Name: בידוד גרעין יחיד מרקמת אנדרטרקטומיה כלילית של חולי מעקף עורק כלילי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-03T13:08:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: למדו פרוטוקול לבידוד גרעינים מרקמת אנדרטרקטומיה כלילית של חולי מעקף עורק כלילי. השיטה מאפשרת פרופיל תעתיקי של פלאקות טרשתיות בדרגת סיכון גבוהה באמצעות snRNA-seq.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Roth, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+burden+of+cardiovascular+diseases+and+risk+factors-+1990-2019%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Global burden of cardiovascular diseases and risk factors- 1990-2019.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 76 (25), 2982-3021 (2020).</li>
<li>de Winther, M. P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translational+opportunities+of+single-cell+biology+in+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Translational opportunities of single-cell biology in atherosclerosis.</a> Eur. Heart J. 44 (14), 1216-1230 (2023).</li>
<li>Mohebbati, R., Momeni-Moghaddam, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+red+blood+cells+in+cholesterol+accumulation+and+atherosclerotic+plaque+instability%3A+a+perspective+on+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Cardiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">The role of red blood cells in cholesterol accumulation and atherosclerotic plaque instability: a perspective on atherosclerosis.</a> Curr. Cardiol. Rev. 21 (5), (2025).</li>
<li>Ajoolabady, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+in+atherosclerosis%3A+pathophysiology+and+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Inflammation in atherosclerosis: pathophysiology and mechanisms.</a> Cell Death Dis. 15 (11), 817(2024).</li>
<li>Dawson, L. P., Layland, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-risk+coronary+plaque+features%3A+a+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiol.+Ther%22%5BJournal%5D)">High-risk coronary plaque features: a narrative review.</a> Cardiol. Ther. 11 (3), 319-335 (2022).</li>
<li>Tong, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+sensitive+magnetic+particle+imaging+of+vulnerable+atherosclerotic+plaque+with+active+myeloperoxidase-targeted+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Highly sensitive magnetic particle imaging of vulnerable atherosclerotic plaque with active myeloperoxidase-targeted nanoparticles.</a> Theranostics. 12 (17), 7641-7641 (2022).</li>
<li>Lu, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+computed+tomography+angiography+assessment+of+high-risk+plaques+in+predicting+acute+coronary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cardiovasc.+Med%22%5BJournal%5D)">Coronary computed tomography angiography assessment of high-risk plaques in predicting acute coronary syndrome.</a> Front. Cardiovasc. Med. 8, (2021).</li>
<li>Kinoshita, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-risk+plaques+on+coronary+computed+tomography+angiography%5BTitle%5D)+AND+%22JACC+Cardiovasc.+Imaging%22%5BJournal%5D)">High-risk plaques on coronary computed tomography angiography.</a> JACC Cardiovasc. Imaging. 17 (4), 382-391 (2024).</li>
<li>Canu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+multimodality+imaging+of+coronary+vulnerable+patient%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cardiovasc.+Med%22%5BJournal%5D)">Non-invasive multimodality imaging of coronary vulnerable patient.</a> Front. Cardiovasc. Med. 9, (2022).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+coronary+computed+tomography+angiography-derived+plaque+features+in+the+diagnosis+of+optical+coherence+tomography-defined+vulnerable+plaques%5BTitle%5D)+AND+%22Quant.+Imaging+Med.+Surg%22%5BJournal%5D)">Assessment of coronary computed tomography angiography-derived plaque features in the diagnosis of optical coherence tomography-defined vulnerable plaques.</a> Quant. Imaging Med. Surg. 15 (3), 2029-2041 (2025).</li>
<li>Chiorescu, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vulnerable+atherosclerotic+plaque%3A+is+there+a+molecular+signature%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Mol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Vulnerable atherosclerotic plaque: is there a molecular signature.</a> Int. J. Mol. Sci. 23 (21), 13638(2022).</li>
