Name: מיפוי מרחבי משופר של שכבות שרירי הקיבה בעכברים באמצעות טכניקת גלגול שוויצרית מותאמת (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-25T14:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 18 s
Description: למדו טכניקת גלגול שוויצרית מותאמת להכנת רקמת קיבה שלמים בעכברים לצורך אימונוהיסטוכימיה. שיטה זו מאפשרת שימור מרחבי מדויק של אזורי הקיבה השונים וחיזוי תאים בדימות ברזולוציה גבוהה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Chaudhry, S. R., Liman, M. N. P., Omole, A. E., Peterson, D. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChaudhry%2C+SR+%22Anatomy%2C+abdomen+and+pelvis%3A+Stomach%22">Anatomy, abdomen and pelvis: Stomach</a>. , StatPearls. (2025).</li>
<li>Sanders, K. M., Drumm, B. T., Cobine, C. A., Baker, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ca%282%2B%29+dynamics+in+interstitial+cells%3A+Foundational+mechanisms+for+the+motor+patterns+in+the+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Ca(2+) dynamics in interstitial cells: Foundational mechanisms for the motor patterns in the gastrointestinal tract.</a> Physiol Rev. 104 (1), 329-398 (2024).</li>
<li>Moolenbeek, C., Ruitenberg, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%26%2334%3BSwiss+roll%26%2334%3B%3A+A+simple+technique+for+histological+studies+of+the+rodent+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">The &#34;Swiss roll&#34;: A simple technique for histological studies of the rodent intestine.</a> Lab Anim. 15 (1), 57-59 (1981).</li>
<li>Li, S., You, S., Mao, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+multiplex+immunofluorescence+imaging+of+mouse+intestinal+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for multiplex immunofluorescence imaging of mouse intestinal tumors.</a> STAR Protoc. 6 (2), 103776(2025).</li>
<li>Bialkowska, A. B., Ghaleb, A. M., Nandan, M. O., Yang, V. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+Swiss-rolling+technique+for+intestinal+tissue+preparation+for+immunohistochemical+and+immunofluorescent+analyses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Improved Swiss-rolling technique for intestinal tissue preparation for immunohistochemical and immunofluorescent analyses.</a> J Vis Exp. (113), e54161(2016).</li>
<li>Dooley, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+protocol+for+intestinal+Swiss+rolls+and+immunofluorescent+staining+of+paraffin-embedded+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Optimized protocol for intestinal Swiss rolls and immunofluorescent staining of paraffin-embedded tissue.</a> J Vis Exp. (209), e66977(2024).</li>
<li>Hayashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet-derived+growth+factor+receptor-alpha+regulates+proliferation+of+gastrointestinal+stromal+tumor+cells+with+mutations+in+KIT+by+stabilizing+ETV1%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Platelet-derived growth factor receptor-alpha regulates proliferation of gastrointestinal stromal tumor cells with mutations in KIT by stabilizing ETV1.</a> Gastroenterology. 149 (2), 420-432.e16 (2015).</li>
<li>Hayashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRP53-mediated+cell+cycle+arrest+of+precursors+underlies+interstitial+cell+of+Cajal+depletion+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">TRP53-mediated cell cycle arrest of precursors underlies interstitial cell of Cajal depletion during aging.</a> Cell Mol Gastroenterol Hepatol. 11 (1), 117-145 (2021).</li>
<li>Rothenberg, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+cKit%28%2B%29+colonic+crypt+base+secretory+cell+that+supports+Lgr5%28%2B%29+stem+cells+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Identification of a cKit(+) colonic crypt base secretory cell that supports Lgr5(+) stem cells in mice.</a> Gastroenterology. 142 (5), 1195-1205 (2012).</li>
