ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol>
	<li>Hussein, R. S., Bin Dayel, S., Abahussein, O., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influences+on+skin+and+intrinsic+aging:+biological,+environmental,+and+therapeutic+insight.">Influences on skin and intrinsic aging: biological, environmental, and therapeutic insight.</a> J Cosmet Dermatol. 24, e16688 (2025).</li><li>Dorf, N., Maciejczyk, M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+senescence-from+basic+research+to+clinical+practice.">Skin senescence-from basic research to clinical practice.</a> Front Med (Lausanne). 11, 1484345 (2024).</li><li>Grenier, A., Morissette, M. C., Rochette, P. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+combination+of+cigarette+smoke+and+solar+rays+causes+effects+similar+to+skin+aging+in+a+bilayer+skin+model.">The combination of cigarette smoke and solar rays causes effects similar to skin aging in a bilayer skin model.</a> Sci Rep. 13, 17969 (2023).</li><li>Varani, J., Dame, M. K., Rittie, L., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+collagen+production+in+chronologically+aged+skin:+roles+of+age-dependent+alteration+in+fibroblast+function+and+defective+mechanical+stimulation.">Decreased collagen production in chronologically aged skin: roles of age-dependent alteration in fibroblast function and defective mechanical stimulation.</a> Am J Pathol. 168, 1861-1868 (2006).</li><li>Zhang, S., Duan, E. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fighting+against+skin+aging:+the+way+from+bench+to+bedside.">Fighting against skin aging: the way from bench to bedside.</a> Cell Transplant. 27, 729-738 (2018).</li><li>Hussen, N. H. a., Abdulla, S. K., Ali, N. M., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+antioxidants+in+skin+aging+and+the+molecular+mechanism+of+ROS:+a+comprehensive+review.">Role of antioxidants in skin aging and the molecular mechanism of ROS: a comprehensive review.</a> Aspects Mol Med. 5, 100063 (2025).</li><li>Addor, F. A. S. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+photoaging:+additional+factors+involved+in+the+process+of+skin+aging.">Beyond photoaging: additional factors involved in the process of skin aging.</a> Clin Cosmet Investig Dermatol. 11, 437-443 (2018).</li><li>Mucha, M., Skrzydlewska, E., GÄ™gotek, A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+protection+against+oxidative+stress+in+human+skin+melanocytes.">Natural protection against oxidative stress in human skin melanocytes.</a> Commun Biol. 8, 1283 (2025).</li><li>Hughes, B. K., Bishop, C. L. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+understanding+of+the+role+of+senescent+melanocytes+in+skin+ageing.">Current understanding of the role of senescent melanocytes in skin ageing.</a> Biomedicines. 10, 3111 (2022).</li><li>Kami&#324;ski, K., Kazimierczak, U., Kolenda, T. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidative+stress+in+melanogenesis+and+melanoma+development.">Oxidative stress in melanogenesis and melanoma development.</a> Contemp Oncol (Pozn). 26, 1-7 (2022).</li><li>Jim&#233;nez-Cervantes, C., Mart&#237;nez-Esparza, M., P&#233;rez, C., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+melanogenesis+in+response+to+oxidative+stress:+transient+downregulation+of+melanocyte+differentiation+markers+and+possible+involvement+of+microphthalmia+transcription+factor.">Inhibition of melanogenesis in response to oxidative stress: transient downregulation of melanocyte differentiation markers and possible involvement of microphthalmia transcription factor.</a> J Cell Sci. 114, 2335-2344 (2001).</li><li>Da&#324;czak-Pazdrowska, A., Gornowicz-Porowska, J., Pola&#324;ska, A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+senescence+in+skin-related+research:+targeted+signaling+pathways+and+naturally+occurring+therapeutic+agents.">Cellular senescence in skin-related research: targeted signaling pathways and naturally occurring therapeutic agents.