Name: בידוד תאי לוויין שריר השלד למחקרי מיוגנזה במבחנה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-24T14:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 56 s
Description: למד פרוטוקול ממוטב לבידוד תאי לוויין משריר השלד של עכברים מבוגרים ונאונטליים. השיטה משלבת עיכול אנזימטי, סינון רציף ומיון תאים מגנטי להשגת תרביות טהורות של מיובלסטים לחקר מיוגנזה ורפיון שריר.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Yeh, C. -J., Sattler, K. M., Lepper, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+regulation+of+satellite+cells+via+intercellular+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Gene%22%5BJournal%5D)">Molecular regulation of satellite cells via intercellular signaling.</a> Gene. 858, 147172(2023).</li>
<li>Gonzalez, M. L., Busse, N. I., Waits, C. M., Johnson, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cells+and+their+regulation+in+livestock%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Satellite cells and their regulation in livestock.</a> J Anim Sci. 98 (5), skaa081(2020).</li>
<li>Mauro, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cell+of+skeletal+muscle+fibers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophys+Biochem+Cytol%22%5BJournal%5D)">Satellite cell of skeletal muscle fibers.</a> J Biophys Biochem Cytol. 9 (2), 493-495 (1961).</li>
<li>Yin, H., Price, F., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cells+and+the+muscle+stem+cell+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Satellite cells and the muscle stem cell niche.</a> Physiol Rev. 93, 23-67 (2013).</li>
<li>Kahn, R. E., Dayanidhi, S., Lacham-Kaplan, O., Hawley, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+clocks%2C+satellite+cells%2C+and+skeletal+muscle+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Molecular clocks, satellite cells, and skeletal muscle regeneration.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 324 (1), C1332-C1340 (2023).</li>
<li>Abreu, P., Mendes, S. V. D., Ceccatto, V. M., Hirabara, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cell+activation+induced+by+aerobic+muscle+adaptation+in+response+to+endurance+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Satellite cell activation induced by aerobic muscle adaptation in response to endurance exercise.</a> Life Sci. 170, 33-40 (2017).</li>
<li>Dueweke, J. J., Awan, T. M., Mendias, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+of+skeletal+muscle+after+eccentric+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sport+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Regeneration of skeletal muscle after eccentric injury.</a> J Sport Rehabil. 26 (2), 171-179 (2017).</li>
<li>Michele, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+skeletal+muscle+repair+and+regeneration+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+J%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of skeletal muscle repair and regeneration in health and disease.</a> FEBS J. 289 (21), 6460-6462 (2022).</li>
<li>Domingues-Faria, C., Vasson, M. -P., Goncalves-Mendes, N., Boirie, Y., Walrand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+regeneration+and+impact+of+aging+and+nutrition%5BTitle%5D)+AND+%22Ageing+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle regeneration and impact of aging and nutrition.</a> Ageing Res Rev. 26, 22-36 (2016).</li>
<li>Tierney, M. T., Sacco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cell+heterogeneity+in+skeletal+muscle+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Satellite cell heterogeneity in skeletal muscle homeostasis.</a> Trends Cell Biol. 26 (6), 434-444 (2016).</li>
<li>Troy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordination+of+satellite+cell+activation+and+self-renewal+by+Par-complex-dependent+asymmetric+activation+of+p38%CE%B1%2F%CE%B2+MAPK%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Coordination of satellite cell activation and self-renewal by Par-complex-dependent asymmetric activation of p38α/β MAPK.</a> Cell Stem Cell. 11 (4), 541-553 (2012).</li>
<li>Dumont, N. A., Wang, Y. X., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrinsic+and+extrinsic+mechanisms+regulating+satellite+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Intrinsic and extrinsic mechanisms regulating satellite cell function.</a> Development. 142 (9), 1572-1581 (2015).</li>
<li>Danoviz, M. E., Yablonka-Reuveni, Z. Skeletal muscle satellite cells: background and methods for isolation and analysis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDanoviz%2C+ME+%22Myogenesis%22">Myogenesis</a>. DiMario, J. X. 798, Humana Press. 21-52 (2012).</li>
<li>Gharaibeh, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+a+slowly+adhering+cell+fraction+containing+stem+cells+from+murine+skeletal+muscle+by+the+preplate+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation of a slowly adhering cell fraction containing stem cells from murine skeletal muscle by the preplate technique.</a> Nat Protoc. 3 (9), 1501-1509 (2008).</li>
<li>Benedetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+approach+for+the+isolation+and+long-term+expansion+of+pure+satellite+cells+based+on+ice-cold+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Skelet+Muscle%22%5BJournal%5D)">A novel approach for the isolation and long-term expansion of pure satellite cells based on ice-cold treatment.</a> Skelet Muscle. 11 (1), 7(2021).</li>
<li>Yoshioka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+preplating+method+for+high-yield+and+high-purity+muscle+stem+cell+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">A modified preplating method for high-yield and high-purity muscle stem cell isolation.</a> Front Cell Dev Biol. 8, 793(2020).</li>
