפרוטוקולים השונים דגמי הסלולר.

אינדוקציה ואימות של הזדקנות ביולוגית הסלולר העיקרי בתאי אדם

הזדקנות תאית היא הגורם העיקרי בפיתוח של הפתווגיות הקשורות לגיל כרונית. זיהוי של הtherapeutics שתאי היעד מציגים הבטחה להרחבת הזדקנות בריאה. כאן, אנו מציגים את הבקשה הרומן על המסך לזיהוי של senotherapeutics מבוסס על מדידה של פעילות ביולוגית β-גלטוסידאז הקשורים בתאים בודדים.

א-β-גלטוסידאז-מבוסס על הקרנת ההקרנה לזיהוי תרופות הסאותרפיה

כאן אנו מציגים פרוטוקול להערכת הדינמיקה של היווצרות צירים והתקדמות mitotic. היישום שלנו של הדמיה זמן לפקיעה מאפשר למשתמש לזהות תאים בשלבים שונים של mitosis, לעקוב ולזהות פגמים mitotic, ולנתח את הדינמיקה הציר ואת הגורל mitotic cell בעת חשיפה לתרופות נגד mitotic.

הדמיה של תא חי כדי להעריך את הדינמיקה של תזמון מטאמפאזה ואת הגורל התאים בעקבות Mitotic צירים רטבאליות

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה חד-תאית לאנליזות אפיגנומיות איטרטיביות באמצעות תא בודד לשימוש חוזר. התא הבודד הניתן לשימוש חוזר מאפשר ניתוח של סימנים אפיגנטיים מרובים באותו תא בודד ותיקוף סטטיסטי של התוצאות.

תא בודד לשימוש חוזר לניתוחים אפיגנומיים איטרטיביים

כאן אנו מציגים שיטה מבוססת ציטומטריית זרימה להדמיה וכימות של סמנים מרובים הקשורים לסנסנציה בתאים בודדים.

הדמיה סימולטנית וזיהוי מבוסס זרימה-ציטומטריה של סמני סנסנציה פלואורסצנטיים מרובים בתאי סרטן סנסנטיים המושרים על ידי טיפול

אימונופלואורסצנציה מרובה מאפשרת תיוג רציף של מספר סמני נוגדנים בתוך חתך רקמה אחד כדי לתמוך בניתוח מרחבי של ארכיטקטורת הרקמה ואוכלוסיות התאים. כאן מוצגת זרימת עבודה לזיהוי מולטיפלקס של סמנים מבניים וחיסוניים הקשורים להזדקנות, הכוללת הכנת שקופיות ידנית ואוטומטית, הדמיה איטרטיבית וניתוח תאים בודדים באמצעות תוכנת פתולוגיה דיגיטלית.

מבחן אימונופלואורסצנציה מרובה לצורך הערכה מרחבית של סמני הזדקנות ב-vivo

מאמר זה מציג פרוטוקול LysoTracker של תאים חיים למדידת שיקום ליזוזומי במהלך הזדקנות בפיברובלסטים אנושיים מסוג IMR-90.

פרופילינג ליזוזומי באמצעות LysoTracker להערכה כמותית של הזדקנות תאית בפיברובלסטים אנושיים

למדו את שיטת ImAge המבוססת על דימות כרומטין וגיל אפיגנטי לניתוח הזדקנות ברזולוציית תא בודד. שיטה זו מציעה חלופה יעילה ולא הרסנית לשעוני מתילציית DNA מסורתיים במחקרי הזדקנות.

מדידת הזדקנות תאית בודדת עם סמן ביולוגי מבוסס דימות של כרומטין והזדקנות אפיגנטית

גלה סרטונים נוספים