Name: פרוטוקול לפירוק תאים בודדים, ריצוף RNA ובידוד תאי מיואפיתל ופיברובלסטים מבלוטות הלמתי והרוק המזדקנות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-24T13:25:00.000+00:00
Duration: 8 min 37 s
Description: למד פרוטוקול לפירוק תאים בודדים מבלוטות הלמתי מזדקנות בעכברים לצורך ריצוף RNA וזרימה ציטומטרית. השיטה מאפשרת בידוד תאי מיואפיתל ופיברובלסטים עם שמירה על חיוניות גבוהה לניתוח תעתיקי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Guo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+and+aging-related+diseases%3A+from+molecular+mechanisms+to+interventions+and+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Aging and aging-related diseases: from molecular mechanisms to interventions and treatments.</a> Signal Transduct Target Ther. 7 (1), 391(2022).</li>
<li>Zhang, X., Wang, L., Zheng, Y., Deng, L., Huang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+dry+eye+disease+in+the+elderly%3A+A+protocol+of+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+%28Baltimore%29%22%5BJournal%5D)">Prevalence of dry eye disease in the elderly: A protocol of systematic review and meta-analysis.</a> Medicine (Baltimore). 99 (37), e22234(2020).</li>
<li>Donthineni, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aqueous-deficient+dry+eye+disease%3A+Preferred+practice+pattern+guidelines+on+clinical+approach%2C+diagnosis%2C+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Aqueous-deficient dry eye disease: Preferred practice pattern guidelines on clinical approach, diagnosis, and management.</a> Indian J Ophthalmol. 71 (4), 1332-1347 (2023).</li>
<li>Yuksel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+Affects+Lipid+Homeostasis+in+Lacrimal+Glands+by+Upregulating+Lipogenesis+and+Changing+Its+Specificity%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Aging Affects Lipid Homeostasis in Lacrimal Glands by Upregulating Lipogenesis and Changing Its Specificity.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 66 (13), 1(2025).</li>
<li>Galletti, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ectopic+lymphoid+structures+in+the+aged+lacrimal+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Ectopic lymphoid structures in the aged lacrimal glands.</a> Clin Immunol. 248, 109251(2023).</li>
<li>Delcroix, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lacrimal+Gland+Epithelial+Cells+Shape+Immune+Responses+through+the+Modulation+of+Inflammasomes+and+Lipid+Metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Lacrimal Gland Epithelial Cells Shape Immune Responses through the Modulation of Inflammasomes and Lipid Metabolism.</a> Int J Mol Sci. 24 (5), 4309(2023).</li>
<li>Mauduit, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+transcriptomics+of+the+lacrimal+gland+features+macrophage+activity+and+epithelium+metabolism+as+key+alterations+during+chronic+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Spatial transcriptomics of the lacrimal gland features macrophage activity and epithelium metabolism as key alterations during chronic inflammation.</a> Front Immunol. 13, 1011125(2022).</li>
<li>Prasad, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+Independent+and+Combined+Effects+of+Hyperosmolarity+and+Inflammatory+Stress+on+Human+Corneal+Epithelial+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Assessing the Independent and Combined Effects of Hyperosmolarity and Inflammatory Stress on Human Corneal Epithelial Cells.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 66 (13), 47(2025).</li>
<li>Scholand, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterochronic+Parabiosis+Causes+Dacryoadenitis+in+Young+Lacrimal+Glands%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Heterochronic Parabiosis Causes Dacryoadenitis in Young Lacrimal Glands.</a> Int J Mol Sci. 24 (5), 4897(2023).</li>
<li>Molla Desta, G., Birhanu, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advancements+in+single-cell+RNA+sequencing+and+spatial+transcriptomics%3A+transforming+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biochim+Pol%22%5BJournal%5D)">Advancements in single-cell RNA sequencing and spatial transcriptomics: transforming biomedical research.</a> Acta Biochim Pol. 72, 13922(2025).</li>
<li>Jungblut, M., Oeltze, K., Zehnter, I., Hasselmann, D., Bosio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+preparation+of+single-cell+suspensions+from+mouse+lung+tissue+using+the+gentleMACS+Dissociator%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Standardized preparation of single-cell suspensions from mouse lung tissue using the gentleMACS Dissociator.</a> J Vis Exp. (29), e1266(2009).</li>