<li>Uezumi, A., Fukada, S., Yamamoto, N., Takeda, S., Tsuchida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+progenitors+distinct+from+satellite+cells+contribute+to+ectopic+fat+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal progenitors distinct from satellite cells contribute to ectopic fat formation.</a> Nat Cell Biol. 12 (2), 143-152 (2010).</li>
<li>Christov, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+satellite+cells+and+endothelial+cells%3A+close+neighbors+and+privileged+partners%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">Muscle satellite cells and endothelial cells: close neighbors and privileged partners.</a> Mol Biol Cell. 18 (4), 1397-1409 (2007).</li>
<li>Elizalde, G., Munoz, A. Z., Almada, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+the+isolation+of+mouse+muscle+stem+cells+using+fluorescence-activated+cell+sorting%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for the isolation of mouse muscle stem cells using fluorescence-activated cell sorting.</a> STAR Protoc. 4 (4), 102656(2023).</li>
<li>Pasut, A., Oleynik, P., Rudnicki, M. A. Isolation of muscle stem cells by fluorescence-activated cell sorting. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPasut%2C+A+%22Myogenesis%22">Myogenesis</a>. DiMario, X. 798, Humana Press. 53-64 (2012).</li>
<li>Lee, J. D., Sinha, B. C., Larkin, L. M., Vandenburgh, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+purification+of+satellite+cells+for+skeletal+muscle+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22J+Regen+Med%22%5BJournal%5D)">Isolation and purification of satellite cells for skeletal muscle tissue engineering.</a> J Regen Med. 3 (2), (2015).</li>
<li>Llufrio, E. M., Wang, L., Naser, F. J., Patti, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sorting+cells+alters+their+redox+state+and+cellular+metabolome%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biol%22%5BJournal%5D)">Sorting cells alters their redox state and cellular metabolome.</a> Redox Biol. 16, 381-387 (2018).</li>
<li>Cusmano, A. A., et al. Efficient isolation and ex vivo differentiation of murine satellite cells. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCusmano%2C+AA+%22Stem+Cell%22">Stem Cell</a>. Turksen, K. 2939, Springer. 37-54 (2025).</li>
<li>Park, Y. G., Moon, J. H., Kim, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+magnetic-activated+cell+sorting+and+preplating+for+myoblast+purification%5BTitle%5D)+AND+%22Yonsei+Med+J%22%5BJournal%5D)">Comparative study of magnetic-activated cell sorting and preplating for myoblast purification.</a> Yonsei Med J. 47 (2), 179-186 (2006).</li>
<li>Park, Y. G., Baek, A., Kim, S. Myoblast purifying by magnetic-activated cell sorting. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPark%2C+YG+%22Methods+Cell+Biol%22">Methods Cell Biol</a>. 112, Elsevier. 439-447 (2012).</li>
<li>Lee, H., Han, N. R., Kim, S. J., Yun, J. I., Lee, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+high-yield+isolation+protocol+for+active+muscle+satellite+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Development of a high-yield isolation protocol for active muscle satellite cells.</a> Int J Stem Cells. 15 (3), 283-290 (2022).</li>
<li>Cui, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+easy+and+practical+method+for+isolation%2C+culture+and+identification+of+mouse+skeletal+muscle+satellite+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Clin+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">An easy and practical method for isolation, culture and identification of mouse skeletal muscle satellite cells.</a> Int J Clin Exp Med. 9, 19424-19431 (2016).</li>
<li>Ding, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+and+isolation+of+highly+purified+porcine+satellite+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Discov%22%5BJournal%5D)">Characterization and isolation of highly purified porcine satellite cells.</a> Cell Death Discov. 3, 17003(2017).</li>
<li>Pawlikowski, B., Vogler, T. O., Gadek, K., Olwin, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+skeletal+muscle+stem+cells+by+fibroblast+growth+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Regulation of skeletal muscle stem cells by fibroblast growth factors.</a> Dev Dyn. 246 (5), 359-367 (2017).</li>
<li>Shahini, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+and+high-yield+isolation+of+myoblasts+from+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Efficient and high-yield isolation of myoblasts from skeletal muscle.</a> Stem Cell Res. 30, 122-129 (2018).</li>
<li>Lee, D. H., Kwak, K. B., Park, Y. C., Chung, C. H., Ha, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+and+characterization+of+myoblast+fusion+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cells%22%5BJournal%5D)">Purification and characterization of myoblast fusion inhibitor.</a> Mol Cells. 1, 177-182 (1991).</li>
<li>Moulin, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+and+adult+human+skin+fibroblasts+display+intrinsic+differences+in+contractile+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Fetal and adult human skin fibroblasts display intrinsic differences in contractile capacity.</a> J Cell Physiol. 188 (2), 211-222 (2001).</li>
<li>Wilson, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+expression+of+collagen+receptors+in+rat+cardiac+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc+Microanal%22%5BJournal%5D)">Age-dependent expression of collagen receptors in rat cardiac fibroblasts.</a> Microsc Microanal. 17 (4), 555-562 (2011).</li>
