Name: הערכה פונקציונלית של מחסום אפיתל חניכיים בעכברים באמצעות מעקבים פלואורסצנטיים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-27T13:35:00.000+00:00
Duration: 7 min
Description: למדו הערכה פונקציונלית של מחסום אפיתל חניכיים בעכברים באמצעות דקסטרנים פלואורסצנטיים ומיקרוסקופיה חד-פוטונית. שיטה זו מאפשרת כימות חדירות מחסום ויישומים במחקר מחלות חניכיים וריפוי פצעים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Zhang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+on+the+protection+of+gingival+epithelial+barrier+by+interleukin-22+through+regulating+microbiota+and+E-cadherin+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Zhonghua+Kou+Qiang+Yi+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">Study on the protection of gingival epithelial barrier by interleukin-22 through regulating microbiota and E-cadherin expression.</a> Zhonghua Kou Qiang Yi Xue Za Zhi. 59 (7), 653-662 (2024).</li>
<li>Presland, R. B., Jurevic, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+sense+of+the+epithelial+barrier%3A+what+molecular+biology+and+genetics+tell+us+about+the+functions+of+oral+mucosal+and+epidermal+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dent+Educ%22%5BJournal%5D)">Making sense of the epithelial barrier: what molecular biology and genetics tell us about the functions of oral mucosal and epidermal tissues.</a> J Dent Educ. 66 (4), 564-574 (2002).</li>
<li>Costello, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+community+variation+in+human+body+habitats+across+space+and+time%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Bacterial community variation in human body habitats across space and time.</a> Science. 326 (5960), 1694-1697 (2009).</li>
<li>Aas, J. A., Paster, B. J., Stokes, L. N., Olsen, I., Dewhirst, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+the+normal+bacterial+flora+of+the+oral+cavity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Defining the normal bacterial flora of the oral cavity.</a> J Clin Microbiol. 43 (11), 5721-5732 (2005).</li>
<li>Meyle, J., Chapple, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+aspects+of+the+pathogenesis+of+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22Periodontol+2000%22%5BJournal%5D)">Molecular aspects of the pathogenesis of periodontitis.</a> Periodontol 2000. 69 (1), 7-17 (2015).</li>
<li>Oriuchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porphyromonas+gingivalis+lipopolysaccharide+damages+mucosal+barrier+to+promote+gastritis-associated+carcinogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Dig+Dis+Sci%22%5BJournal%5D)">Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide damages mucosal barrier to promote gastritis-associated carcinogenesis.</a> Dig Dis Sci. 69 (1), 95-111 (2024).</li>
<li>Takeuchi, H., Nakamura, E., Yamaga, S., Amano, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porphyromonas+gingivalis+infection+induces+lipopolysaccharide+and+peptidoglycan+penetration+through+gingival+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oral+Health%22%5BJournal%5D)">Porphyromonas gingivalis infection induces lipopolysaccharide and peptidoglycan penetration through gingival epithelium.</a> Front Oral Health. 3, 845002(2022).</li>
<li>Abe, T., Hajishengallis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+the+ligature-induced+periodontitis+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Optimization of the ligature-induced periodontitis model in mice.</a> J Immunol Methods. 394 (1-2), 49-54 (2013).</li>
<li>Chatterjee, A., Bhattacharya, H., Kandwal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probiotics+in+periodontal+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Indian+Soc+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Probiotics in periodontal health and disease.</a> J Indian Soc Periodontol. 15 (1), 23-28 (2011).</li>
<li>Shin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photon-efficient+imaging+with+a+single-photon+camera%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Photon-efficient imaging with a single-photon camera.</a> Nat Commun. 7, 12046(2016).</li>
<li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+endothelial+tight+junctions+to+predict+and+protect+thoracic+aortic+aneurysm+and+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Targeting endothelial tight junctions to predict and protect thoracic aortic aneurysm and dissection.</a> Eur Heart J. 44 (14), 1248-1261 (2023).</li>
<li>Cai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Foxf1+maintains+endothelial+barrier+function+and+prevents+edema+after+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Signal%22%5BJournal%5D)">Foxf1 maintains endothelial barrier function and prevents edema after lung injury.</a> Sci Signal. 9 (424), ra40(2016).</li>
<li>Hou, A., Mohamed Ali, S., Png, E., Hunziker, W., Tong, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transglutaminase-2+is+critical+for+corneal+epithelial+barrier+function+via+positive+regulation+of+claudin-1%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">Transglutaminase-2 is critical for corneal epithelial barrier function via positive regulation of claudin-1.</a> Ocul Surf. 28, 155-164 (2023).</li>
<li>Kitsuki, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+junctional+epithelial+permeability+in+trpv4-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Periodontal+Res%22%5BJournal%5D)">Enhanced junctional epithelial permeability in trpv4-deficient mice.</a> J Periodontal Res. 55 (1), 51-60 (2020).</li>
<li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porphyromonas+gingivalis+impairs+oral+epithelial+barrier+through+targeting+grhl2%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dent+Res%22%5BJournal%5D)">Porphyromonas gingivalis impairs oral epithelial barrier through targeting grhl2.</a> J Dent Res. 98 (10), 1150-1158 (2019).</li>
<li>Lemaitre, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Periodontal+tissue+regeneration+using+syngeneic+adipose-derived+stromal+cells+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Periodontal tissue regeneration using syngeneic adipose-derived stromal cells in a mouse model.</a> Stem Cells Transl Med. 6 (2), 656-665 (2017).</li>
<li>Takahashi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gingival+epithelial+barrier%3A+regulation+by+beneficial+and+harmful+microbes%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Barriers%22%5BJournal%5D)">Gingival epithelial barrier: regulation by beneficial and harmful microbes.</a> Tissue Barriers. 7 (3), e1651158(2019).</li>
<li>Ye, P., Chapple, C. C., Kumar, R. K., Hunter, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+patterns+of+E-cadherin%2C+involucrin%2C+and+connexin+gap+junction+proteins+in+the+lining+epithelia+of+inflamed+gingiva%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Expression patterns of E-cadherin, involucrin, and connexin gap junction proteins in the lining epithelia of inflamed gingiva.</a> J Pathol. 192 (1), 58-66 (2000).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>40 kDa FITC-labeled dextran</td><td>סיגמה אולדריך</td><td>78331</td><td></td></tr><tr><td>70 kDa rhodamine B-labeled dextran</td><td>סיגמה אולדריך</td><td>R9379</td><td></td></tr><tr><td>Blunt tissue separation nickel</td><td>חברת Bejinghuabo</td><td>NZW28</td><td></td></tr><tr><td>carboxymethylcellulose</td><td>MREDA</td><td>M049898</td><td></td></tr><tr><td>מזרק חד פעמי סטרילי</td><td>חברת Zhiyu</td><td></td><td>1 mL</td></tr><tr><td>תוכנת ImageJ</td><td>המכונים הלאומיים לבריאות</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מיקרוצינורות</td><td>Axygen</td><td>MCT-150-C</td><td>1.5 mL</td></tr><tr><td>תוכנת NIS-Elements AR Image</td><td>ניקון</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Phosphate buffered saline 1x</td><td>Servicebio</td><td>G4207-500</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ פוטון יחיד Nikon A1 MP+</td><td>ניקון</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מספריים לרקמות</td><td>חברת Bejinghuabo</td><td>M286-05</td><td></td></tr></tbody></table>

