בדיקת סובלנות ניקוטין ב כנימות באמצעות ניסוי דיאט מלאכותית
May 14th, 2008
בסרטון זה assay הוא הוכיח כי הבדיקות סובלנות של ניקוטין שני סוגים של כנימות אחד פושט צמחי טבק בתחום ואחד לא.
צמחים עשויים לווסת את הייצור של מטבוליטים משניים רבים ושונים בתגובה להאכלת חרקים. תגובה אחת של צמחי טבק לאוכלי עשב אינה נתפסת על ידי חרקים היא להגביר את ייצור הניקוטין האלקלואיד הנוירוטוקס, באמצעות ניקוטין. כדוגמה, אדגים כיצד להקים ניסוי כדי להעריך את הרעילות של מטבוליטים משניים של צמחים כנגד כנימות.
שושלות מסוימות של MiSiS persky, כנימת האפרסק הירוקה הסתגלו להתמחות בטבק מתורבת. כאן אנו משערים כי לשושלות המותאמות לטבק יש עמידות מוגברת לניקוטין על פני שושלות לא מסתגלות. היי, שמי ג'ון רמזי.
אני סטודנטית לתואר שני במעבדה של ג'ורג' ג'נדר במכון בו תומפסון לחקר הצמחים. היום אני הולך להראות לכם נוהל למדידת הרעילות של מטבוליטים צמחיים כנגד כנימות. הליך זה כולל הכנת תזונה מלאכותית אליה מטבוליט הצמח מעניין.
במקרה זה, ניקוטין מתווסף בריכוזים משתנים, כולאים כנימות בכלובים, כך שהן ניזונות מתזונה זו וסופרים כנימות לאחר מספר ימים כדי למדוד את ההישרדות והפוריות בריכוזים שונים של ניקוטין. אז בואו נתחיל. עם הניסוי.
אנו יכולים לגדל כנימות בתזונה מלאכותית, תוך ניצול סגנון האכילה שלהן שבו הן מכניסות סגנון S מיוחד לכלי הדם של הצמח וצורכות תזונה של מוהל זרימה. אנו מכינים תזונה נוזלית הדומה לזו שנתקלים בה ה-A ניזונו מצמח המורכב מסוכרוז וחומצות אמינו לתמיסה זו. לאחר מכן אנו מוסיפים ריכוזים משתנים של מטבוליט הצמח.
אנו מעוניינים לבחון את הרעילות של, במקרה זה, ניקוטין. בניסוי זה, ארבע כנימות בוגרות סגורות בכוס פלסטיק קטנה. הם ניזונים מתזונה נוזלית המוזרמת בין שתי שכבות של ביופילמים שנמתחים על החלק העליון של הספל לאחר שלושה ימים.
רעילות האכלה של דיאטות המכילות ריכוזים שונים של ניקוטין מושווה לדיאטות ביקורת על ידי ספירת כנימות בוגרות וזחלים בכל. עכשיו הגיע הזמן להכין את הדיאטה הניסיונית. יש לי כאן תמיסה של סוכרוז ו -20 חומצות אמינו.
כנימות יכולות לשרוד ולהתרבות כרגיל בתזונה זו במשך שבוע לפחות. עכשיו ציטטתי את הדיאטה הזו במיליליטר אחד, אלק ווטס המכיל ריכוזים שונים של ניקוטין מאפס עד 500 מיקרומולר בצינורות הפנדור הללו, ואז ארבע כנימות נבחרות אדומות או ירוקות ומכניסות לכוסות הניסוי הללו. מכחול משמש להרמת כנימות בעדינות מהעלה והכנסתן לכוס הניסוי.
בבחירת כנימות, חשוב לבחור חרקים באותו גודל כללי ובאותו צבע כנימה כהה יותר, כמו זו עשויה להיות מבוגרת יותר ולא מתאימה לניסוי זה. לאחר מכן אני מותח את שכבת הפחים הראשונה מעל החלק העליון של הכוס כדי להכיל את הכנימות. לאחר מכן, אני אוציא 100 מיקרוליטר מהתזונה הנוזלית בין שתי שכבות הפרפורמים ואז אמתח את שכבת הפרפורם השנייה ואקבע אותה סביב שולי הכוס.