<li>The applications of single-cell RNA sequencing in atherosclerotic disease. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Front.+Cardiovasc.+Med%22">Front. Cardiovasc. Med</a>. Slenders, L., Tessels, D. E., van der Laan, S. W., Pasterkamp, G., Mokry, M. 9, (2022).</li>
<li>Adam, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+biomarkers+of+atherosclerotic+vascular+disease-latest+insights+in+the+research+field%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Mol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Novel biomarkers of atherosclerotic vascular disease-latest insights in the research field.</a> Int. J. Mol. Sci. 23 (9), 4998(2022).</li>
<li>Ye, W., Chen, Z., Xia, Z., Li, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+RNA+sequencing+in+human+atherosclerotic+plaques+reveals+a+novel+smooth+muscle+cell+subtype+that+possesses+multi+differentiation+potential+and+shapes+the+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">Single-cell RNA sequencing in human atherosclerotic plaques reveals a novel smooth muscle cell subtype that possesses multi differentiation potential and shapes the microenvironment.</a> Clin. Exp. Med. 25 (1), 251(2025).</li>
<li>Kelly, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+endarterectomy%3A+analysis+of+the+society+of+thoracic+surgeons+adult+cardiac+surgery+database%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Thorac.+Surg%22%5BJournal%5D)">Coronary endarterectomy: analysis of the society of thoracic surgeons adult cardiac surgery database.</a> Ann. Thorac. Surg. 114 (3), 667-674 (2022).</li>
<li>Ghatanatti, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+endarterectomy%3A+recent+trends%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+DIAGNOSTIC+Res%22%5BJournal%5D)">Coronary endarterectomy: recent trends.</a> J. Clin. DIAGNOSTIC Res. , (2017).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptome+analysis+reveals+dynamic+cell+populations+and+differential+gene+expression+patterns+in+control+and+aneurysmal+human+aortic+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptome analysis reveals dynamic cell populations and differential gene expression patterns in control and aneurysmal human aortic tissue.</a> Circulation. 142 (14), 1374-1388 (2020).</li>
<li>Alsaigh, T., Evans, D., Frankel, D., Torkamani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decoding+the+transcriptome+of+calcified+atherosclerotic+plaque+at+single-cell+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Commun.+Biol%22%5BJournal%5D)">Decoding the transcriptome of calcified atherosclerotic plaque at single-cell resolution.</a> Commun. Biol. 5 (1), 1084(2022).</li>
<li>Iqbal, F., Lupieri, A., Aikawa, M., Aikawa, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harnessing+single-cell+RNA+sequencing+to+better+understand+how+diseased+cells+behave+the+way+they+do+in+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler.+Thromb.+Vasc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Harnessing single-cell RNA sequencing to better understand how diseased cells behave the way they do in cardiovascular disease.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 41 (2), 585-600 (2021).</li>
<li>Ahmad, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+cell+RNA+sequencing+of+haematopoietic+cells+in+fresh+and+frozen+human+atheroma+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc.+Res%22%5BJournal%5D)">Single cell RNA sequencing of haematopoietic cells in fresh and frozen human atheroma tissue.</a> Cardiovasc. Res. 121 (3), 396-404 (2025).</li>
<li>Depuydt, M. A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microanatomy+of+the+human+atherosclerotic+plaque+by+single-cell+transcriptomics%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Microanatomy of the human atherosclerotic plaque by single-cell transcriptomics.</a> Circ. Res. 127 (11), 1437-1455 (2020).</li>
<li>Williams, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+cell+RNA+sequencing+in+atherosclerosis+research%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Single cell RNA sequencing in atherosclerosis research.</a> Circ. Res. 126 (9), 1112-1126 (2020).</li>
<li>Kim, N., Kang, H., Jo, A., Yoo, S. -A., Lee, H. -O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perspectives+on+single-nucleus+RNA+sequencing+in+different+cell+types+and+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pathol.+Transl.+Med%22%5BJournal%5D)">Perspectives on single-nucleus RNA sequencing in different cell types and tissues.</a> J. Pathol. Transl. Med. 57 (1), 52-59 (2023).</li>