<li>Gomez-Pinilla, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ano1+is+a+selective+marker+of+interstitial+cells+of+Cajal+in+the+human+and+mouse+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ano1 is a selective marker of interstitial cells of Cajal in the human and mouse gastrointestinal tract.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 296 (6), G1370-G1381 (2009).</li>
<li>Lee, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anoctamin+1%2FTMEM16A+controls+intestinal+Cl%28-%29+secretion+induced+by+carbachol+and+cholera+toxin%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Anoctamin 1/TMEM16A controls intestinal Cl(-) secretion induced by carbachol and cholera toxin.</a> Exp Mol Med. 51 (8), 1-14 (2019).</li>
<li>Uhlen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-based+map+of+the+human+proteome%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Tissue-based map of the human proteome.</a> Science. 347 (6220), 1260419(2015).</li>
<li>Uhlen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+human+protein+atlas+for+normal+and+cancer+tissues+based+on+antibody+proteomics%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Proteomics%22%5BJournal%5D)">A human protein atlas for normal and cancer tissues based on antibody proteomics.</a> Mol Cell Proteomics. 4 (12), 1920-1932 (2005).</li>
<li>San Roman, A. K., Jayewickreme, C. D., Murtaugh, L. C., Shivdasani, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wnt+secretion+from+epithelial+cells+and+subepithelial+myofibroblasts+is+not+required+in+the+mouse+intestinal+stem+cell+niche+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Wnt secretion from epithelial cells and subepithelial myofibroblasts is not required in the mouse intestinal stem cell niche in vivo.</a> Stem Cell Reports. 2 (2), 127-134 (2014).</li>
<li>Drokhlyansky, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+and+mouse+enteric+nervous+system+at+single-cell+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The human and mouse enteric nervous system at single-cell resolution.</a> Cell. 182 (6), 1606-1622.e23 (2020).</li>
<li>Jiang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+and+tracing+Grem1%28%2B%29+stromal+cells+in+an+Apc+%28Min%2F%2B%29+mouse+utilizing+cryopreserved+intestinal+sections+prepared+via+modified+Swiss-roll+technique%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">Mapping and tracing Grem1(+) stromal cells in an Apc (Min/+) mouse utilizing cryopreserved intestinal sections prepared via modified Swiss-roll technique.</a> iScience. 27 (11), 111173(2024).</li>
<li>Izbeki, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+Kitlow+progenitors%2C+reduced+stem+cell+factor+and+high+oxidative+stress+underlie+gastric+dysfunction+in+progeric+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Loss of Kitlow progenitors, reduced stem cell factor and high oxidative stress underlie gastric dysfunction in progeric mice.</a> J Physiol. 588 (Pt 16), 3101-3117 (2010).</li>
<li>Hayashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+increases+interstitial+cells+of+Cajal+via+MAPK1+and+MAPK3+signaling+to+ETV1+and+KIT%2C+leading+to+rapid+gastric+emptying%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia increases interstitial cells of Cajal via MAPK1 and MAPK3 signaling to ETV1 and KIT, leading to rapid gastric emptying.</a> Gastroenterology. 153 (2), 521-535.e20 (2017).</li>
<li>Gao, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-inducible+factor+1alpha+stabilization+restores+epigenetic+control+of+nitric+oxide+synthase+1+expression+and+reverses+gastroparesis+in+female+diabetic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-inducible factor 1alpha stabilization restores epigenetic control of nitric oxide synthase 1 expression and reverses gastroparesis in female diabetic mice.</a> Gastroenterology. 165 (6), 1458-1474 (2023).</li>
