Fissazione e sezionamento

La maggior parte dei campioni di tessuto biologico sono spessi e opachi e devono essere elaborati prima di essere osservati al microscopio.

I tessuti vengono prima trattati utilizzando una soluzione fissante che uccide le cellule e immobilizza i componenti cellulari per mantenere la loro struttura.

I campioni fissati vengono fatti passare attraverso un gradiente crescente di alcol, che disidrata il campione.

Per evitare che i fragili campioni vengano danneggiati, vengono incorporati in un materiale idrorepellente come la cera di paraffina e tagliati in sezioni sottili con un microtomo.

Le sezioni sottili vengono trasferite su vetrini, dove vengono aggiunte alcune gocce di solventi organici per rimuovere la cera aderente.

Successivamente, le sezioni vengono macchiate e viene aggiunto un supporto di montaggio, con un vetrino coprioggetti sulla parte superiore. Il supporto di montaggio deve avere lo stesso indice di rifrazione del vetrino coprioggetti e del vetrino per ottenere la migliore risoluzione dell'immagine.

Il campione è ora pronto per la visualizzazione al microscopio.