<li>Kohen, N. T., Little, L. E., Healy, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Matrigel+interfaces+during+defined+hESC+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Biointerphases%22%5BJournal%5D)">Characterization of Matrigel interfaces during defined hESC culture.</a> Biointerphases. 4 (4), 69-79 (2009).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+culture+system+supporting+robust+expansion+of+myogenic+progenitors%5BTitle%5D)+AND+%22BioRes+Open+Access%22%5BJournal%5D)">In vitro culture system supporting robust expansion of myogenic progenitors.</a> BioRes Open Access. 3 (3), 79-87 (2014).</li>
<li>Péault, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+and+progenitor+cells+in+skeletal+muscle+development+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Stem and progenitor cells in skeletal muscle development and therapy.</a> Mol Ther. 15 (5), 867-877 (2007).</li>
<li>Le Grand, F., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+satellite+cells+and+adult+myogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle satellite cells and adult myogenesis.</a> Curr Opin Cell Biol. 19 (6), 628-633 (2007).</li>
<li>Rando, T. A., Blau, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+mouse+myoblast+purification+and+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Primary mouse myoblast purification and transplantation.</a> J Cell Biol. 125 (6), 1275-1287 (1994).</li>
<li>Hindi, L., McMillan, J., Afroze, D., Hindi, S., Kumar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+culturing%2C+and+differentiation+of+primary+myoblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation, culturing, and differentiation of primary myoblasts.</a> Bio Protoc. 7 (9), (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.25% trypsin-EDTA&nbsp;</td><td>גיבקו</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>100 ומיקרו; מסננת תאי M &nbsp;</td><td>VWR</td><td>732-2759</td><td></td></tr><tr><td>30 ומיקרו; מסננת&nbsp;</td><td>מילטני ביוטק</td><td>130-041-407</td><td></td></tr><tr><td>40 ומיקרו; מסננת תאי M &nbsp;</td><td>VWR</td><td>732-2757</td><td></td></tr><tr><td>70 ומיקרו; מסננת תאי M &nbsp;</td><td>VWR</td><td>130-095-823</td><td></td></tr><tr><td>חומצה אצטית&nbsp;</td><td>פוץ'</td><td>568760114</td><td>מומס ב-dH2O לריכוז סופי של 20 מ"מ ועוקר באמצעות 0.2 ומיקרו; מסנן m</td></tr><tr><td>אלקסה פלואר 488, חמור נגד ארנב</td><td>Invitrogen&nbsp;</td><td>A21206</td><td>מומס בתמיסת חסימה (ראו סעיף 8.7) בדילול של 1:250</td></tr><tr><td>אלקסה פלואר 488, אנטי-עכבר עזים&nbsp;</td><td>אבקאם</td><td>ab150113</td><td>מומס בתמיסת חסימה (ראו סעיף 8.7) בדילול של 1:250</td></tr><tr><td>כלוריד אמוניום (NH4Cl)&nbsp;</td><td>BioShop</td><td>AMC303.500</td><td>המיס במים לריכוז סופי של 50 מ"מ</td></tr><tr><td>מדיית הרכבה אנטיפייד</td><td>וקטשילד</td><td>H-2000-10</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן אנטי-PAX7</td><td>אבקאם</td><td>ab187339</td><td>מומס בתמיסת חסימה (ראו סעיף 8.7) בדילול של 1:100</td></tr><tr><td>גורם גדילה בסיסי של פיברובלסטים &nbsp;</td><td>קורנינג</td><td>354060</td><td>מומס ב-dH2O סטרילי לריכוז מלאי של 10 ומיקרו; g/mL&nbsp;</td></tr><tr><td>בטדין, 100 מ"ג/מ"ל</td><td>EGIS תרופות</td><td></td><td></td></tr><tr><td>לוח תרבית תאים, 6 בארות, Cell+</td><td>סארסטדט</td><td>83.3902.300</td><td></td></tr><tr><td>תמצית עובר עוף&nbsp;</td><td>ביומדיקל MP</td><td>2850145</td><td></td></tr><tr><td>קולגן I, זנב עכברוש</td><td>גיבקו</td><td>A10483-01</td><td>מומס ב-20 מ"מ חומצה אצטית&nbsp;</td></tr><tr><td>קולגנאז, סוג I</td><td>סיגמא</td><td>C0130-500MG</td><td>מומס ב-DMEM ועוטר באמצעות 0.2 ומיקרו; מסנן m</td></tr><tr><td>שפופרת דיסוציאציה (GentleMACS C Tubes)</td><td>מילטני ביוטק</td><td>130-093-237</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco Modified Eagle בינונית, עם רמת סוכר גבוהה</td><td>גיבקו</td><td>31966-021</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Invitrogen</td><td>AM9260G</td><td></td></tr><tr><td>צינורות צנטריפוגה חרוטיים של פלקון, 15 מ"ל</td><td>קורנינג</td><td>352096</td><td></td></tr><tr><td>צינורות צנטריפוגה קונית של פלקון, 50 מ"ל</td><td>קורנינג</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי</td><td>גיבקו</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>סרום סוסים&nbsp;</td><td>גיבקו</td><td>26050088</td><td></td></tr><tr><td>מגיב תיוג מגנטי (ערכת בידוד תאי לוויין)</td><td>מילטני ביוטק</td><td>130-104-268</td><td></td></tr><tr><td>מפריד מגנטי (מפריד MidiMACS)</td><td>מילטני ביוטק</td><td>130-042-302</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel&nbsp;</td><td>קורנינג</td><td>CLS356234</td><td>מומס ב-DMEM ל-10% ריכוז&nbsp;</td></tr><tr><td>פאראפורמלדהיד, 4% ב-PBS</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>J61899. AK</td><td></td></tr><tr><td>פניצילין-סטרפטומיצין&nbsp;</td><td>גיבקו</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>מלח מפופר בפוספט&nbsp;</td><td>VWR</td><td>392-0334</td><td></td></tr><tr><td>עמודת הפרדה (עמודות LS)</td><td>מילטני ביוטק</td><td>130-042-401</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן מיוזין לשריר השלד, MHC</td><td>סנטה קרוז</td><td>SC-32732</td><td>מומס בתמיסת חסימה (ראו סעיף 8.7) בדילול של 1:50</td></tr><tr><td>צלחת TC, 100 x 20 מ"מ</td><td>סארסטדט</td><td>83.3902</td><td></td></tr><tr><td>דיסוציאטור רקמות (GentleMACS Dissociator)</td><td>מילטני ביוטק</td><td>130-093-235</td><td></td></tr><tr><td>טריטון X-100&nbsp;</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>X100-1L</td><td></td></tr></tbody></table>

