Name: הרכיבים העיקריים של מיקרוסקופ אור (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-07-30T18:18:00.000+00:00
Duration: 8 min 8 s
Description: למדו את הרכיבים העיקריים של מיקרוסקופ אור לחקר ביולוגיית תאים. הסרטון מסביר את פונקציות העדשות, הבמה ומקור האור לקבלת תמונות איכותיות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

פרוטוקול טקסט מלא לגישה זו ניסיוני זמין <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0401/current/abstract ">הפרוטוקולים נוכחי בביולוגיה של התא</a> .

למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.

הרכיבים העיקריים של מיקרוסקופ אור

Major Components of the Light Microscope

מיקרוסקופ אור הוא כלי בסיסי ביולוג של התא, שהיה צריך הבנה מעמיקה של איך זה עובד, איך זה צריך להיות מתואם עבור יישומים שונים, ואיך זה צריך להישמר כפי שנדרש כדי להשיג קיבולת מקסימלית להרכיב תמונה ורזולוציה. הרכיבים של המיקרוסקופ מתוארים בפירוט כאן.

מיקרוסקופ האור הוא כלי בסיסי עבור הביולוג של התא, אשר צריך להחזיק בהבנה מעמיקה של אופן פעולתו, וכיצד יש לכייל אותו עבור...