<li>Jankelow, A., Almeida-Porada, G., Atala, A., Sawyer, S. W., Porada, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advancements+in+tissue+dissociation+techniques+for+cell+manufacturing+single-cell+analysis+and+downstream+processing%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Recent advancements in tissue dissociation techniques for cell manufacturing single-cell analysis and downstream processing.</a> Stem Cells Transl Med. 14 (11), szaf055(2025).</li>
<li>Duong, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Rapid+Human+Lung+Tissue+Dissociation+Protocol+Maximizing+Cell+Yield+and+Minimizing+Cellular+Stress%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">A Rapid Human Lung Tissue Dissociation Protocol Maximizing Cell Yield and Minimizing Cellular Stress.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 71 (5), 509-518 (2024).</li>
<li>Koenitzer, J. R., Wu, H., Atkinson, J. J., Brody, S. L., Humphreys, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-Nucleus+RNA-Sequencing+Profiling+of+Mouse+Lung%3A+Reduced+Dissociation+Bias+and+Improved+Rare+Cell-Type+Detection+Compared+with+Single-Cell+RNA+Sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Single-Nucleus RNA-Sequencing Profiling of Mouse Lung: Reduced Dissociation Bias and Improved Rare Cell-Type Detection Compared with Single-Cell RNA Sequencing.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 63 (6), 739-747 (2020).</li>
<li>Ikeuchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissociation+of+murine+oral+mucosal+tissues+for+single+cell+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Dissociation of murine oral mucosal tissues for single cell applications.</a> J Immunol Methods. 525, 113605(2024).</li>
<li>Denisenko, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+assessment+of+tissue+dissociation+and+storage+biases+in+single-cell+and+single-nucleus+RNA-seq+workflows%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">Systematic assessment of tissue dissociation and storage biases in single-cell and single-nucleus RNA-seq workflows.</a> Genome Biol. 21 (1), 130(2020).</li>
<li>Kahwaji, N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKahwaji%2C+N+%22Universal+Precautions%22">Universal Precautions</a>. , StatPearls Publishing. Treasure Island, FL. (2024).</li>
<li>Delcroix, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+First+Transcriptomic+Atlas+of+the+Adult+Lacrimal+Gland+Reveals+Epithelial+Complexity+and+Identifies+Novel+Progenitor+Cells+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">The First Transcriptomic Atlas of the Adult Lacrimal Gland Reveals Epithelial Complexity and Identifies Novel Progenitor Cells in Mice.</a> Cells. 12 (10), 1435(2023).</li>
<li>Mauduit, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+closer+look+into+the+cellular+and+molecular+biology+of+myoepithelial+cells+across+various+exocrine+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">A closer look into the cellular and molecular biology of myoepithelial cells across various exocrine glands.</a> Ocul Surf. 31, 63-80 (2024).</li>
<li>Zyrianova, T., Basova, L. V., Makarenkova, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+Myoepithelial+Cells+from+Adult+Murine+Lacrimal+and+Submandibular+Glands%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation of Myoepithelial Cells from Adult Murine Lacrimal and Submandibular Glands.</a> J Vis Exp. (148), e59602(2019).</li>
<li>Montanari, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated-Mechanical+Procedure+Compared+to+Gentle+Enzymatic+Tissue+Dissociation+in+Cell+Function+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22Biomolecules%22%5BJournal%5D)">Automated-Mechanical Procedure Compared to Gentle Enzymatic Tissue Dissociation in Cell Function Studies.</a> Biomolecules. 12 (5), 701(2022).</li>
<li>Liang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissociation+of+skeletal+muscle+for+flow+cytometric+characterization+of+immune+cells+in+macaques%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Dissociation of skeletal muscle for flow cytometric characterization of immune cells in macaques.</a> J Immunol Methods. 425, 69-78 (2015).</li>
<li>Adam, M., Potter, A. S., Potter, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychrophilic+proteases+dramatically+reduce+single-cell+RNA-seq+artifacts%3A+a+molecular+atlas+of+kidney+development%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Psychrophilic proteases dramatically reduce single-cell RNA-seq artifacts: a molecular atlas of kidney development.</a> Development. 144 (19), 3625-3632 (2017).</li>