<li>Gruenbaum, Y., Foisner, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lamins%3A+Nuclear+intermediate+filament+proteins+with+fundamental+functions+in+nuclear+mechanics+and+genome+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Biochem%22%5BJournal%5D)">Lamins: Nuclear intermediate filament proteins with fundamental functions in nuclear mechanics and genome regulation.</a> Annu. Rev. Biochem. 84 (1), 131-164 (2015).</li>
<li>Zwerger, M., Ho, C. Y., Lammerding, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+mechanics+in+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Nuclear mechanics in disease.</a> Annu. Rev. Biomed. Eng. 13 (1), 397-428 (2011).</li>
<li>Dechat, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+lamins%3A+major+factors+in+the+structural+organization+and+function+of+the+nucleus+and+chromatin%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">Nuclear lamins: major factors in the structural organization and function of the nucleus and chromatin.</a> Genes Dev. 22 (7), 832-853 (2008).</li>
<li>Oh, J. -M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+cell+type+distribution+between+single-cell+and+single-nucleus+RNA+sequencing%3A+enrichment+of+adherent+cell+types+in+single-nucleus+RNA+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Mol.+Med%22%5BJournal%5D)">Comparison of cell type distribution between single-cell and single-nucleus RNA sequencing: enrichment of adherent cell types in single-nucleus RNA sequencing.</a> Exp. Mol. Med. 54 (12), 2128-2134 (2022).</li>
<li>Nott, A., Schlachetzki, J. C. M., Fixsen, B. R., Glass, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclei+isolation+of+multiple+brain+cell+types+for+omics+interrogation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Nuclei isolation of multiple brain cell types for omics interrogation.</a> Nat. Protoc. 16 (3), 1629-1646 (2021).</li>
<li>Gulko, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+flow+cytometry-assisted+single-nucleus+RNA+sequencing+of+human+and+mouse+adipose+tissue+with+sample+multiplexing%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for flow cytometry-assisted single-nucleus RNA sequencing of human and mouse adipose tissue with sample multiplexing.</a> STAR Protoc. 5 (1), 102893(2024).</li>
<li>Fernandez, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+immune+landscape+of+human+atherosclerotic+plaques%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Single-cell immune landscape of human atherosclerotic plaques.</a> Nat. Med. 25 (10), 1576-1588 (2019).</li>
<li>Galvis, A. E., Fisher, H., Camerini, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NP-40+fractionation+and+nucleic+acid+extraction+in+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22BIO-PROTOCOL%22%5BJournal%5D)">NP-40 fractionation and nucleic acid extraction in mammalian cells.</a> BIO-PROTOCOL. 7 (20), (2017).</li>
<li>Wirka, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atheroprotective+roles+of+smooth+muscle+cell+phenotypic+modulation+and+the+TCF21+disease+gene+as+revealed+by+single-cell+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Atheroprotective roles of smooth muscle cell phenotypic modulation and the TCF21 disease gene as revealed by single-cell analysis.</a> Nat. Med. 25 (8), 1280-1289 (2019).</li>
<li>Pan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+genomics+reveals+a+novel+cell+state+during+smooth+muscle+cell+phenotypic+switching+and+potential+therapeutic+targets+for+atherosclerosis+in+mouse+and+human%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Single-cell genomics reveals a novel cell state during smooth muscle cell phenotypic switching and potential therapeutic targets for atherosclerosis in mouse and human.</a> Circulation. 142 (21), 2060-2075 (2020).</li>
<li>Bakken, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-nucleus+and+single-cell+transcriptomes+compared+in+matched+cortical+cell+types%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Single-nucleus and single-cell transcriptomes compared in matched cortical cell types.</a> PLoS One. 13 (12), e0209648(2018).</li>