בידוד תאי לוויין שריר השלד למחקרי מיוגנזה במבחנה

Isolation of Skeletal Muscle Satellite Cells for In Vitro Myogenesis Studies

Skeletal muscle regeneration and growth depend on satellite cells, the muscle tissue&#39;s resident stem cells. Currently, these cells serve as ...

isolation-skeletal-muscle-satellite-cells-for-vitro-myogenesis

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

מיקרו גזור טכניקה explants היא שיטה חזקה ואמינה לבידוד שגשוג התאים שריר השלד מן, השרירים נוער למבוגרים או עובריים כמקור לתאי גזע שרירי השלד. באופן ייחודי, התאים האלה כבר נגזר clonally לייצר גזע שריר השלד שורות תאים המשמשים in vivo השתלה.

למבוגרים עובריים שרירי השלד Microexplant התרבות בידוד בתאי גזע שרירי השלד

סרטון זה מדגים את הבידוד של תאי לוויין מרקמות שריר מסועפות של ראש חולדה באמצעות דיסקציה של רקמות, עיכול אנזימטי וטיהור מכני וצנטריפוגלי לאחר מכן. לאחר מכן זורעים את התאים על בארות מצופות מטריצה חוץ-תאיות לצורך התמיינות למיובלסטים, ובסופו של דבר לצינורות מיו-צינור וסיבי שריר בוגרים.

טכניקה לבידוד תאי לוויין מרקמת שריר ראש חולדה

בידוד והתרבות של myofibers הוא תקן...

בידוד ותרבות של Myofibers פרט ותאי הלווין שלהם משרירי שלד למבוגרים

הבידוד והתרבות של אוכלוסייה טהורה של תאי לווין שקטים, אוכלוסיית תאי גזע שריר, הוא חיוני להבנה של ביולוגיה שרירים תאי גזע והתחדשות, כמו גם בתאי גזע להשתלה עבור טיפולים בניוון שרירים ומחלות ניווניות אחרות.