<li>Reichard, A., Asosingh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Best+Practices+for+Preparing+a+Single+Cell+Suspension+from+Solid+Tissues+for+Flow+Cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">Best Practices for Preparing a Single Cell Suspension from Solid Tissues for Flow Cytometry.</a> Cytometry A. 95 (2), 219-226 (2019).</li>
<li>Volovitz, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-aggressive%2C+highly+efficient%2C+enzymatic+method+for+dissociation+of+human+brain-tumors+and+brain-tissues+to+viable+single-cells%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A non-aggressive, highly efficient, enzymatic method for dissociation of human brain-tumors and brain-tissues to viable single-cells.</a> BMC Neurosci. 17 (1), 30(2016).</li>
<li>Lai, T. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+methods+of+detaching+adherent+cells+and+their+effects+on+the+cell+surface+expression+of+Fas+receptor+and+Fas+ligand%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Different methods of detaching adherent cells and their effects on the cell surface expression of Fas receptor and Fas ligand.</a> Sci Rep. 12 (1), 5713(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td><חזק>חומרי</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>BSA&nbsp;</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>A4919</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2 (1&nbsp; פתרון M)</td><td>ביוויז'ן</td><td>B1010-100</td><td></td></tr><tr><td>קולגנאז IV</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>C5138</td><td></td></tr><tr><td>ערכת הסרת תאים מתים</td><td>Miltenyi biotec</td><td>130-090-101</td><td></td></tr><tr><td>ערכת הסרת תאים מתים</td><td>Miltenyi biotec</td><td>130-090-101</td><td></td></tr><tr><td>Dispase II</td><td>רוש</td><td>C756V28</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>DN25-100MG</td><td></td></tr><tr><td>DPBS&nbsp;</td><td>גיבקו, תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי, IgG נמוך במיוחד</td><td>גיבקו</td><td># 16250078</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת המלח המאוזנת של האנק (HBSS)</td><td>קורנינג (תרמו פישר סיינטיפיק)</td><td>21-022-CV</td><td></td></tr><tr><td>HEPES (1&nbsp; פתרון M)</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>H0887</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת איזופלוראן</td><td>קוברטוס</td><td># 11695067772</td><td></td></tr><tr><td>MACS&reg; SmartStrainers (30 ומיקרו; m)</td><td>Miltenyi biotec</td><td>130-098-458</td><td></td></tr><tr><td>MACS&reg; SmartStrainers (70 ומיקרו; m)</td><td>Miltenyi biotec</td><td>130-110-916</td><td></td></tr><tr><td>בינוני/F12 (DMEM/F12)</td><td>מיליפור</td><td>DF-042-B</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2 1M</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>M1028-100ML</td><td></td></tr><tr><td>עמודות MS</td><td>Miltenyi biotec</td><td>130-042-201</td><td></td></tr><tr><td>NaCl (מניית 5M)</td><td>Invitrogen & Trade;</td><td>AM9759</td><td></td></tr><tr><td>טבליות מלח עם בופר פוספט (PBS)</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>P8920-500ML</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת פירוק תאי דם אדומים (10&)</td><td>Miltenyi biotec</td><td>130-094-183</td><td></td></tr><tr><td>StemPro Accutase&nbsp;</td><td>גיבקו, תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>A1110501</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue Solution, 0.4%</td><td>גיבקו, תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>EDTA טהור במיוחד (0.5M, pH 8.0)</td><td>Invitrogen</td><td>15575020</td><td></td></tr><tr><td><חזקים>נוגדנים</חזקים></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CD140a (PDGFRA) נוגדן מונוקלונלי (APA5), APC-eFluor ו-trade; 780, Rat / IgG2a, קאפה</td><td>מדעי הביולוגיה האלקטרוניים</td><td>47-1401-82; RRID:AB_2784706</td><td></td></tr><tr><td>FcBlock (חוסם FC CD16/CD32)</td><td>BD Biosciences&nbsp;</td><td>553141; RRID:AB_394656</td><td></td></tr><tr><td>FxCycle&Trade; סגול כתם</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>F10347</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן מונוקלונלי עכברוש CD326 (EpCAM)-APC (G8.8), עכברוש IgG2a, קאפה</td><td>מדעי הביולוגיה האלקטרוניים</td><td>17-579182; RRID:AB_2716944</td><td></td></tr><tr><td><חזקים>עכברים</חזקים></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Acta2GFP&nbsp; </אם></td><td>מתנה נדיבה מד"ר איבו קלאייזיץ'</td><td>PMID: 18571490</td><td></td></tr><tr><td>PdgfraEGFP&nbsp; - B6.129S4-Pdgfratm11(EGFP)Sor/J</td><td>המעבדה של ג'קסון</td><td>RRID:IMSR_JAX:007669</td><td></td></tr><tr><td><חזק>ציוד</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Invitrogen & Trade; &nbsp; רוזנת ומסחר; 3 מונה תאים אוטומטי</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>A49862; RRID:SCR_026963</td><td></td></tr></tbody></table>

