Name: בדיקת סובלנות ניקוטין ב כנימות באמצעות ניסוי דיאט מלאכותית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-05-14T16:17:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: חקור את מנגנוני הסבילות של כנימות לניקוטין באמצעות ניסוי דיאט מלאכותית. המחקר מדגים הבדלים בין זני כנימות מותאמות לטבק לבין כאלה שאינן מותאמות, ותורם להבנת אינטראקציות צמח-חרק.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

בניסוי זה, 4 כנימות מבוגר מוקפים כוס פלסטיק קטנה. הם ניזונים מהתזונה נוזלי pipetted בין 2 שכבות של parafilm נמתח מעל הכוס. אחרי 3 ימים האכלה, הרעילות של תזונה המכילה ריכוזים שונים של ניקוטין לעומת שליטה דיאטות ידי ספירת מבוגרים כנימות הזחל בכוס אחד. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך את פתרונות המכיל סוכרוז 20 חומצות אמינו. כנימות יכול להתקיים על דיאטה זו, להתרבות על רמות נורמליות, במשך שבוע לפחות 1. אנא ראה קובץ מצורף על הדיאטה מלאכותית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Aliquot 1 מ&quot;ל של דיאטה זו תוך 6 צינורות שונים Eppendorf המכיל ניקוטין. לייבל אליהם בכבוד לריכוזים שונים של ניקוטין המשמש, החל 0-500μM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר 4 כנימות, אדום או ירוק, והכניסו אלה כוסות ניסיוני. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעת בחירת כנימות, חשוב שהם יהיו בגיל עקבי. בדרך כלל, לחפש כנימות בגודל דומה ובצבע (את הכנימות לקבל אדום כהה כאשר הם ישנים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסים את הכוס עם חתיכת parafilm. הקף את הדיאטה בין 2 חתיכות parafilm. חלקית למתוח את רמת parafilm שנייה על שולי הכוס. Aliquot דיאטת נוזלים בין השכבות, ואת החותם את השכבה העליונה כלפי מטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור אלה כוסות בחדר חרק תחת האורות photoperiod ארוכת יום במשך 3 ימים, לאחר זמן את הנתונים עבור הניסוי ניתן לאסוף. </li></ol> בקר <a href="http://arjournals.annualreviews.org/doi/abs/10.1146/annurev.arplant.59.032607.092825" target="_blank">ביקורות שנתי של ביולוגיה הצמח</a> לקבלת מידע נוסף על חסינות פרוטוקול צמח זה herbivory חרקים.

למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.

בדיקת סובלנות ניקוטין ב כנימות באמצעות ניסוי דיאט מלאכותית

Testing Nicotine Tolerance in Aphids Using an Artificial Diet Experiment

צמחים עשויים upregulate הייצור של מטבוליטים רבים seconday שונה בתגובה האכלה חרקים. אחד מהם מטבוליטים, ניקוטין, הוא יודע היטב יש תכונות חרקים. תגובה אחת של צמחי טבק herbivory, או להיות מכורסם על ידי חרקים, היא להגדיל את הייצור של אלקלואיד זה neurotoxic. כאן, נדגים כיצד להגדיר ניסוי לכתובת זו השאלה האם טבק מותאם זן של הכנימה אפרסק ירוק, persicae Myzus, יכולים לסבול רמות גבוהות של ניקוטין מאשר זן של חרק זה לא טבק שורצים ב השדה.

בסרטון זה assay הוא הוכיח כי הבדיקות סובלנות של ניקוטין שני סוגים של כנימות אחד פושט צמחי טבק בתחום ואחד לא.

צמחים עשויים להגביר את ייצורם של מטבוליטים משניים רבים ושונים כמענה להזנה על ידי חרקים. אחד ממטבוליטים אלו, הניקוטין, הוא...