<li>Kuro-o, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutation+of+the+mouse+klotho+gene+leads+to+a+syndrome+resembling+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mutation of the mouse klotho gene leads to a syndrome resembling ageing.</a> Nature. 390 (6655), 45-51 (1997).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>#5SF מלקחיים</td><td>כלי מדע מדויק</td><td>11252-00</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר אלבומין&nbsp;</td><td>סיגמה-אלדריץ'</td><td>A7906</td><td></td></tr><tr><td>מקור אור LED של ColdVision MC-LS</td><td>שוט</td><td>MC-LS</td><td></td></tr><tr><td>תוכנה קונפוקלית&nbsp;</td><td>ניקון</td><td>תוכנת הדמיה של Nikon NIS-Elements</td><td></td></tr><tr><td>Cryoseal XYL</td><td>אפרדידה</td><td>9312-4</td><td></td></tr><tr><td>DAPI (4',6-דיאמידינו-2-פנילינדול, דילקטט)</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>D3571</td><td></td></tr><tr><td>צלחות ניתוח, גדולות</td><td>מערכות חיים &nbsp; כלי נגינה</td><td>SKU: DD-90</td><td></td></tr><tr><td>חמור נגד עז AF647 pAb</td><td>טכנולוגיות חיים</td><td>A21447</td><td>מגרש: 1739289 RRID:AB_2535864</td></tr><tr><td>חמור נגד עכבר AF555 pAb</td><td>טכנולוגיות חיים</td><td>A31570</td><td>Lot: 1774719 RRID:AB_2536180</td></tr><tr><td>חמור נגד ארנב AF488 pAb</td><td>טכנולוגיות חיים</td><td>A21206</td><td>מגרש: 2668665 RRID:AB_2535792</td></tr><tr><td>E-cadharin (1:400 דילול)</td><td>ביוסיינס BD</td><td>610181</td><td>פריט: 25510 RRID:AB_397580</td></tr><tr><td>אאוסין</td><td>ELITechGroup</td><td>$SS-071C</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים מצופים אפוקסי</td><td>כלי מדע מדויק</td><td>11210-10</td><td></td></tr><tr><td>אתנול</td><td>סיגמה-אלדריץ'</td><td>459828-4L</td><td></td></tr><tr><td>צינור גמיש 1.5 מ"ל</td><td>אפנדורף</td><td>22364111</td><td></td></tr><tr><td>ספוגי גזה</td><td>פישרסיינטיפיקט</td><td>22-362-178</td><td></td></tr><tr><td>מספריים דקים ומחוספסים</td><td>כלי מדע מדויק</td><td>14090-09</td><td></td></tr><tr><td>המטוקסילין</td><td>אפרדיה</td><td>7211</td><td></td></tr><tr><td>KIT (0.2 ומיקרו; g/mL; דילול 1:1000)</td><td>R& D Systems</td><td>AF1356</td><td>חלק: IEO0217101 RRID: AB_354750</td></tr><tr><td>תמיסת ניקוי עדשות בקבוק ספריי בנפח 1 אונקיה</td><td>ניקון</td><td>77013066</td><td></td></tr><tr><td>זכוכית כיסוי מיקרוסקופ</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>12541016</td><td></td></tr><tr><td>שקופיות מיקרוסקופ</td><td>CardinalHealth</td><td>M6133A</td><td></td></tr><tr><td>פינים קטנים</td><td>כלי מדע מדויק</td><td>26002-20</td><td></td></tr><tr><td>MYH11 (דילול 1:400)</td><td>טכנולוגיות ביו-רפואיות</td><td>BT-562</td><td>RRID:AB_10013421</td></tr><tr><td>לק לציפורניים</td><td>צבעים חוטאים</td><td>7.33855E+11</td><td></td></tr><tr><td>מחט 30 גרם x חצי אינץ'&nbsp;</td><td>ביוסיינס BD</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>פאראפורמלדהיד</td><td>סיגמה-אלדריץ'</td><td>158127-500G</td><td></td></tr><tr><td>להבי קצה יחיד של פרסונה</td><td>חברת רייזור בלייד.</td><td>76247-652</td><td></td></tr><tr><td>פתרון חסימת עכבר על עכבר ReadyProbes (30x)</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>R37621</td><td>חלק: 3226230</td></tr><tr><td>SlowFade Diamond Antifade Mountant (מדיה להרכבה)</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>S36972</td><td></td></tr><tr><td>מערכת צביעת שקופיות StainTray 10</td><td>Simport Scientific</td><td>M918-2</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ סטריאו 0.8x-5x</td><td>ניקון</td><td>SMZ645</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose&nbsp;</td><td>סיגמה-אלדריץ'</td><td>S9378-1KG</td><td></td></tr><tr><td>מגברי שטח X-100 (טריטון X)</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>28314</td><td></td></tr><tr><td>TMEM16A (ANO1: דילול 1:400)</td><td>אבקאם</td><td>AB53212&nbsp;</td><td>מגרש: GP3295656-1 RRID: AB_883075</td></tr><tr><td>פיפט העברה</td><td>פלקון</td><td>357575</td><td></td></tr><tr><td>TUBB3 (דילול 1:400)</td><td>טכנולוגיית איתות סלולרי</td><td>4466</td><td>מגרש: 5 RRID: AB_1904176</td></tr><tr><td>Xylenes&nbsp;</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>X3P-1GAL</td><td>הרבה 206238</td></tr></tbody></table>