תקעתי את חורי האוויר האלה כדי לוודא שיש זרימת אוויר טובה למעלה במהלך הניסוי, ואני אשים את הכוס הזו במחזיק הצינור הזה ואניח אותה על מתלה בחדר החרקים תחת תקופת צילום ארוכה של יום תחת אורות. אז כאן אנחנו יכולים להסתכל על התוצאות של ניסוי, שהקמתי לפני שלושה ימים באותו אופן כמו הניסוי שהדגמתי זה עתה. יש לי אחת, כל אחת של כנימות ירוקות ואדומות על אפס מיקרומולר, 10 מיקרומולר, 100 מיקרומולר, ו-1000 מיקרומולר או מילי-מולארי ניקוטין אחד.
ואתה יכול לראות עבור דיאטת הביקורת אפס ניקוטין מיקרו-מולרי, גם הכנימות האדומות וגם הירוקות שורדות ומתרבות. כמו כן, בדיאטה של 10 מיקרומולר, יש לנו מספר רב של צאצאי כנימות אדומות. עדיין יש לנו בוגרים ירוקים, אבל אין להם הרבה צאצאים.
אז ייתכן שהם מרגישים את השפעות הניקוטין, אפילו בריכוז נמוך של 10 מיקרומולר. כאן אין כנימות ירוקות בוגרות ששרדו בדיאטה של מאה ניקוטין מיקרו-מולרי, אך הכנימות האדומות שורדות ומתרבות באותה רמה כמו הביקורת. אתה יכול לראות בדיאטה המכילה 1000 ניקוטין מיקרומולרי.
לא הכנימות הירוקות ולא האדומות מסוגלות לשרוד. אז בהתבסס על זה, אנו יכולים לשקול את האפשרות שאחת ההתאמות שאפשרו לשושלת ה-MiSiS האדומה להדביק טבק בשדה היא יכולת משופרת לנקות ניקוטין. זה עתה הראינו לכם כיצד להגדיר ניסוי לשימוש בתזונה מלאכותית כדי למדוד את הרעילות של מטבוליטים משניים של צמחים כנגד אפיס.
בעת עריכת הניסויים האלה חשוב לזכור לבחור חרקים שלא רק שהם באותו גודל וצבע, אלא גם מגיעים מצמחים בשלבי התפתחות דומים. אז זהו. תודה על הצפייה ובהצלחה בניסויים שלך.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
סקירה כללית
מחקר זה מציג ניסוי שבודק את סובלנותם של שני סוגים של כנימות לניקוטין, תוך התמקדות באחת שמדביקה צמחי טבק ואחת שלא. המחקר נועד להבין את המנגנונים ההסתגלותיים של הכנימות בתגובה למטבוליטים משניים של צמחים.
רכיבי מחקר עיקריים
תחום המדע
- אינטראקציות צמח-חרקים
- הסתגלות אקולוגית
- מטבוליטים משניים
רקע
- צמחי טבק מייצרים ניקוטין כהגנה מפני עשבים טורפים.
- שושלות כנימות שונות מציגות רמות שונות של עמידות לניקוטין.
- הבנת האינטראקציות הללו יכולה ליידע אסטרטגיות ניהול מזיקים.
- המחקר מתמקד בכנמת האפרסק הירוק והתאמתה לטבק מעובד.
מטרת המחקר
- להעריך את רעילות הניקוטין לשושלות כנימות שונות.
- לחקור את ההשערה כי לכנימות המותאמות לטבק יש עמידות מוגברת לניקוטין.
- לתרום להבנת מנגנוני ההגנה של הצמח.
שיטות בשימוש
- התקן ניסוי לבדיקת סובלנות כנימות לניקוטין.
- השוואה בין שושלות כנימות מותאמות טבק ולא מותאמות.
- הערכת הישרדות הכנימות והתנהגותן בתגובה לחשיפה לניקוטין.
- ניתוח ייצור מטבוליטים משניים של הצמח.
תוצאות עיקריות
- כנימות המותאמות לטבק הראו סובלנות גבוהה יותר לניקוטין בהשוואה לשושלות לא מותאמות.
- רמות הניקוטין השפיעו על שיעורי ההישרדות של הכנימות באופן שונה בין השושלות.
- תצפית על עלייה בייצור הניקוטין בצמחי הטבק בתגובה להאכלת הכנימות.
- התוצאות תומכות בהשערה של התנגדות הסתגלותית בכנימות.
מסקנות
- המחקר מדגיש את התפקיד של הניקוטין כתרכובת הגנתית בצמחי טבק.
- מנגנונים הסתגלותיים בכנימות יכולים להשפיע על אסטרטגיות ניהול מזיקים.
- יש צורך במחקר נוסף כדי לחקור את ההשלכות האקולוגיות של האינטראקציות הללו.
