Saggio immunoassorbente legato a un enzima

Il test di immunoassorbimento enzimatico o ELISA è un test immunologico marcato con ampie applicazioni nella rilevazione e quantificazione di analiti come anticorpi, peptidi, glicoproteine, ormoni e virus.

Gli anticorpi di rilevazione che si legano all'antigene o alla molecola bersaglio sono coniugati con enzimi specifici che, dopo l'aggiunta del substrato, producono segnali misurabili.

A seconda dei metodi di acquisizione e rilevamento, esistono quattro tipi principali di ELISA.

L'ELISA diretto utilizza un anticorpo primario coniugato con un enzima per rilevare l'antigene del campione rivestito sulla piastra.

Mentre per l'ELISA indiretto, l'antigene attaccato cattura l'anticorpo primario del campione, a cui si lega l'anticorpo secondario coniugato.

L'ELISA a sandwich coinvolge due anticorpi, uno rivestito sulla piastra per catturare l'antigene del campione, mentre l'altro anticorpo coniugato con un enzima si lega all'antigene-epitopo specifico che forma il sandwich.

Nell'ELISA competitivo, l'antigene e l'anticorpo primario vengono pre-incubati e aggiunti alla piastra rivestita con lo stesso antigene.

Maggiore è la concentrazione dell'antigene del campione, maggiore è il numero di complessi antigene-anticorpo, lasciando meno anticorpi liberi che si legano all'antigene concorrente dalla piastra, generando quindi segnali più deboli.