</a> Aging Cell. 22, e13845 (2023).</li><li>Green, K. J., Pokorny, J., Jarrell, B. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dangerous+liaisons:+loss+of+keratinocyte+control+over+melanocytes+in+melanomagenesis.">Dangerous liaisons: loss of keratinocyte control over melanocytes in melanomagenesis.</a> Bioessays. 46, e2400135 (2024).</li><li>Ali, L., Al Niaimi, F. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenesis+of+melasma+explained.">Pathogenesis of melasma explained.</a> Int J Dermatol. 64, 1201-1212 (2025).</li><li>Low, E., Alimohammadiha, G., Smith, L. A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+good+is+the+evidence+that+cellular+senescence+causes+skin+ageing.">How good is the evidence that cellular senescence causes skin ageing.</a> Ageing Res Rev. 71, 101456 (2021).</li><li>Chin, T., Lee, X. E., Ng, P. Y., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+cellular+senescence+in+skin+aging+and+age-related+skin+pathologies.">The role of cellular senescence in skin aging and age-related skin pathologies.</a> Front Physiol. 14, 1297637 (2023).</li><li>Gerasymchuk, M., Robinson, G. I., Kovalchuk, O., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+of+the+senescence-associated+phenotype+in+human+skin+fibroblasts.">Modeling of the senescence-associated phenotype in human skin fibroblasts.</a> Int J Mol Sci. 23, 7124 (2022).</li><li>Zimmermann, T., Pommer, M., Kluge, V., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+cellular+senescence+in+human+primary+melanocytes+and+malignant+melanoma+cells+in+vitro.">Detection of cellular senescence in human primary melanocytes and malignant melanoma cells in vitro.</a> Cells. 11, 1489 (2022).</li><li>Tang, J., Li, Q., Cheng, B., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+culture+of+human+face+skin+melanocytes+for+the+study+of+hyperpigmentation.">Primary culture of human face skin melanocytes for the study of hyperpigmentation.</a> Cytotechnology. 66, 891-898 (2014).</li><li>Ku&#269;era, O., Endlicher, R., Rou&#353;ar, T., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+tert-butyl+hydroperoxide-induced+oxidative+stress+on+lean+and+steatotic+rat+hepatocytes+in+vitro.">The effect of tert-butyl hydroperoxide-induced oxidative stress on lean and steatotic rat hepatocytes in vitro.</a> Oxid Med Cell Longev. 2014, 752506 (2014).</li><li>Wedel, S., Martic, I., Hrapovic, N., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=tBHP+treatment+as+a+model+for+cellular+senescence+and+pollution-induced+skin+aging.">tBHP treatment as a model for cellular senescence and pollution-induced skin aging.</a> Mech Ageing Dev. 190, 111318 (2020).</li><li>Rabin, D. M., Rabin, R. L., Blenkinsop, T. A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+oxidative+stress+upregulates+drusen-related+protein+expression+in+adult+human+RPE+stem+cell-derived+RPE+cells:+a+novel+culture+model+for+dry+AMD.">Chronic oxidative stress upregulates drusen-related protein expression in adult human RPE stem cell-derived RPE cells: a novel culture model for dry AMD.</a> Aging (Albany NY). 5, 51-66 (2013).</li><li>Shakel, Z., Costa Lima, S. A., Reis, S. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+to+make+human+skin+models+based+on+cellular+senescence+for+ageing+research.">Strategies to make human skin models based on cellular senescence for ageing research.</a> Ageing Res Rev. 100, 102430 (2024).</li><li>Mort, R. L., Jackson, I. J., Patton, E. E. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+melanocyte+lineage+in+development+and+disease.">The melanocyte lineage in development and disease.</a> Development. 142, 620-632 (2015).</li><li>Goff, P. S., Castle, J. T., Kohli, J. S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation,+culture,+and+transfection+of+melanocytes.">Isolation, culture, and transfection of melanocytes.