DNA complementare

- [Narratore] Quasi tutte le cellule del corpo

hanno lo stesso DNA, ma diversi tipi

di cellule, come neuroni e cellule muscolari,

esprimono geni diversi perché solo determinati geni

sono trascritti in RNA messaggero, o mRNA, in ogni cellula.

In laboratorio gli mRNA sono utilizzati come modello

per sintetizzare l'DNA gratuito, cDNA,

per studiare l'espressione genica.

Un metodo comune è quello di estrarre l'RNA dalle cellule,

quindi isolare l'mRNA da altri tipi di RNA,

come l'RNA ribosomiale o l'RNA transfer,

eseguendo il campione su una colonna di perle

con tratti di nucleotidi di timina attaccati.

Questi si legano alla coda Poly (A),

una catena di nucleotidi adenina specificamente presente

sui tre estremi dell'mRNA eucariotico.

Gli altri tipi di RNA non si legano e vengono lavati via.

Dopo che l'mRNA è stato isolato, un primer Poly (T)

è legato alla coda Poly (A), fornendo un punto di partenza

per gli enzimi della trascrittasi inversa

per trascrivere un singolo filamento in cDNA dall'mRNA.

Vengono aggiunti prodotti chimici come gli enzimi RNasi

per degradare l'RNA.

Vengono quindi utilizzati enzimi DNA polimerasi

sintetizzare un filo complementare al cDNA,

risultante in cDNA a doppio filamento,

che può essere inserito in un vettore batterico o virale

e utilizzato nella ricerca di biologia molecolare.