מיקרוסקופים של אור הם כלים חיוניים במחקר ביו-רפואי. הרכיבים האופטיים מאפשרים רזולוציית תמונה גבוהה בהרבה מאשר צפייה בעין בלתי מזוינת. על ידי שילוב של מיקרוסקופיה עם עיבוד תמונה דיגיטלי, חוקרים יכולים לשפר את נראות התמונה ולבצע מדידות כמותיות מדויקות.סרטון זה ידריך אתכם באמצעות רכיביו העיקריים של המיקרוסקופ ותפקודיהם. שלום, אני ויקטוריה סנון פרוליק מהמרכז למשקוף אופטי (Core Optical Imaging Facility) במרכז המדעי לבריאות של אוניברסיטת טקסס בסן אנטוניו. היום אראה לכם את הרכיבים המרכזיים של מיקרוסקופ האור שלכם ואת תפקודיהם הבסיסיים.בואו נצא לסיור במכשירי המיקרוסקופ שלכם. לפני השימוש במיקרוסקופ, מומלץ להכיר את רכיביו ואת תפקודיהם. זהו מיקרוסקופ אור דחוס הפוך מדגם Nikon eclipse TI, המצויד הן לתאורה חולפת והן למיקרוסקופיה פלואורסצנטית אפיפוסקופית (epi fluorescent microscopy).הכיוון לאורך ציר המיקרוסקופ יכונה ציר Z, והכיוונים המאונכים לו יכונו צירי X ו-Y. ראשית, נבחן את צינור העדשה, את ראש המיקרוסקופ המכיל את העדשות האובייקטיביות ואת השולחן. אלו הם רכיבי עיצוב התמונה העיקריים של המיקרוסקופ.החלקים הללו מהווים את הממשק בין הצופה לבין המיקרוסקופ. על ידי אחיזה בבסיס צינורות העינית הבינוקולרית, ניתן להתאים את המרחק בין האישונים על ידי הזזתם קרוב יותר או רחוק יותר זה מזה. פעולה זו מאפשרת צפייה נוחה עם שתי העיניים.במקביל, ניתן כעת לכוון את מיקוד העין עבור כל עין באופן עצמאי. הגדלת העין רשומה על גבי גליל העין. מצלמות מותקנות באופן שגרתי על מיקרוסקופים לצורך רכישת תמונות.מיקרוסקופ זה משתמש במתאם C mount לחיבור מצלמת CCD ליציאה הצדדית של גוף המיקרוסקופ. סיבוב של כפתור במיקרוסקופ ממקם פריזמה המכוונת את קרני האור היוצרות את הדמות הרחק מהעדשות לעין ובاتججاه המצלמה, המותקנת ביציאת המצלמה. העדשות השונות, הקובעות את מרבית ההגדלה והרזולוציה, מורכבות על ראש סיבובי (nose piece).כל עדשה אובייקטיבית מסומנת במפרטים כגון ההגדלה, הממספר האפרטורה, תוצר השקיעה הנדרש כגון שמן, גליצרין או אוויר, עובי זכוכית הכיסוי, ומאפיינים מיוחדים אחרים כגון מצב התאורה, האור העוזב את העין או את הראש המסתובב כשהוא לא ממוקד או מוקרן לאינסוף. צינור הגוף מכיל עדשת מיקוד חיובית המביאה את האור המדמה למיקוד עבור העין או המצלמה. כעת, לאחר שהצגתי בפניכם את הרכיבים המגבישים את התמונה של המיקרוסקופ, נסקור את הרכיבים שיסייעו לנו למקד את התמונה ולבצע כיוונונים באור המועבר.בשלב הבא נבחן את במת הדגימות, שהיא הנשא המכני המחזיק את שקופית הדגימה. באמצעות סיבוב הכפתורים, ניתן להתאים את מיקום הדגימות בצירים x ו-y. בתצורת מיקרוסקופ מהפוך, הבמה מקובעת והמיקוד של הדגימה מבוצע על ידי הזזת העדשות למעלה ולמטה לאורך ציר Z באמצעות כפתורי מיקוד גס ועדין בגוף המיקרוסקופ.כעת נבחן את רכיבי התאורה התחתונה (transillumination) של מיקרוסקופ האור, המספקים את האור הדרוש להדמיית הדגימות. ראשית, יש לנו את הנורה ומארזה, המספקים את האור להארת הדגימה. במיקרוסקופיה של אור, הנורה היא בדרך כלל נורת הלוגן במתח נמוך עם חוט להט מטנגסטן, שניתן לכווננה כדי לשלוט בעוצמת האור. ניתן להציב תריס (shutter) לאחר מקור האור כדי לשלוט במשך ההארה.מיד לאחר מקור האור נמצאת התאמת דיאפרגמת השדה; דיאפרגמת השדה שולטת בשטח או בשדה של הדגימה שיוארו.接לשם נמצא הרכיב המכונה קונדנסור (מעבה), שתפקידו העיקרי הוא למקד תאורה בהירה ואחידה על הדגימה. הקונדנסור או דיאפרגמת האיריס הממוקמת בתחתית הקונדנסור שולטים בזווית של קונו התאורה של הקונדנסור על הדגימה.כיוון של דיאפרגמה זו שולט בגודל ובמפתח המספרי של קהל האור המופנה לעבר הדגימה, מה שמוביל לתאורה, ניגודיות ועומק שדה נכונים; כיוון אופטי של דיאפרגמת המעבה מאפשר מילוי תקין של אלמנט העדשה הקדמי של העדשה האובייקטיבית. באופן אידיאלי, יש לבצע כיוון זה עבור כל עדשה אובייקטיבית כדי לממש את מלוא הפוטנציאל של העדשה. עבור תאורה פלואורסצנטית אפיגנלית (epi fluorescent), מקור האור הוא בדרך כלל נורת קשת של xenon או כספית.במיקרוסקופ שלנו יש מקור אור המבוסס על נורת קשת עם כספית, ויש לטיפל בה בזהירות כיוון שהיא עלולה להתפוצץ אם לא מטפלים בה נכון. הקפידו להשתמש בכפפות בעת התקנת הנורה, מכיוון שסימני טביעות אצבע ולכלוך עלולים ליצור נקודות חום ולגרום לסדקים בנורה. מומלץ מאוד שלא להפעיל נורת קשת למשך זמן העולה על מספר השעות שנקבע לה במפרט.נתיב האור הפלואורסצנטי כולל דיאפרגמת שדה ודיאפרגמת צמצם, בדומה לנתיב האור במצב תמסורת. מעבר לדיאפרגמות אלו, האור יעבור דרך סט של מסננים הבוחרים את רוחב פס האור ומכוונים את ההארה אל העדשה כדי להגיע לדגימה. בנתיב הארה מסוג epi, העדשה משמשת הן כקונדנסור והן כעדשה.הצגנו בפניכם את הרכיבים העיקריים של מיקרוסקופ האור שלכם. התחלתי בהצגת הרכיבים היוצרים את התמונה במיקרוסקופ, דהיינו העדשות של העין, העדשה האובייקטיבית ומצלמת ה-CCD. לאחר מכן סקרנו את תפעול השולחן, כפתורי כיוון הפוקוס והקונדנסור.זהו זה. תודה שצפיתם ובהצלחה עם המיקרוסקופיה שלכם.

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

כאן אנו מציגים מדריך מעשי של בניית מערכת משולבת מיקרוסקופ, אשר ממזג הדמיה epi-פלורסנט קונבנציונלי הדמיה המבוססת על זיהוי סופר-ברזולוציה מולקולה בודדת, גילוי מולקולה בודדת צבע רב, כולל מולקולה בודדת פלורסצנטיות תהודה העברת האנרגיה הדמיה, לתוך הגדרת אחד באופן יעיל.