צמחים עשויים לווסת את הייצור של מטבוליטים משניים רבים ושונים בתגובה להאכלת חרקים. תגובה אחת של צמחי טבק לאוכלי עשב אינה נתפסת על ידי חרקים היא להגביר את ייצור הניקוטין האלקלואיד הנוירוטוקס, באמצעות ניקוטין. כדוגמה, אדגים כיצד להקים ניסוי כדי להעריך את הרעילות של מטבוליטים משניים של צמחים כנגד כנימות.שושלות מסוימות של MiSiS persky, כנימת האפרסק הירוקה הסתגלו להתמחות בטבק מתורבת. כאן אנו משערים כי לשושלות המותאמות לטבק יש עמידות מוגברת לניקוטין על פני שושלות לא מסתגלות. היי, שמי ג'ון רמזי.אני סטודנטית לתואר שני במעבדה של ג'ורג' ג'נדר במכון בו תומפסון לחקר הצמחים. היום אני הולך להראות לכם נוהל למדידת הרעילות של מטבוליטים צמחיים כנגד כנימות. הליך זה כולל הכנת תזונה מלאכותית אליה מטבוליט הצמח מעניין.במקרה זה, ניקוטין מתווסף בריכוזים משתנים, כולאים כנימות בכלובים, כך שהן ניזונות מתזונה זו וסופרים כנימות לאחר מספר ימים כדי למדוד את ההישרדות והפוריות בריכוזים שונים של ניקוטין. אז בואו נתחיל. עם הניסוי.אנו יכולים לגדל כנימות בתזונה מלאכותית, תוך ניצול סגנון האכילה שלהן שבו הן מכניסות סגנון S מיוחד לכלי הדם של הצמח וצורכות תזונה של מוהל זרימה. אנו מכינים תזונה נוזלית הדומה לזו שנתקלים בה ה-A ניזונו מצמח המורכב מסוכרוז וחומצות אמינו לתמיסה זו. לאחר מכן אנו מוסיפים ריכוזים משתנים של מטבוליט הצמח.אנו מעוניינים לבחון את הרעילות של, במקרה זה, ניקוטין. בניסוי זה, ארבע כנימות בוגרות סגורות בכוס פלסטיק קטנה. הם ניזונים מתזונה נוזלית המוזרמת בין שתי שכבות של ביופילמים שנמתחים על החלק העליון של הספל לאחר שלושה ימים.רעילות האכלה של דיאטות המכילות ריכוזים שונים של ניקוטין מושווה לדיאטות ביקורת על ידי ספירת כנימות בוגרות וזחלים בכל. עכשיו הגיע הזמן להכין את הדיאטה הניסיונית. יש לי כאן תמיסה של סוכרוז ו -20 חומצות אמינו.כנימות יכולות לשרוד ולהתרבות כרגיל בתזונה זו במשך שבוע לפחות. עכשיו ציטטתי את הדיאטה הזו במיליליטר אחד, אלק ווטס המכיל ריכוזים שונים של ניקוטין מאפס עד 500 מיקרומולר בצינורות הפנדור הללו, ואז ארבע כנימות נבחרות אדומות או ירוקות ומכניסות לכוסות הניסוי הללו. מכחול משמש להרמת כנימות בעדינות מהעלה והכנסתן לכוס הניסוי.בבחירת כנימות, חשוב לבחור חרקים באותו גודל כללי ובאותו צבע כנימה כהה יותר, כמו זו עשויה להיות מבוגרת יותר ולא מתאימה לניסוי זה. לאחר מכן אני מותח את שכבת הפחים הראשונה מעל החלק העליון של הכוס כדי להכיל את הכנימות. לאחר מכן, אני אוציא 100 מיקרוליטר מהתזונה הנוזלית בין שתי שכבות הפרפורמים ואז אמתח את שכבת הפרפורם השנייה ואקבע אותה סביב שולי הכוס.תקעתי את חורי האוויר האלה כדי לוודא שיש זרימת אוויר טובה למעלה במהלך הניסוי, ואני אשים את הכוס הזו במחזיק הצינור הזה ואניח אותה על מתלה בחדר החרקים תחת תקופת צילום ארוכה של יום תחת אורות. אז כאן אנחנו יכולים להסתכל על התוצאות של ניסוי, שהקמתי לפני שלושה ימים באותו אופן כמו הניסוי שהדגמתי זה עתה. יש לי אחת, כל אחת של כנימות ירוקות ואדומות על אפס מיקרומולר, 10 מיקרומולר, 100 מיקרומולר, ו-1000 מיקרומולר או מילי-מולארי ניקוטין אחד.ואתה יכול לראות עבור דיאטת הביקורת אפס ניקוטין מיקרו-מולרי, גם הכנימות האדומות וגם הירוקות שורדות ומתרבות. כמו כן, בדיאטה של 10 מיקרומולר, יש לנו מספר רב של צאצאי כנימות אדומות. עדיין יש לנו בוגרים ירוקים, אבל אין להם הרבה צאצאים.אז ייתכן שהם מרגישים את השפעות הניקוטין, אפילו בריכוז נמוך של 10 מיקרומולר. כאן אין כנימות ירוקות בוגרות ששרדו בדיאטה של מאה ניקוטין מיקרו-מולרי, אך הכנימות האדומות שורדות ומתרבות באותה רמה כמו הביקורת. אתה יכול לראות בדיאטה המכילה 1000 ניקוטין מיקרומולרי.לא הכנימות הירוקות ולא האדומות מסוגלות לשרוד. אז בהתבסס על זה, אנו יכולים לשקול את האפשרות שאחת ההתאמות שאפשרו לשושלת ה-MiSiS האדומה להדביק טבק בשדה היא יכולת משופרת לנקות ניקוטין. זה עתה הראינו לכם כיצד להגדיר ניסוי לשימוש בתזונה מלאכותית כדי למדוד את הרעילות של מטבוליטים משניים של צמחים כנגד אפיס.בעת עריכת הניסויים האלה חשוב לזכור לבחור חרקים שלא רק שהם באותו גודל וצבע, אלא גם מגיעים מצמחים בשלבי התפתחות דומים. אז זהו. תודה על הצפייה ובהצלחה בניסויים שלך.