פרוטוקול לפירוק תאים בודדים, ריצוף rna ובידוד תאי מיואפיתל ופיברובלסטים מבלוטות הלמתי והרוק המזדקנות

Protocol for Single-Cell Dissociation, RNA Sequencing, and Isolation of Myoepithelial Cells and Fibroblasts from the Aged Lacrimal and Salivary Glands

פרוטוקול לפירוק תאים בודדים, ריצוף RNA ובידוד תאי מיואפיתל ופיברובלסטים מבלוטות הלמתי והרוק המזדקנות

Aging of the lacrimal gland (LG) is associated with reduced tear secretion and chronic inflammation, contributing to dry eye disease. Age-related LG ...

protocol-for-single-cell-dissociation-rna-sequencing-isolation

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

קשה לזהות נוירונים חושיים ספציפיים לאיברים. מעקב כחול מהיר משמש לזיהוי נוירונים נומינוסים המעצבבים את דרכי הנשימה למיון תאים. נוירונים ממוינים משמשים למיצוי חומצה ריבונוקלאית (RNA) באיכות גבוהה לריצוף. באמצעות פרוטוקול זה, נקבע ביטוי גנים של נוירונים ספציפיים לדרכי הנשימה.

שיטה לכוון ולבודד Airway-innervating עצב סנסורי של עכברים

המטרה של פרוטוקול זה היא להשיג דגימות RNA גבוהה-שלמות של הגרעינים המעית מבודד מבולבל, resected טריים מעיים רקמה אנושית באמצעות לייזר לכידת microdissection (LCM). פרוטוקול זה כולל הכנת קפואה דגימות של רקמות אנושיות מעיים, cryosectioning, ethanolic מכתים, התייבשות, הפונקציה LCM, והפקת RNA.

אופטימיזציה של לכידת לייזר Microdissection עבור בידודו של הגרעינים המעית מרקמות אנושיות מוקפאות

בלוטת lacrimal (LG) יש שני סוגי תאים המבטא α-השריר החלקה אקטין (αSMA): מיואפיתל תאים (mecs) ו קרום הלב. MECs הם של מוצא העורי, נמצא ברקמות הבלוטות רבות, בעוד קרום הלב הם תאים שריר וסקולריים חלקה של מקור אנדועורי. פרוטוקול זה מבודד מנות וכלי קרום.