</a> Curr Protoc. 3, e774 (2023).</li><li>Martic, I., Wedel, S., Jansen-DÃ¼rr, P., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+model+to+investigate+UVB-induced+cellular+senescence+and+pigmentation+in+melanocytes.">A new model to investigate UVB-induced cellular senescence and pigmentation in melanocytes.</a> Mech Ageing Dev. 190, 111322 (2020).</li><li>Victorelli, S., Lagnado, A., Halim, J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Senescent+human+melanocytes+drive+skin+ageing+via+paracrine+telomere+dysfunction.">Senescent human melanocytes drive skin ageing via paracrine telomere dysfunction.</a> EMBO J. 38, e101982 (2019).</li><li>Zhang, H., Davies, K. J. A., Forman, H. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidative+stress+response+and+Nrf2+signaling+in+aging.">Oxidative stress response and Nrf2 signaling in aging.</a> Free Radic Biol Med. 88, 314-336 (2015).</li><li>Birch, J., Gil, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Senescence+and+the+SASP:+many+therapeutic+avenues.">Senescence and the SASP: many therapeutic avenues.</a> Genes Dev. 34, 1565-1576 (2020).</li><li>Kang, H. Y., Ortonne, J. P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+should+be+considered+in+treatment+of+melasma.">What should be considered in treatment of melasma.</a> Ann Dermatol. 22, 373-378 (2010).</li><li>Davalli, P., Mitic, T., Caporali, A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ROS,+cell+senescence,+and+novel+molecular+mechanisms+in+aging+and+age-related+diseases.">ROS, cell senescence, and novel molecular mechanisms in aging and age-related diseases.</a> Oxid Med Cell Longev. 2016, 3565127 (2016).</li><li>Almeida, F. V., Douglass, S. M., Fane, M. E., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bad+company:+microenvironmentally+mediated+resistance+to+targeted+therapy+in+melanoma.">Bad company: microenvironmentally mediated resistance to targeted therapy in melanoma.</a> Pigment Cell Melanoma Res. 32, 237-247 (2019).</li><li>Brenner, M., Hearing, V. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+protective+role+of+melanin+against+UV+damage+in+human+skin.">The protective role of melanin against UV damage in human skin.</a> Photochem Photobiol. 84, 539-549 (2008).</li><li>L&#243;pez-Ot&#237;n, C., Blasco, M. A., Partridge, L., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hallmarks+of+aging.">The hallmarks of aging.</a> Cell. 153, 1194-1217 (2013).</li><li>Videira, I. F., Moura, D. F., Magina, S. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+regulating+melanogenesis.">Mechanisms regulating melanogenesis.</a> An Bras Dermatol. 88, 76-83 (2013).</li><li>Ratz-&#321;yko, A., Arct, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resveratrol+as+an+active+ingredient+for+cosmetic+and+dermatological+applications:+a+review.">Resveratrol as an active ingredient for cosmetic and dermatological applications: a review.</a> J Cosmet Laser Ther. 21, 84-90 (2019).</li><li>Xu, M., Pirtskhalava, T., Farr, J. N., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Senolytics+improve+physical+function+and+increase+lifespan+in+old+age.">Senolytics improve physical function and increase lifespan in old age.</a> Nat Med. 24, 1246-1256 (2018).</li><li>Ogrodnik, M., Evans, S. A., Fielder, E., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-body+senescent+cell+clearance+alleviates+age-related+brain+inflammation+and+cognitive+impairment+in+mice.">Whole-body senescent cell clearance alleviates age-related brain inflammation and cognitive impairment in mice.</a> Aging Cell. 20, e13296 (2021).</li><li>Hernandez-Segura, A., de Jong, T. V., Melov, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unmasking+transcriptional+heterogeneity+in+senescent+cells.">Unmasking transcriptional heterogeneity in senescent cells.</a> Curr Biol. 27, 2652-2660.e4 (2017).</li></ol>