ניצוח מספר מצבי הדמיה עם מיקרוסקופ זריחה אחת

הוראה מפורטת מתואר כיצד לבנות מאוד נוטה נסחף מיקרוסקופ אריח (HIST) ואת השימוש עבור הדמיה מולקולה בודדת.

מדריך לבניית מאוד נוטה נסחף מיקרוסקופ אריח עבור הדמיה מולקולה בודדת שדה-of-view מורחבת

פרוטוקול זה מתאר בפירוט כיצד לבנות מיקרוסקופ פלואורסצנטי בעל מטרה אחת ויריעות אור ואת השימוש בו להדמיית רשתות שלד.

תכנון ובנייה של מיקרוסקופ פלואורסצנטי הניתן להתאמה אישית, חד-אובייקטיבי, עבור הדמיה של רשתות שלד ציטו-שלד

שמירה על מיקרוסקופ אופטיקה נקייה חשוב הדמיה באיכות גבוהה. אבק, טביעות אצבעות, שמן טבילה עודף, או הרכבה בינונית או על מיקרוסקופ גורמת לירידה בניגוד ורזולוציה. DIC היא רגישה במיוחד לזיהום ושריטות על משטחי העדשה. פרוטוקול זה מפרט את הליך שמירה המיקרוסקופ נקי.

טיפול ניקוי נאות של המיקרוסקופ

ישנם מכשולים טכניים למדידת שטף זרם דרך תעלות יונים בו זמנית, ועל הבחנה מאוחר יותר מה החלק הנוכחי הטרנסממברני בשל כל סוג ערוץ. כדי לענות על צורך זה, שיטה זו מציגה את הדרך ליצור את עקומת IV של סוגי ערוצים בודדים באמצעות רכיבי תדר ספציפי.

סיכום של Curve ערוץ IV יון באמצעות רכיבי תדר

מטרת מאמר זה היא להדגים שיטה לייעל את זיהוי immunofluorescent של קולטן אסטרוגן α (ERα) על פרוסות עכברוש pial עורקים באמצעות מיקרוסקופ דיגיטלי immunofluorescent.

הדמיה של קולטן אסטרוגן α ב Arterioles Pial עכברוש באמצעות מיקרוסקופ דיגיטלי Immunofluorescent

השיטה במהירות המארחות נדיפים מסך צמחים ידי מדידת התגובה של אלקטרו orangeworm הטבור מבוגר...

המבדק Electroantennographic ככלי מיון עבור נדיפים צמחים מארח

רזולוצית רנטגן טומוגרפיה ממוחשבת גבוהה (HRCT) היא טכניקת הדמיה לאבחון לא הרסנית שניתן להשתמש בו כדי ללמוד את המבנה והתפקוד של מערכת כלי דם צמח ב-3D. אנחנו מדגימים איך HRCT מאפשר חקר של רשתות העצה על פני מגוון רחב של רקמות צמח ומינים.

שימוש ברזולוציה גבוהה טומוגרפיה ממוחשבת כדי להמחיש את המבנה התל ממדים ופונקציה של הצמח vasculature

פרוטוקול זה מתאר את ההתקנה של מיקרוסקופ גיליון אור ויישומה לin vivo הדמיה של ג elegans עוברים.

הגדרת מיקרוסקופ גיליון אור פשוט עבור<em&gt; בטוטו</em&gt; הדמיה של<em&gt; ג elegans</em&gt; פיתוח

5 חלבוני ניאון קומבינטורית סימון של תאי גזע ואבות היווצרות הדם מאפשר במעקב משובט vivo באמצעות confocal ושני פוטונים במיקרוסקופ, מתן תובנות ארכיטקטורת hematopoietic מח העצם במהלך רגנרציה. שיטה זו מאפשרת מיפוי גורל לא פולשנית של תאים נגזרים HSPCs ספקטרלי מקודדים ברקמות שלמות לתקופות נרחבות של זמן לאחר השתלה.

במשובט מעקב vivo של גזע hematopoietic ובתאים המסומנים על ידי חמישה חלבונים ניאון באמצעות Confocal וmultiphoton מיקרוסקופית

למדו את הרכיבים העיקריים של מיקרוסקופ אור לחקר ביולוגיית תאים. הסרטון מסביר את פונקציות העדשות, הבמה ומקור האור לקבלת תמונות איכותיות.

הרכיבים העיקריים של מיקרוסקופ אור

גלה סרטונים נוספים