הערכה פונקציונלית של מחסום אפיתל חניכיים בעכברים באמצעות מעקבים פלואורסצנטיים

Functional Assessment of Mouse Gingival Epithelial Barrier Using Fluorescent Tracers

The gingival epithelial barrier serves as a critical frontline defense in oral immunity and homeostasis. An intact epithelial barrier effectively prevents ...

functional-assessment-mouse-gingival-epithelial-barrier-using

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

שכבת פני שטח glycocalyx / אנדותל האנדותל היא למד באופן אידיאלי באמצעות מיקרוסקופ intravital. מיקרוסקופיה Intravital טכני מאתגרת באיבר מרגש כגון ריאות. אנחנו מדגימים איך brightfield סימולטני ומיקרוסקופיה ניאון ניתן להשתמש כדי להעריך את עובי שכבת פני שטח האנדותל שבנע...

במדידת vivo של שכבת פני שטח האנדותל ריאתי המאוסה

כאן נציג של assay חדירות כלי דם במוח העכבר באמצעות הזרקה בקרום הבטן של המשדרים פלורסנט ואחריו זלוף הרלוונטיים מודלים חייתיים של תפקוד לקוי של מחסום הדם - מוח. חמי-המוח משמש עבור הערכת חדירות באופן כמותי, והשני עבור מעקב חזותי/immunostaining. התהליך לוקח ב' 5-6-10 עכברים.

In Vivo מחסום הדם - מוח חדירות Assay בעכברים באמצעות Fluorescently עם התווית המשדרים

תוך ניצול של מיקרוסקופ תוך-ויטאל, השיטה המוצגת כאן מאפשרת הדמיה בזמן אמת של שפיכת תאי אפיתל במעיים בבעלי חיים חיים. לכן, רירית מעיים מוכתמת topically (acriflavine ו rhodamineB-dextran) של עכברים מרדימים הוא תמונה עד רזולוציה של תא יחיד באמצעות מיקרוסקופית confocal.