<table><tbody><tr><td>0.22 &micro;מ מסנן ממברנה</td><td>Merck&nbsp;</td><td>SLGVR33RS</td><td></td></tr><tr><td>1 M חומצת לימון&nbsp;</td><td>Merck&nbsp;</td><td>K91567844</td><td>הכן ב-aq. dest.</td></tr><tr><td>1 M MgCl2</td><td>Merck</td><td>A649033</td><td>הכן ב-aq. dest.</td></tr><tr><td>1 M Na2HPO4</td><td>Merck</td><td>K56036736</td><td>הכן ב-aq. dest.</td></tr><tr><td>10 M NaOH</td><td>Lab Honeywell</td><td>30620</td><td>הכן ב-aq. dest.</td></tr><tr><td>37% פורמלדהיד</td><td>Sigma</td><td>252549</td><td></td></tr><tr><td>4% פרפורמלדהיד</td><td>CarlRoth</td><td>0335.3</td><td></td></tr><tr><td>5 M נתרן כלוריד&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>S3014</td><td>הכן ב-aq. dest.</td></tr><tr><td>50% גלוטראלדהיד</td><td>Sigma</td><td>G6403</td><td></td></tr><tr><td>5-Brom-4-Chlor-3-indolyl-&beta;-D-Galactopyranosid (X-Gal)</td><td>Sigma</td><td>B9146</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן משני צמוד Alexa Fluor-2 מג/מ"ל</td><td>Invitrogen</td><td>A11008</td><td></td></tr><tr><td>BSA (אלבומין סרום בקר)</td><td>Sigma</td><td>A7030</td><td></td></tr><tr><td>חומר מצע כימילומינסנטי</td><td>Sigma</td><td>WBKLS0500</td><td></td></tr><tr><td>Costar CellLifter&nbsp;</td><td>Corning</td><td>3008</td><td></td></tr><tr><td>כיסויים לתרבית תאים/מיקרוסקופיה</td><td>Epredia</td><td>CB00200RA120MNZ0</td><td></td></tr><tr><td>DermaLife Basal Medium</td><td>CellSystems</td><td>LM-0004</td><td></td></tr><tr><td>DermaLife M Melanocyte Kit&nbsp;</td><td>CellSystems</td><td>LS-1041</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Phosphate Buffered Saline&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>D8537</td><td></td></tr><tr><td>מלנוציטים ניאו-נטליים אנושיים</td><td>CellSystems</td><td>FC-0023</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן LaminB1 (ארנב)</td><td>Abcam</td><td>AB16048</td><td>דילול 1:1000 ב-5% BSA</td></tr><tr><td>תווך הטבעה המכיל DAPI</td><td>Abcam</td><td>AB104139</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת פניצילין-סטרפטומיצין&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>P4333</td><td></td></tr><tr><td>ג'לים מדורגים של פוליאקרילאמיד</td><td>Bio-Rad</td><td>456-8095</td><td></td></tr><tr><td>Poly-D-Lysine, 0.1 מ"ג/מ"ל&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>A38904-01</td><td></td></tr><tr><td>אשלגן פריציאניד</td><td>Sigma</td><td>P8131</td><td></td></tr><tr><td>אשלגן פרוציאניד</td><td>Sigma</td><td>P-9387</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן pRB (ארנב)</td><td>CellSignalling</td><td>93085</td><td>דילול 1:1000 ב-5% BSA</td></tr><tr><td>קוקטייל מעכבי פרוטאז</td><td>מוכן עצמית</td><td>N/A</td><td>500 מ"מ NaF; 2 &micro;g/ml Aprotinin; 1 מ"מ PMSF; 1 מ"מ פעיל Na-Orthovanadate</td></tr><tr><td>חיץ RIPA&nbsp;</td><td>מוכן עצמית</td><td>N/A</td><td>המכיל: 50 מ"מ Tris-HCl; 1% NP-40; 0.5% Na-deoxycholate; 0.1% SDS; 150 מ"מ NaCl; 2 מ"מ EDTA</td></tr><tr><td>חיץ RLT</td><td>Qiagen</td><td>1015762</td><td>כלול ב-RNeasy Mini Kit&nbsp;</td></tr><tr><td>RNeasy Mini Kit</td><td>Qiagen</td><td>74106</td><td></td></tr><tr><td>אבקת חלב סחוט (ל-5% חלב ב-TBS-T)</td><td>Sigma</td><td>70166</td><td></td></tr><tr><td>נתרן ציטרט (לתמיסת 0.1%)</td><td>Sigma</td><td>S4641</td><td></td></tr><tr><td>מעכב טריפסין סויה, 0.5 מ"ג/מ"ל&nbsp;</td><td>Thermofisher</td><td>17075-029</td><td></td></tr><tr><td>tert-Butyl hydroperoxide (tBHP)</td><td>Sigma</td><td>458139</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100 (לתמיסת 0.3%)</td><td>Sigma</td><td>T9284</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת טריפסין-EDTA</td><td>Sigma</td><td>T3924</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-mercaptoethanol</td><td>CarlRoth</td><td>4227.3</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן &gamma;H2AX (ארנב)</td><td>CellSignalling</td><td>2577S</td><td>דילול 1:200&nbsp;</td></tr></tbody></table>