מיפוי מרחבי משופר של שכבות שרירי הקיבה בעכברים באמצעות טכניקת גלגול שוויצרית מותאמת

Enhanced Spatial Mapping of Mouse Gastric Muscle Layers Using a Modified Swiss Roll Technique

בשיטה החדשה, גלילי הקיבה השווייצריים של עכברים כללו את שלושת האזורים העיקריים בקיבה: הקרקעית, הקורפוס והאנטרום, יחד עם חלק קטן מהוושט והתריסריון במקטע אחד. הכללת כל הקיבה בחלק אחד מאפשרת ניתוח אזורי מקיף (איור 1). צביעת המטוקסילין ואאוזין (H&amp;E) של תמונות שלמות של גלילי הקיבה השווייצריים הדגימה ארכיטקטורה קיבתית שמורה היטב בכל האזורים, ואפשרה ויזואליות ברורה של שכבות הריר, התת-רירית והשרירים (איור 3). איור 4 מציג צביעה אימונופלואורסצנטית מייצגת של תאי בין-תאי Cajal (ICC; תאי קוצב הלב המייצרים גלים איטיים קצביים הבסיס לתנועתיות המעי הפזית; מזוהה על ידי KIT ו-ANO1), נוירונים מעיים (נוירונים במערכת העצבים המעיים המתאמים את תנועתיות מערכת העיכול; מזוהים על ידי צביעת חיסון TUBB3), וגרעינים (DAPI). ברירית הקיבה, KIT מתבטא גם בתאי פנת' וגביע כפי שדווח קודם 9,10,11. ANO1 מתבטא גם באופן נרחב באפיתל הקיבה, במיוחד בתאי האפיתל העמודיים של הקרקעית, בהתאם לתפקידו בהעברת כלוריד ובהפרשה רירית11. בנוסף, TUBB3 מתבטא בתאים אנדוקריניים מסוימים בקיבה ובתאים מפרישי ריר, לפי נתוני אטלס חלבון אנושי12,13. איור 5 מציג צביעות אימונופלואורסצנטיות מייצגות של תאי שריר חלק המסומנים על ידי MYH11, תאי אפיתל רירית קיבה המסומנים על ידי E-cadherin, ו-ICC המסומנים על ידי KIT. MYH11 מתבטא גם במיופיברובלסטים ברירית הקיבה, כפי שדווח קודםלכן ב-14. יחד, תוצאות האימונופלואורסצנציה הללו מאשרות שהפרוטוקול שלנו שומר על ארכיטקטורת הרקמות.
<img alt="איור 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig1.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 1"> 
איור 1: הכנת "גליל שווייצרי" של קיבת העכבר לצורך קריוסקציה. (א) כל הקיבה מונחת בצלחת כריתה מצופה סיליקון שחור המלאת במי מלח קר עם פוספאט (PBS) מיד לאחר ההסרה לשמירת שלמות הרקמה. (ב) הקיבה נפתחת לאורך נקודת האמצע של התריסריריון. (ג) הבטן נמתחת בעדינות ומהודקת בצלחת כדי לשכב שטוח ללא מתח מופרז. קו אדום מקווקו מסומן לאורך הרקמה כדי להצביע היכן יש לגזור אותה כדי להקל על הגלגול. (ד) הבטן הפתוחה והקבועה מונחת על נייר סינון רטוב ב-PBS כהכנה לגלגול למצב קומפקטי. החץ האדום מראה את כיוון התהפכות הבטן. (ה) חלקי הרקמה מוטמעים בתרכובת טמפרטורת חיתוך אופטימלית (O.C.T.) ומוקפאים על קרח יבש כהכנה לקריוסקציה. (F) הבלוקים המוקפאים מאוחסנים בטמפרטורה של −80°C ומבצעים קריו-סקציה בעובי של 5 מיקרון לניתוח במורד הזרם. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.</a>
<img alt="איור 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig2.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 2"> 
