Microscopia a contrasto di fase e contrasto di interferenza differenziale

Le cellule viventi non colorate sono trasparenti e difficili da vedere al microscopio ottico. I microscopi a contrasto di fase e a contrasto di interferenza differenziale o DIC consentono la loro visualizzazione creando immagini a risoluzione più elevata e con contrasto più nitido.

Quando un campione viene illuminato a contrasto di fase, una parte della luce viene diffratta dai componenti della cella, mentre il resto passa direttamente. L'entità della diffrazione dipende dagli indici di rifrazione dei componenti cellulari.

Poiché la diffratta e la luce diretta interferiscono, parti del campione appaiono luminose se le onde sono in fase e scure se sono fuori fase. In questo modo si creano immagini ad alto contrasto di grandi organelli e sottili sezioni di tessuto.

Cambiamenti bruschi negli indici di rifrazione producono un alone attorno all'immagine.

Tali artefatti sono assenti nel DIC, che utilizza una sorgente di luce polarizzata per modulare le onde luminose che passano attraverso il campione.

Il contrasto dell'immagine dipende dalla velocità di variazione degli indici di rifrazione nel campione. I cambiamenti più intensi generano immagini ad alto contrasto con un apparente effetto tridimensionale.

La DIC aiuta a visualizzare campioni spessi come fette di cervello, uova o embrioni.