פרוטוקול סטנדרטי להשראת הזדקנות מוקדמת הנגרמת מלחץ במלנוציטים ראשוניים בבני אדם באמצעות טרט-בוטיל הידרופרוקסיד

A Standardized Protocol for Inducing Stress-Induced Premature Senescence in Primary Human Melanocytes Using Tert-butyl Hydroperoxide

Environmental stressors, including UV radiation, air pollution, or cigarette smoke, drive extrinsic skin aging. Exposure to these extrinsic aging factors ...

המחקר שלנו מתמקד בחקירת הפנוטיפ של הזדקנות (senescence) במלנוציטים ותרומתו להזדקנות חיצונית של העור. מודלים מבוססי הזדקנות מקובלים משתמשים בפיברובלסטים ואינם מצליחים ללכוד את הביולוגיה הספציפית של המלנוציטים. פרוטוקול זה משרה עקה חמצונית המתווכת על ידי tBHP במלנוציטים אנושיים ראשוניים.ראשית, יש להכין את الريאגנטים הדרושים. לאחר הפשרת המלנוציטים ומתן זמן התאוששות של שלושה ימים, ודא שהתאים מגיעים ל-80 עד 90% confluency ביום הזריעה. שאב את המצע מהבקתלה.שטפו את התאים פעמיים עם DPBS. הוסיפו שני מיליליטר של תמיסת trypsin EDTA כדי לנתק את התאים. הניחו את הבקבוק באינקובטור למשך חמש דקות ב-37 °C עם 5% carbon dioxide.הקישו בעדינות על הבקבוק. תחת המיקרוסקופ, בחנו את התאים כדי לוודא שהם התנתקו לחלוטין. הוסיפו נפח של 1.5 פעמים מכמות מעכב ה-trypsin כדי להפסיק את התגובה.העבר את תגית התאים למבחנה קונוית של 15 מיליליטר. דלל את התגית באמצעות DPBS לנפח סופי של 10 מיליליטר. סבב את תגית התאים בצנטריפוגה בכוח צנטריפוגלי יחסי של 100 למשך חמש דקות.שאבו את הנוזל העליון (supernatant) והשעיקו מחדש את משקע התאים במצע לנפח הרצוי. זרעו 600,000 תאים לכל צלחת בקוטר 10 סנטימטר עבור הצלחות המטופלות ב-tert-Butyl hydroperoxide, או tBHP. זרעו 400,000 תאים לכל צלחת עבור צלחות הביקורת.הכינו תמיסת עבודה בריכוז 10 millimolar ממלאי ה-tBHP באמצעות DPBS או מצע גידול. הוסיפו 100 micromolar tBHP לתאים למשך שעה אחת לכל טיפול. הניעו את הפלטה קדימה ואחורה כדי לפזר את ה-tBHP באופן שווה בכל המצע.העבירו את התאים לאינקובטור למשך שעה אחת בדיוק בטמפרטורה של 37 °C עם 5% carbon dioxide. שאבו את המצע כדי להפסיק את הטיפול ב-tBHP. שטפו את הפלטות פעמיים באמצעות DPBS שחומם מראש ל-37 °C.הוסיפו את הנפח המתאים של מצע טרי לצלחות. הכניסו את הצלחות לאינקובטור ואפשרו לתאים להתאושש במשך ארבע שעות לפחות לפני הטיפול הבא. חזרו על הליך הטיפול מאוחר יותר באותו היום עבור הטיפול השני.המשיכו במשטר הטיפול עד היום הרביעי, ולאחר מכן תחזיקו את התאים בתרבית עד היום התשיעי כדי להעריך סממני דעיכה תאית (senescence). ספרו את התאים שטופלו ב-tBHP ואת תאי הבקרה. זרעו אותם מחדש באותה צפיפות התחלתית, או אם התקבלו פחות מ-600,000 תאים מהצלחות שטופלו ב-tBHP, זרעו מחדש את כל התאים שנאספו.