testing-nicotine-tolerance-aphids-using-an-artificial-diet

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

עמידות הצמח אל אוכלי צמחים חרקים לעיסה ניתן לבדוק בכמה דרכים. כאן, אנו מדגימים כיצד הגדרת בחירה ניסוי אין ברירה עם thaliana הצמח ארבידופסיס מודל לזהות התנגדות המינים הדברה פיאריס ראפא.

בחירה אין ברירה מבחני לבחינות ההתנגדות של thaliana א &#39;חרקים לעיסת

כנימות הם משדרים יעיל של וירוסים הצמח. Microinjection כנימה של הנגיף, ההליך נוכל להראות לכם היום, היא טכניקה המאפשרת לחוקרים להזרים וירוס ישירות hemocoel של הכנימה, לעקוף את המעיים, אחד 2 המחסומים העיקריים להעברת הנגיף באופן circulative. באותה טכניקה משמשת גם להזריק dsRNA עבור RNAi.

בדיקת חסמים פיזיולוגיים להעברת נגיפי ב כנימות שימוש Microinjection

סרטון זה מתאר את מבחן העדפות הטעם, שיטה התנהגותית המשמשת למדידת משיכה או הימנעות כלפי תמיסות צבעוניות שטעמן שונה על ידי הערכת צבע הבטן של הזבוב לאחר בליעת החומר המועדף. הפרוטוקול המוצג מדגים את ההליך המשמש למדידת העדפת זבובים לתמיסות בריכוזי סוכרוז משתנים.

בדיקת העדפות טעם: שיטה למדידת התנהגות האכלה בדרוזופילה

מבחן התנהגותי חדש מתואר לחקירת תגובות הטעם לטווח קצר של חלקי הפה של דבורי בומבוס הנעות בחופשיות (Bombus terrestris) כלפי חומרים מזינים ורעלים בתמיסה.

Assay רומן ההתנהגות לחקור תגובות Gustatory של הפרט, חופשי-נע דבורים Bumble (<em&gt; בומבוס האדמה</em&gt;)

טעם הוא תהליך חושי חשוב המאפשר משיכה לחומרים מועילים והימנעות מחומרים רעילים.  פרוטוקול זה מתאר מבחן בליעה פשוט לקביעת העדפת טעם של דרוזופילה לתרכובת כימית נתונה.