איור 2: הגדרת רכישת ND וויזואליזציה של רוויה במהלך צילום Z-stack. (א) הגדרות לייזר וגלאי מוגדרות בתוכנת הדמיה קונפוקלית להדמיה ספקטרלית רב-ערוצית. נעשה שימוש בארבעה פלואורופורים: 4′,6-דיאמידינו-2-פנילינדול (DAPI), אלקסה פלור 488 (AF488), אלקסה פלור 555 (AF555), ואלקסה פלור 647 (AF647), כל אחד מהם משולב עם לייזרי עירור וגלאי פליטה מתאימים. הגרף הספקטרלי מציג עקומות עירור ופליטה, ומאפשר התאמה למזעור דיבור צולב ואופטימיזציה של זיהוי אותות. (ב) הגדרות החשיפה מותאמות בנפרד לכל פלואורופור כדי למנוע רוויה של פיקסלים ולשמר פרטים באזורים בעוצמה גבוהה. (ג) הגדרת צילום תמונה גדולה (למשל, 6 × 6 שדות) מאפשרת ויזואליזציה של כל גליל הקיבה השווייצרי; יש להתאים את גודל שדה התמונה בהתאם לגודל ולקומפקטיות של הרקמה המגולגלת. (D) חלון רכישה ND המציג הגדרות פרמטר Z-stack. טווח ה-Z מוגדר על ידי בחירת המיקום העליון והתחתון של שריר הקיבה, עם שמונה שלבים המוגדרים ללכידת עומק הרקמה המלא לניתוח תלת-ממדי (3D). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.</a>
<img alt="איור 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig3.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 3"> 
איור 3: תמונה של גליל שוויצרי בקיבת עכבר מוכתמת בהמטוקסילין ואאוזין. סריקת אריחים מדגימה את היכולת לדמיין את כל גלגול הקיבה השווייצרי של עכבר נקבה בת 8 שבועות מדגם C57BL/6J. אזורים אנטומיים עיקריים מסומנים, כולל הוושט (קו אדום מקווקו), הסוגר התחתון של הוושט (קו סגול מקווקו), קרקעית (קו שחור מקווקו), קורפוס (קו כחול מקווקו), אנטרום (קו ירוק מקווקו), ותריסריון (קו כתום מנוקד). פס קנה מידה: 1000 מיקרון. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של האיור הזה.</a>
<img alt="איור 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig4.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 4"> 
איור 4: תמונות קונפוקליות של גליל שווייצרי של קיבת עכברון שלמה: ANO1, KIT, TUBB3. פאנלים עליונים: תמונות קונפוקליות תפורות מייצגות של גליל שוויצרי קיבה של עכבר נקבה בת 8 שבועות מסוג C57BL/6J, המראות צביעת חיסון ל-ANO1 (ירוק), KIT (תכלת), TUBB3 (צהוב) וגרעינים (כחול). כל הבטן המגולגלת, כולל הקרקעית, הקורפוס והאנטרום, מוצגת לאור. פסי קנה מידה: 1000 מיקרון. פאנלים תחתונים: תצוגות מוגדלת של האזור המסומן על ידי הקופסה הלבנה במקווים בלוחות העליונים, המדגישים פרטים תאיים בין-תאי קחל (ANO1+ ו-KIT+; חצים צהובים) ונוירונים מעיים (TUBB3⁺; חצים אדומים). פסי קנה מידה: 100 מיקרון. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחצו כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של הדמות הזו.</a>
<img alt="איור 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig5.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 5"> 
איור 5: תמונות קונפוקליות של גליל שווייצרי של קיבת עכוס שלמה: MYH11, KIT, E-cadherin. פאנלים עליונים: תמונות קונפוקליות תפורות מייצגות של גליל שוויצרי קיבה של עכבר נקבה בת 8 שבועות מסוג C57BL/6J, המראות צביעת חיסון ל-MYH11 (ירוק), KIT (תכלה), E-cadherin (צהוב) וגרעינים (כחול). כל הבטן המגולגלת, כולל הקרקעית, הקורפוס והאנטרום, מוצגת לאור. פסי קנה מידה: 1000 מיקרון. פאנלים תחתונים: תצוגות מוגדלת של האזור כפי שמסומן על ידי הקופסה הלבנה במקווים בלוחות העליונים. קווים לבנים מנוקדים מסמנים את האפיתל הרירי (E-cadherin) ואת השכבה השרירית (MYH11). חצים לבנים מציינים תאי ביניים KIT+ של קחל (ICC). פסי קנה מידה: 100 מיקרון. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחצו כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של הדמות הזו.</a>