ספרו את התאים בימים 4, 9 ו-15 של התרביות. ביום התשיעי, שטפו את התאים פעמיים עם PBS. קבעו את התאים באמצעות 2% formaldehyde ו-0.4% glutaraldehyde.שטפו את התאים המקובעים פעמיים עם PBS. דגרו את התאים המקובעים בתמיסת צביעה ב-pH 6. כסו את הפלטה כדי להגן עליה מהאור, ולאחר מכן דגרו אותם למשך 18 שעות ב-37 degrees Celsius ללא carbon dioxide.שטפו את התאים פעמיים עם PBS. באמצעות מיקרוסקופיה של אור, צלמו וספרו את מספר התאים הצבועים בכחול. חלקו מספר זה במספר התאים הכולל באותו שדה ראייה.הביעו את התוצאות כאחוז התאים החיוביים. בעקבות השראת עקה חמצונית, טיפול ב-tBHP הפחית באופן משמעותי את השגשוג של המלנוציטים בהשוואה לקבוצות הביקורת. התאים המטופלים הגיעו ל-1.4 הכפלות אוכלוסייה מצטברות, או cPDL, עד היום התשעה, בעוד שקבוצות הביקורת הגיעו ל-3.1 cPDL.עד היום ה-15, התאים המטופלים הגיעו לרמימה של 1.9 cPDL, בעוד שתאי הביקורת התרחבו ל-5.1 cPDL. מלנוציטים שטופלו ב-tBHP הראו שטח פנים תאי מוגבר בהשוואה לביקורות בכל נקודות הזמן שנמדדו, כאשר ההגדלה התקדמה עד היום ה-15, באופן העולה בקנה אחד עם המורפולוגיה המוגדלת והשטוחה של תאים מזדקנים (senescent cells). מלנוציטים שטופלו ב-tBHP הראו עלייה בפעילות של בטא-גלקטוזידאז הקשורה להזדקנות, או פעילות SA-beta-galactosidase, עם 32% תאים חיוביים בהשוואה ל-3% בביקורות.העלייה בחיוביות ל-SA-beta-galactosidase תאמה פנוטיפ של הזדקנות. ניתוח אימונופלואורסצנציה הראה רמות מוגברות של gamma-H2AX במלנוציטים שטופלו ב-tBHP בהשוואה לביקרות. התאים שטופלו הראו אות gamma-H2AX חזק יותר מאשר הביקרות.ניתוח polymerase chain reaction כמותי בזמן אמת הדגים ביטוי מוגבר של גורמי פנוטיפ הפרשתי הקשור להזדקנות, כאשר interleukin-8 הראה את העלייה הגבוהה ביותר. בעוד ש-interleukin-6 ו-matrix metalloproteinase-1 הראו עליות מתונות. ניתוח Western blot אישר את השראת ההזדקנות.Lamin B1 הראה הפחתה משמעותית במלנוציטים שטופלו ב-tBHP בהשוואה לקבוצות הביקורת. רמות של חלבון retinoblastoma מפוספורל פחתו במלנוציטים שטופלו ב-tBHP בהשוואה לקבוצות הביקורת. טיפול ב-tBHP הגביר את הביטוי השעתוקי של p16 ו-p21 במלנוציטים.מודל זה מאפשר לחוקרים לבחון כיצד מלנוציטים שעברו סנצנציה (הזדקנות תאית) משפיעים על הפיגמנטציה ומתקשרים עם תאים סביבם באמצעות גורמים דלקתיים של SASP. האתגר בפרוטוקול זה הוא התזמון המדויק. יש להחיל tBHP פעמיים ביום במרווח של ארבע שעות לפחות.בעקבות פרוטוקול זה, ניתן לאפיין סנסינציה (הזדקנות תאית) באמצעות צביעת בטא-גלקטוזידאז הקשורה לסנסינציה, אימונופלורסצנציה, RT-qPCR, ו-Western blotting של סממני סנסינציה מבוססים.