גישה תוך-ויטאלית המבוססת על מיקרוסקופיה להערכת חמלה במעיים וביצועי שפיכת תאים אפיתל

כאן, אנו מתארים את ההכנה של מונו-שכבות אפיתל מעיים שמקורן באורגנואידים אנושיים לחקר תפקוד מחסום המעיים, חדירות והובלה. מכיוון שאורגנואידים מייצגים את התגובה המקורית של רקמת האפיתל לגירויים חיצוניים, מודלים אלה משלבים את היתרונות של יכולת ההרחבה של קווי התאים ואת הרלוונטיות והמורכבות של הרקמה הראשונית.

מונו-שכבת אפיתל שמקורה באורגנואידים: מודל במבחנה רלוונטי מבחינה קלינית לתפקוד מחסום המעי

תפקוד מחסום אפיתל מעיים Dysregulated ותגובות חיסוניות הם סימני היכר של מחלות מעי דלקתיות שנותרו נחקרות בצורה גרועה בשל מחסור במודלים פיזיולוגיים. כאן, אנו מתארים מודל לולאת מעיים של עכברים המעסיק מקטע מעיים בעל כלי דם וחיצוניים כדי לחקור חלחיליות רירית וגיוס לויקוציטים ב- vivo.

הערכה תפקודית של חלחיליות מעיים ונדידה טרנס-אפיתלית נויטרופילית בעכברים באמצעות מודל לולאת מעיים מתוקננת

בפרוטוקול הנוכחי, פונקציית מחסום האנדותל של הבלוטה התת-מנדיבולרית (SMG) הוערכה על ידי הזרקת עוקבים פלואורסצנטיים משוקללים מולקולריים שונים לוורידים הזוויתיים של מודלים של חיות ניסוי in vivo תחת מיקרוסקופ סריקת לייזר של שני פוטונים.

אין ויוו זיהוי חדירות כלי דם בבלוטה תת-מנדיבולרית של עכבר

במחקר הנוכחי, דקסטרן פלואורסצאין-איזותיוציאנט-מסומן (FITC) מנוהל לעכברים דרך הפה כדי להעריך את חדירות המעי הן in vivo והן בדגימות פלזמה וצואה. מכיוון שתפקוד מחסום המעי מושפע בתהליכי מחלה רבים, ניתן להשתמש בבדיקה ישירה וכמותית זו בתחומי מחקר מגוונים.

הערכה של שלמות מחסום המעי בעכברים באמצעות דקסטרן עם תווית פלואורסצאין-איזותיוציאנט

הדמיה חיה Ex vivo היא טכניקה רבת עוצמה לחקר התהליכים הדינמיים של תנועות תאים ואינטראקציות ברקמות חיות. כאן, אנו מציגים פרוטוקול המיישם מיקרוסקופ של שני פוטונים למעקב חי אחר תאי אפיתל דנטליים בחותכות עכבר בוגרות שלמות בתרבית.

שימוש בהדמיה חיה של Ex Vivo כדי לחקור חלוקות תאים ותנועות במהלך חידוש שיניים של עכבר

אנו מתארים שיטה אמינה עבור immunolocalization בתוך האפידרמיס שונה עבור שני חלקים קפואים פרפין שאנו משתמשים מאוד שגרתי במעבדה שלנו.

אימונוהיסטוכימיה על סעיפים פרפין של האפידרמיס עכבר באמצעות נוגדנים פלורסנט

וידאו זה מציג טכניקות תיוג של אדם בתאי גזע עובריים ותאי גזע mesenchymal עם צבעי ניאון. טכניקה זו יכולה לשמש in vivo מעקב בתאי גזע המושתלים עם הדמיה אופטית עבור מתאמים histopathological עם מיקרוסקופ פלואורסצנטי.

תיוג בתאי גזע עם צבעי ניאון על איתור פולשני עם דימות אופטי

למדו הערכה פונקציונלית של מחסום אפיתל חניכיים בעכברים באמצעות דקסטרנים פלואורסצנטיים ומיקרוסקופיה חד-פוטונית. שיטה זו מאפשרת כימות חדירות מחסום ויישומים במחקר מחלות חניכיים וריפוי פצעים.

הערכה פונקציונלית של מחסום אפיתל חניכיים בעכברים באמצעות מעקבים פלואורסצנטיים

גלה סרטונים נוספים