Assay העדפות טעם למבוגרים<em&gt; תסיסנית</em

מימדיה Aphis nerii והצנרות על הגן מאוד צמחים ממשפחת dogbane (Apocyanaceae), ומספק הזדמנויות רבות ללמוד אינטראקציות צמח-חרקים. כאן, אנו מציגים סדרת פרוטוקולים עבור שמירה על צמח, כנימות עלה תרבויות, ואת הדור ניתוח של מולקולרית ונתונים - omic עבור nerii א.

שמירה על תרבויות ביולוגי מדידה ביטוי גנים ב Aphis nerii: מערכת Non-מודל עבור אינטראקציות צמח-חרק

כאן, אנו מתארים את הבנייה ואת השימוש במנהרת רוח עבור ריח מתווכת מבחני התנהגותי עם חרקים. העיצוב מנהרת רוח מקלה על שחרורו של ריח מקורות באמצעות מספר שיטות, עם וללא גירויים חזותיים. מנהרת רוח ניסויים הם אמצעי חשוב לזיהוי כימיקלים נדיפים פעיל בהתנהגותו.

במנהרת רוח עבור ריח מתווכת מבחני התנהגותי חרקים

הפרוטוקול הנוכחי מספק מידע הדרכה לשימוש בתולעת טבק מנדוקה סקסטה במחקר קנבינואידים.  השיטה המתוארת כאן כוללת את כל האספקה והפרוטוקולים הדרושים לניטור שינויים פיזיולוגיים והתנהגותיים של מודל החרקים בתגובה לטיפול בקנבידיול (CBD).

קרן טבק כמערכת מודל חרקים למחקרים פרה-קליניים קנבינואידים

פרוטוקול זה מתאר את בדיקת ההזנה המחייבת להעריך את ההשפעה הרעילה, פוטנציאלית, של פיטוכימיקל על זחלי החרקים הלפידופטרניים. זוהי בדיקה ביולוגית של חרקים בעלת יכולת הרחבה גבוהה, שקל לייעל את המינון התת-קטלני והקטלני, את פעילות ההרתעה ואת ההשפעה הפיזיולוגית. זה יכול לשמש להקרנת קוטלי חרקים ידידותיים לסביבה.

פיתוח מערכת בדיקת האכלה להערכת ההשפעה קוטלת החרקים של פיטוכימיקלים על Helicoverpa armigera

פרוטוקול זה מציג מערכת ביו-אסאי אופטימלית של עלים מנותקים להערכת היעילות של פטריות אנטומופתוגניות (EPF) נגד כנימת החרדל (Lipaphis erysimi (Kalt.)), חרק פרתנוגנטי. השיטה מתארת את תהליך איסוף הנתונים במהלך ניסויים בצלוחית פטרי, ומאפשרת לחוקרים למדוד באופן עקבי את האלימות של EPF נגד כנימות חרדל וחרקים פרתנוגנטיים אחרים.

הערכת ההשפעה של פטריות אנטומופתוגניות נגד חרק פרתנוגנטי, כנימת חרדל, Lipaphis erysimi (Kalt.)

מאמר זה מציג פרוטוקול מפורט לגידול הפרפר הלבן של הכרוב בתנאי מעבדה מבוקרים באמצעות תזונה מלאכותית, המאפשרת מניפולציות מדויקות של תזונה מוקדמת וחשיפה לרעלנים. התוצאות המייצגות מראות כיצד ניתן לבדוק רעילות של מתכות כבדות באמצעות פרוטוקול זה.

גידול הפרפר הלבן של הכרוב (Pieris rapae) בתנאים מבוקרים: מקרה בוחן עם עמידות למתכות כבדות

חקור את מנגנוני הסבילות של כנימות לניקוטין באמצעות ניסוי דיאט מלאכותית. המחקר מדגים הבדלים בין זני כנימות מותאמות לטבק לבין כאלה שאינן מותאמות, ותורם להבנת אינטראקציות צמח-חרק.

בדיקת סובלנות ניקוטין ב כנימות באמצעות ניסוי דיאט מלאכותית

גלה סרטונים נוספים