a-standardized-protocol-for-inducing-stress-induced-premature

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

סרטון וידאו זה מתאר שיטה למדידת רגישות לקרינת UV במודל עכבר אנושי – מודל עכבר המחקה עור אנושי. אנו קובעים את המינון המינימלי של קרינת UV (MED) שעלולה לגרום לאריתמה או בצקת על העור. השיטה יכולה לעזור לגלות את היעילות של תרופות המשמשות להפחתת רגישות UV.

בדיקת מינון אריתמטי מינימלי: שיטה למדידת רגישות UV במודלים עכבריים

המלנין עוריות הוא מושרה על ידי יישום מקומי של forskolin במודל עכברי של אדם UV רגיש בהיר עור. מניפולציה תרופתי של רמות cAMP בעור ואפידרמיס המחשיכים מאוד להגן מפני דלקות בתיווך UV (כוויות שמש), כפי שנמדד על ידי מינון erythematous מינימום assay (MED).

אינדוקציה תרופתי של עוריות מלנין והגנה מפני כוויות שמש בדגם מואנש מאוס

עבודה זו מתארת ​​פרוטוקול בידול במבחנה לייצר מלנוציטים פיגמנט, מתאי גזע אנושיים pluripotent באמצעות רכס עצבי ואת melanoblast שלב ביניים באמצעות פרוטוקול מזין ללא, 25 יום.

מזין ללא גזירת &quot;מלנוציטים מתאי גזע פלוריפוטנטיים אנוש

כאן, אנו נדון סדרה של פרוטוקולים עבור אינדוקציה ואימות של הזדקנות ביולוגית התאית בתאים בתרבית. אנחנו מתמקדים גירויים שונים בתדר הזדקנות ביולוגית. ומתארות כימות של סמנים משותפים הקשורים הזדקנות ביולוגית. אנו מספקים פרטים טכניים באמצעות fibroblasts כמודל, אך ניתן להתאים את הפרוטוקולים השונים דגמי הסלולר.

אינדוקציה ואימות של הזדקנות ביולוגית הסלולר העיקרי בתאי אדם

הפרוצדורה הבאה מתארת שיטה לשליטה מרחבית וטמפורלית של ייזום גידול מלנוציטוטי בעור מוראני, באמצעות דגם עכבר מהונדס גנטית. פרוטוקול זה מתאר מאקרוסקופי כמו גם חניכה מיקרוסקופיים עורית מלנומה.

שליטה מרחבית וטמפורלית של מלנומה מורין ייזום מוטציה תאי גזע מלנוציט

מטרת פרוטוקול זה היא לגרום לייצור חולף in vivo של רמות לא קטלניות של מיני חמצן תגובתי (ROS) בעור העכבר, ולקדם עוד יותר תגובות פיזיולוגיות ברקמה.

גירוי נישות תאי גזע והתחדשות רקמות בעור עכבר על ידי פוטוגנרציה תלוית פרוטופורפירין IX ניתנת להחלפה של מיני חמצן תגובתי באתרם

נייר זה מדווח כי התוספת של Y-27632 כדי בינונית הגוף יכול להגדיל באופן משמעותי את התשואה של מלנוציטים מרקמות העור למבוגרים.

Y-27632 מעשיר את התשואה של מלנוציטים אנושיים מרקמות עור למבוגרים

אנו מציגים פרוטוקול לפיתוח ושימוש במודל סטרס חמצוני על ידי טיפול בתאי אפיתל פיגמנט רשתית עם H2O2, ניתוח מורפולוגיה של תאים, כדאיות, צפיפות, גלוטתיון, ורמת UCP-2. זהו מודל שימושי לחקור את ההשפעה נוגדת החמצון של חלבונים המופרשים על ידי תאים transposon-transfected לטיפול ניוון neuroretinal.

אינדוקציה וניתוח של עקה חמצונית ב היפהפייה הנרדמת טרנספוסון-transposon-transfected תאי אפיתל פיגמנט רשתית אנושית

כאן, אנו מתארים מערכת תכנות מחדש ישירה ממוטבת עבור מלנוציטים ומערכת אריזה מרוכזת של וירוסים ביעילות גבוהה המבטיחה תכנות מחדש ישיר חלק.

תכנות מחדש ישיר של פיברובלסטים של עכברים למלנוציטים

שיטה זו חוקרת כיצד פיברובלסטים של עור מזדקנים משפיעים על הבריאים. הזדקנות מושרה מחשיפה ל-UVB, והמדיום המותאם מיושם על פיברובלסטים רגילים. היא מסייעת להעריך תרכובות ביואקטיביות המיועדות לשינוי בתקשורת תא לתא בהזדקנות העור.

שילוב חדש של נוגדי חמצון לשיקום תקשורת בין-תאית בריאה במודל חוץ גופי באמצעות מדיום מותנה מתאים זקנים

Universität Innsbruck.  פרוטוקול סטנדרטי להשראת הזדקנות מוקדמת ב-HNM באמצעות tBHP, פרוטוקולים סטנדרטיים לניתוח סמנים מרכזיים של הזדקנות, כולל עצירת גדילה, פעילות SA-β-גלקטוזידאז וגורמי SASP.

פרוטוקול סטנדרטי להשראת הזדקנות מוקדמת הנגרמת מלחץ במלנוציטים ראשוניים בבני אדם באמצעות טרט-בוטיל הידרופרוקסיד

גלה סרטונים נוספים