Spatial "omics" technologies provide unprecedented opportunities to study the biology and interactions of individual cells of the gastric neuromuscular ...

enhanced-spatial-mapping-mouse-gastric-muscle-layers-using-modified

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

התאים ביניים של קחאל (ICC) הם תאים של מערכת קוצב לב (GI) במערכת העיכול. הם יוצרים רשתות מורכבות בין לתאי שריר חלק ופוסט ganglionic סיבים עצביים להסדיר contractility העיכול. כאן, אנו מציגים שיטות immunofluorescence חתך שלם הר ויזואליזציה של Murine רשתות ICC.

ויזואליזציה של תאים ביניים של רשת (ICC) קחאל ב עכברים

המדידה in vivo של התכווצויות שרירים חלקים לאורך מערכת העיכול של חיות מעבדה נותרה טכניקה רבת עוצמה, אם כי לא מנוצלת כראוי. מדי מתח גמישים עם שני אלמנטים אינם זמינים מסחרית ודורשים ייצור. פרוטוקול זה מתאר בניית מדי מתח אמינים וזולים להשתלה חריפה או כרונית במכרסמים.

ייצור והשרשה של מדי עיבור Dual-אלמנט הזעיר למדידה<em&gt; בVivo</em&gt; במערכת העיכול התכווצויות במכרסמים.

מאמר זה מדגים נהלים כירורגיים של ריפלוקס גסטרו-ויזפאגי עם עכברים. מודלים אלו הם כלים שימושיים למחקר על מנגנונים וטיפול במחלת ריפלוקס גסטרו-ויזפאגי ופוטנציאלית בבריטי’ס הוושט ובסרטן הוושט.

מודלי כירורגי של Gastroesophageal Reflux עם עכברים

מתואר השימוש במכשיר פשוט לחיתוך ו'גלגול' מעיים של עכברים להכנה מהירה של תכשירים שלמים.

מכשיר פשוט להכין במהירות mounts כל ממעי העכבר

טכניקות הקלטת וידאו ומיפוי מרחבי-זמני (STmap) הזמינות לאחרונה מאפשרות לדמיין ולכמת הן דפוסי התפשטות והן ערבוב של תנועתיות המעיים. מטרת פרוטוקול זה היא להסביר את היצירה והניתוח של STmaps באמצעות מערכת ניטור תנועתיות מערכת העיכול (GIMM).

מיפוי Spatiotemporal של תנועתיות ב<em&gt; Ex Vivo</em&gt; תכשירים מהמעיים

מאמר זה מתאר טכניקת הדמיית וידאו ומיפוי מרחבי-זמני ברזולוציה גבוהה לזיהוי שינויים בוויסות העצבי של תנועתיות המעי הגס בעכברים בוגרים. ניתן לזהות השפעות עדינות על תפקוד מערכת העיכול באמצעות גישה זו בתכשירי רקמות מבודדים כדי לקדם את ההבנה שלנו לגבי מחלות מערכת העיכול.

הדמיה וידאו ומפות Spatiotemporal לנתח תנועתיות מערכת העיכול של עכברים

זיהוי מדויק ומיקום של תאי אפיתל לאורך רירית רירית המעי חיוני להגדיר שושלות תאים שונות. הדמיה תקינה של רקמות מעי היא קריטית לזיהוי דפוסי ביטוי חלבון עם רזולוציה מקסימלית. מחקר זה נועד להתוות שיטות האופטימליות ותנאי רקמות מעי עכבר עיבוד.

טכניקה Swiss-מתגלגל משופר עבור הכנת רקמת המעי עבור immunohistochemical ו ניתוח Immunofluorescent

להלן תיאור הביצועים של ניתוח אנכי שרוול קיבה בעכברים. זה הוא סוג של ניתוח הרזיה המערבת הסרה של-70% של הקיבה.

מודל מאתר של ניתוח אנכי שרוול קיבה

המעי חיוני לעיכול וספיגה. כל אזור - תריסריון, ג'ג'ונום, איליאום, המעי הגס - משרת פונקציות נפרדות בשל מבנים תאיים ייחודיים. לימוד הפיזיולוגיה של המעי דורש ניתוח רקמות קפדני. פרוטוקול זה מתאר קיבוע ועיבוד רקמות בטכניקת הרול השוויצרית, ומבטיח אימונוסטיין מדויק באמצעות שימור וכיוון נכון של הרקמות.

פרוטוקול ממוטב לגלילים שוויצריים במעי וצביעה אימונופלואורסצנטית של רקמה משובצת פרפין

מחקר זה מציג שיטת הדמיה תלת מימדית המשתמשת ברקמות מעי שלמות ומיקרוסקופיה מרובת פוטונים כדי לכמת ריר מופרש, המאפשר ניתוח נפחי מדויק והדמיה של דינמיקת ריר בתגובה לגירויים כמו קרבמוילכולין כלוריד.

כימות תלת מימדי של ריר המעי באמצעות הדמיית רקמות שלמות

למדו טכניקת גלגול שוויצרית מותאמת להכנת רקמת קיבה שלמים בעכברים לצורך אימונוהיסטוכימיה. שיטה זו מאפשרת שימור מרחבי מדויק של אזורי הקיבה השונים וחיזוי תאים בדימות ברזולוציה גבוהה.

מיפוי מרחבי משופר של שכבות שרירי הקיבה בעכברים באמצעות טכניקת גלגול שוויצרית מותאמת

גלה סרטונים נוספים