בידוד, תרבות והשתלה של תאי לווין שריר

בתרבות חוץ גופית מערכות הוכיחו הכרחיות להבנה של myogenesis חוליות שלנו. עם זאת, הרבה עדיין לא למד על פיתוח שרירי שלד nonmammalian וצמיחה, במיוחד במינים הבזליים. פרוטוקול יעיל וחזק לבידוד בתאי גזע בוגרים של רקמה זו, התאים המבשר myogenic (MPCs), ושמירה על ההתחדשות העצמית שלהם, שגשוג, ובידול בהגדרת תרבות העיקרית מאפשר זיהוי של מנגנוני פיקוח שימור ומסתעפים לאורך שושלות חוליות.

הכנת תא / תרבויות והיצמדות למנגנון הראשי myogenic מבשר משושלות חוליות בסל

סוגי התאים הדבקים העיקריים שמקורם בשריר אנושי הם תאים מיוגניים ופיברובלסטים. כאן, אוכלוסיות התאים מועשרות באמצעות מיון תאים מופעל מגנטי המבוסס על אנטיגן CD56. תיוג חיסוני לאחר מכן עם נוגדנים ספציפיים ושימוש בטכניקות ניתוח תמונה מאפשר כימות של מאפיינים ציטופלזמיים וגרעיניים בתאים בודדים.

בידוד וכמוני Immunocytochemical אפיון של תאים ראשוניים myogenic וFibroblasts משרירי שלד אדם

פרוטוקול זה מתאר בידוד של תאי לוויין משרירי ראש מסועפים של חולדה בת 9 שבועות. מקורם של השרירים בקשתות ענפיות שונות. לאחר מכן, תאי הלוויין מתורבתים על ציפוי נקודתי בגודל מילימטר כדי לחקור את ההתמיינות שלהם. גישה זו מונעת התרחבות ומעבר של תאי לוויין.

בידוד ואפיון של תאי לווין משרירי עכברוש ראש Branchiomeric

זיהוי מדויק של תאים הלוויין חיוני ללמוד את הפונקציות שלהם בתנאים פיזיולוגיים ופתולוגיים שונים. מאמר זה מציג פרוטוקול כדי לזהות תאים הלוויין במקטעי שרירי השלד למבוגרים מאת מבוססי immunofluorescence מכתים.

זיהוי של שרירי השלד תאים הלוויין על-ידי Immunofluorescence עם Pax7 ו- Laminin נוגדנים

פרוטוקול זה ממחיש את 1) הבידוד והתרבות של פיברובלסטים ראשוניים משריר הגסטרוקנמיוס של העכבר הבוגר, כמו גם 2) טיהור ואפיון של אקסוזומים באמצעות שיטת אולטרה-צנטריפוגה דיפרנציאלית בשילוב עם שיפועי צפיפות סוכרוז ולאחר מכן ניתוחי כתמים מערביים.

בידוד ואפיון אקסוזומים מפיברובלסטים של שרירי השלד

כאן, אנו מציעים שיטה ביעילות להשיג סיבי שריר בודד בשלב מוקדם לאחר לידה התפתחותית מ homozygous מוטציה Lamin δ 8-11 מודל העכבר, מודל חמור מאוד עבור השרירים נייל-דרייפוס ניוון שרירים (edmd).

בידוד ותרבות בודדים מודל מורנה של קבצי נייל-דרייפוס ניוון שרירים בתחילת לאחר לידה פיתוח

שרירי השלד מורכבים ממספר סוגי תאים, כולל תאי גזע תושבים, שלכל אחד מהם תרומה מיוחדת להומאוסטזיס והתחדשות שרירים. כאן מתוארת התרבית הדו-ממדית של תאי גזע שריריים ונישת תאי השריר בסביבה ex vivo המשמרת רבים מהמאפיינים הפיזיולוגיים, in vivo וסביבתיים.

תרבית בתפזורת בלתי מופרעת של שרירי שלד עכבר כדי לשחזר נישה ושקט תאי גזע

למד פרוטוקול ממוטב לבידוד תאי לוויין משריר השלד של עכברים מבוגרים ונאונטליים. השיטה משלבת עיכול אנזימטי, סינון רציף ומיון תאים מגנטי להשגת תרביות טהורות של מיובלסטים לחקר מיוגנזה ורפיון שריר.

בידוד תאי לוויין שריר השלד למחקרי מיוגנזה במבחנה

גלה סרטונים נוספים