בידוד של תאים מיואפיתל מתוך למבוגרים מורנה לקטמל בלוטות הלסת

אנו מציגים שיטה לבידוד וטיפוח תאים האפיתל בלוטת הרוק העיקרי של האדם. תאים אלה התערוכה ביטוי גנים דפוסי עקבי עם אותם להיות של מוצא האפיתל הרוק ניתן לגדל כמו כדורי הריר על מטריצות קרום מרתף נגזר אנגלברב-הולם-בתאי הגידול נחיל או כמו monolayers על מנות תרבות מטופלים.

בידוד של תאים אפיתל הרוק מן הרוק בלוטות האדם עבור צמיחה מחוץ לתחום כמו סאליספירות או Monolayers

פרוטוקול זה מתאר מיקרוניתוח לכידת לייזר עבור הבידוד של סחוס ועצם מחלקים קפואים טריים של העובר העכבר. סחוס ועצם יכול להיות דמיינו במהירות על ידי cresyl סגול כתמים ונאסף בדיוק כדי להניב RNA באיכות גבוהה עבור ניתוח transcript.

לכידת לייזר מיקרו חיתוך של העכבר סחוס ועצם עבור ניתוח ביטוי גנים

קבלת אוכלוסייה טהורה של פיברותקיעות חיונית כדי ללמוד את תפקידם בתיקון פצעים פיברוזיס. המתואר כאן היא שיטה מפורטת כדי לבודד את הפיברוכדורים ומיוריסותליות מלבבות העכבר שנפגעו ונפצעו ולאחר מכן אפיון הטוהר והפונקציונליות שלהם על ידי immunofluorescence RTPCR, מיון תאים בסיוע פלואורסצנטית, ו התכווצות ג'ל לקולגן.

בידוד ואפיון של מבוגרים ופיברותקיעות לב ומיופיברופיצוצים

הפרוטוקול הנוכחי מציג שיטה מהירה, יעילה ועדינה לבידוד תאים בודדים המתאימים לניתוח RNA-seq חד-תאי משיניים שיניים חד-תאיות של עכבר, שיניים שיניים לבנות עכבר ושיניים אנושיות הגדלות ללא הרף.

בידוד מהיר של תאים בודדים מעכבר ושיניים אנושיות

מוצגת שיטה למיקרודיסקציה של oviduct העכבר המאפשרת איסוף של מקטעים בודדים תוך שמירה על שלמות RNA. בנוסף, הליך פירוק תאים oviductal לא אנזימטי מתואר. השיטות מתאימות לניתוח גנים וחלבון לאחר מכן של מקטעי oviductal שונים מבחינה תפקודית ותאי oviductal מנותקים.

ניתוח מיקרו-דיסקט וניתוק של אובידוקט מורין: זיהוי מקטע בודד ובידוד תא בודד

מאמר זה מספק פרוטוקול יעיל לדיסקציה ודיסוציאציה של אפיתל הריח של עכברים לצורך ריצוף RNA חד-גרעיני.

דיסקציה ודיסוציאציה מהירה של אפיתל הריח של העכבר למתלים חד-גרעיניים

פרוטוקול זה מפרט את ההפרדה של אפיתל עדשת העין של העכבר ומסת התפזורת של תאי הסיבים, ואחריו בידוד RNA וניתוח qPCR. שיטה זו מאפשרת הפרדת תאי עדשה לניתוח מפורט יותר של הטרנסקריפטום והתהליכים הביולוגיים בתאי אפיתל לעומת תאי סיבים מובחנים.

בידוד RNA מאפיתל עדשת עין של עכבר ומסות בתפזורת של תאי סיבים

למד פרוטוקול לפירוק תאים בודדים מבלוטות הלמתי מזדקנות בעכברים לצורך ריצוף RNA וזרימה ציטומטרית. השיטה מאפשרת בידוד תאי מיואפיתל ופיברובלסטים עם שמירה על חיוניות גבוהה לניתוח תעתיקי.

פרוטוקול לפירוק תאים בודדים, ריצוף RNA ובידוד תאי מיואפיתל ופיברובלסטים מבלוטות הלמתי והרוק המזדקנות

גלה סרטונים נוספים