<li>Litviňuková, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cells+of+the+adult+human+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Cells of the adult human heart.</a> Nature. 588 (7838), 466-472 (2020).</li>
<li>Hu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-nucleus+transcriptomic+survey+of+cell+diversity+and+functional+maturation+in+postnatal+mammalian+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">Single-nucleus transcriptomic survey of cell diversity and functional maturation in postnatal mammalian hearts.</a> Genes Dev. 32 (19-20), 1344-1357 (2018).</li>
<li>Rani, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+use+of+RPMI+Medium+to+preserve+cell+morphology+for+pleural%2Fperitoneal+fluid+cytology%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cytol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of use of RPMI Medium to preserve cell morphology for pleural/peritoneal fluid cytology.</a> J. Cytol. 39 (1), 26-29 (2022).</li>
<li>Machado, L., Relaix, F., Mourikis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+relief%3A+emerging+methods+to+mitigate+dissociation-induced+artefacts%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Stress relief: emerging methods to mitigate dissociation-induced artefacts.</a> Trends Cell Biol. 31 (11), 888-897 (2021).</li>
<li>Slyper, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single-cell+and+single-nucleus+RNA-seq+toolbox+for+fresh+and+frozen+human+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">A single-cell and single-nucleus RNA-seq toolbox for fresh and frozen human tumors.</a> Nat. Med. 26 (5), 792-802 (2020).</li>
<li>Krishnaswami, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+single+nuclei+for+RNA-seq+to+capture+the+transcriptome+of+postmortem+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Using single nuclei for RNA-seq to capture the transcriptome of postmortem neurons.</a> Nat. Protoc. 11 (3), 499-524 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>100 & mu; מסננת M</td><td>Miltenyi Biotech&nbsp;</td><td>130-098-463</td><td></td></tr><tr><td>30 & mu; מסננת M</td><td>Miltenyi Biotech&nbsp;</td><td>130-098-458</td><td></td></tr><tr><td>אלבומין סרום בקר</td><td>HiMedia</td><td>TC546-25G</td><td></td></tr><tr><td>צנטריפוגה</td><td>MPW</td><td>NA</td><td>https://mpw.pl/en/offer/mpw-352r</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ מורכב</td><td>ניקון</td><td>NA&nbsp;</td><td>מיקרוסקופ הפוך Nikon Eclipse Ts2 (https://www.microscope.healthcare.nikon.com/en_AOM/products/inverted-microscopes/eclipse-ts2)</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ קונפוקלי &nbsp;</td><td>ניקון</td><td>NA</td><td>מיקרוסקופ קונפוקלי הפוך Nikon Ti2-E (https://www.microscope.healthcare.nikon.com/en_AOM/products/inverted-microscopes/eclipse-ti2-series)</td></tr><tr><td>כיסויי כיסוי</td><td>HiMedia</td><td>BG011C</td><td></td></tr><tr><td>בקבוקון CRYOCHIL דגימת פיה רחבה</td><td>טארסונים</td><td>883191</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>סיגמא</td><td>D9542-5MG</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>גיבקו (תרמופישר)</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>צינור צנטריפוגה (15 מ"ל)</td><td>טארסונים</td><td>546021</td><td></td></tr><tr><td>ציטומטר זרימה&nbsp;</td><td>BD ביוסיינסס</td><td>663029</td><td>BD FACSLyric (מכשיר 3L12C CEIVD)</td></tr><tr><td>המוציטומטר</td><td>אקסיביו</td><td>CCB 100</td><td></td></tr><tr><td>צינור מיקרוצנטריפוגה (1.5 מ"ל)</td><td>טארסונים</td><td>500010C</td><td></td></tr><tr><td>צינור מיקרוצנטריפוגה (5 מ"ל)</td><td>טארסונים</td><td>500050</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2</td><td>סיגמא</td><td>M1028-100ML</td><td></td></tr><tr><td>עלי מיקרו</td><td>טארסונים</td><td>160020</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>סיגמא</td><td>S9888-500G</td><td></td></tr><tr><td>NP-40</td><td>HiMedia</td><td>MB143-100ML</td><td></td></tr><tr><td>מים נטולי נוקלאז</td><td>גיבקו (תרמופישר)</td><td>W4502-1L</td><td></td></tr><tr><td>מעכב RNase</td><td>סיגמא</td><td>333540201</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>גיבקו (תרמופישר)</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>Slide&nbsp;</td><td>ריביירה</td><td>72910135</td><td></td></tr><tr><td>טריס-HCl</td><td>סיגמא</td><td>T2194-100ML</td><td></td></tr><tr><td>כחול טרייפן&nbsp;</td><td>סיגמא</td><td>302643-25G</td><td></td></tr></tbody></table>

בידוד גרעין יחיד מרקמת אנדרטרקטומיה כלילית של חולי מעקף עורק כלילי

Single Nuclei Isolation from Coronary Endarterectomy Tissue of Coronary Artery Bypass Graft Patients

רקמת אנדארטרקטומיה כלילית אנושית נאספה ממטופלים שעברו ניתוח CABG. הרקמה נשקלה ועובדה לבידוד גרעינים, וגרעינים מבודדים נוספים אושרו באמצעות ציטומטריית זרימה ומיקרוסקופיה קונפוקלית (איור 1).
הערכת Trypan Blue של איכות בידוד הגרעינים הרקמה שנשמרה במדיום RPMI נשקלה, והיא נמדדה 247.8 מ"ג. הרקמה טוחנה ואז הומוגנית בבופר ליזיס באמצעות מיקרופסטל לבידוד גרעיני (איור 2A-C). לאחר בידוד גרעיני...

Atherosclerosis is a chronic, progressive inflammatory condition characterized by the accumulation of plaque in the walls of arteries. During the ...

single-nuclei-isolation-from-coronary-endarterectomy-tissue-coronary

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

גרעינים לב מבודדים באמצעות שקיעה צפיפות immunolabeled עם נוגדנים נגד החומר pericentriolar 1 (PCM-1) כדי לזהות ולמיין גרעינים cardiomyocyte ידי cytometry הזרימה.

הבידוד של גרעיני Cardiomyocyte מרקמות שלאחר המוות

ידע הנוכחי על הבסיס התאי של מחלות לב בעיקר מסתמך על מחקרים במודלים של בעלי חיים. כאן אנו מתארים ולאמת שיטה חדשה להשיג cardiomyocytes קיימא אחת מדגימות ניתוחיות קטנות של שריר הלב חדרית האנושי. myocytes חדרית האנושי יכול לשמש למחקרי אלקטרו ובדיקות סמים.

בידוד ואפיון פונקציונלי של אדם חדרית שריר לב מדוגמאות כירורגי טריות

היכולת לבודד תאי אנדותל של מסתמי הלב (VECs) היא קריטית להבנת מנגנוני התפתחות, תחזוקה ומחלות של מסתמים.  כאן אנו מתארים את הבידוד של VECs מעכברי Tie2-GFP עובריים ובוגרים באמצעות FACS שיאפשר מחקרים הקובעים את תרומתם של VECs בתהליכי התפתחות ומחלות.

בידוד של תאי Murine Valve האנדותל

מטרת פרוטוקול זה היא להדגים את טכניקות בידוד וההתרבות של תאי שריר חלק בכלי דם בעכברים עיקריים (VSMCs) מהמחזור כלילית. לאחר VSMCs בודד, הם יכולים לשמש עבור טכניקות תרבות סטנדרטיות רבות.

בידוד של תאי שריר חלק Murine כלילית דם

פרוטוקול זה מוכן לחלוק את השיטה שלנו לבידוד תאי אנדותל כליליים של עכברים לצורך הדמיה או לביצוע ניסויים ביולוגיים מולקולריים.

בידוד של תאי האנדותל העכבר כלילי

ברקמת לב אדם מטפחת אוכלוסיות תאי מבשר perivascular מולטיפוטנטיים שעשויה להיות מתאים התחדשות שריר לב. הטכניקה המתוארת כאן מאפשרת בידוד סימולטני וטיהור שתי אוכלוסיות תאי סטרומה מולטיפוטנטיים קשורות כלי דם מקומיים, כלומר CD146 + CD34 - pericytes ו CD34 + CD146 - תאי adventitial, מן שריר הלב האנושי.

בידוד של אוכלוסיות תאי perivascular מולטיפוטנטיים המבשרים מרקמות אדם לב

גידול תאי אנדותל הם גורמים חשובים של microenvironment הגידול הקורס של המחלה. כאן, עבור בידוד תאי אנדותל טהורה ובת -קיימא מן האנושי קרצינומה של המעי הגס והמעי הגס רגיל כדי לשמש בדיקות סמים ומחקר פתוגנזה פרוטוקול המתואר.

בידוד של תאי אנדותל אדם נורמלי המעי הגס, סרטן המעי הגס - פרוטוקול משופר

מטרת עבודה זו היא לפתח שיטה לבודד באופן רקרדיומיוקיטים מהלב הבוגר ים למדוד תוכן DNA וגרעין.

בידוד של קרדיומיוציטים מלבבות קבועים עבור אימונוציטוכימיה וניתוח פלוידי

אנו מציגים פרוטוקול עבור בידוד של אנדוקקרודיאל ותאי הכליליים כלילית מלבבות חולדה באמצעות עיכול הרקמה הסדרתית במאגר העיכול, איסוף תא מחזורי צנטריפוגה חוזרים, וטיהור תאים באמצעות anti-rat CD31 microbeads.

בידוד של תאי כלילית ותאים כליליים מהקיר החופשי של לב החולדה

כאן אנו מציגים פרוטוקול המתאר הכנת גרעיני תאים. לאחר מיקרודיסקציה ודיסוציאציה אנזימטית של רקמת הלב לתאים בודדים, תאי האב הוקפאו, ולאחר מכן בידוד של תאים טהורים בני קיימא, ששימשו לריצוף RNA של גרעין יחיד ובדיקת גרעין יחיד לכרומטין נגיש לטרנספוזאז עם ניתוחי ריצוף בתפוקה גבוהה.

בידוד גרעינים מתאי אב לבביים של עכברים עבור אפיגנום ופרופיל ביטוי גנים ברזולוציה של תא בודד

מחקר זה מציג מודל כירורגי חזירי של איסכמיה כרונית של שריר הלב עקב היצרות מתקדמת של העורקים הכליליים, וכתוצאה מכך תפקוד לב לקוי ללא אוטם. לאחר איסכמיה, בעלי חיים עוברים השתלת מעקף עורקים כליליים מחוץ למשאבה עם מיקום אפיקרדיאלי של מדבקת קולגן עמוסת אקסוזומים שמקורם בתאי גזע. טיפול משלים זה משפר את תפקוד שריר הלב ואת ההתאוששות.

מודל חזירי כירורגי של איסכמיה כרונית של שריר הלב מטופל על ידי מדבקת קולגן עמוסת אקסוזום והשתלת מעקף עורקים כליליים מחוץ למשאבה

למדו פרוטוקול לבידוד גרעינים מרקמת אנדרטרקטומיה כלילית של חולי מעקף עורק כלילי. השיטה מאפשרת פרופיל תעתיקי של פלאקות טרשתיות בדרגת סיכון גבוהה באמצעות snRNA-seq.

בידוד גרעין יחיד מרקמת אנדרטרקטומיה כלילית של חולי מעקף עורק כלילי

גלה סרטונים נוספים