33.10
La microscopia a fluorescenza convenzionale può risolvere solo strutture più distanti di 200 nm. Questo perché al microscopio, la diffrazione della luce fa apparire le molecole fluorescenti come macchie sfocate invece che come punte acuminate. Di conseguenza, quando gli oggetti sono molto vicini l'uno all'altro, le loro immagini si sovrappongono.
Pertanto, gli scienziati hanno sviluppato tecniche di super-risoluzione che forniscono una migliore risoluzione per l'immagine anche di piccole strutture subcellulari. Queste tecniche superano i limiti di diffrazione utilizzando specifici modelli di luce per eccitare i fluorofori nel campione.
Ad esempio, la microscopia a illuminazione strutturata utilizza un modello a strisce che viene poi ruotato per acquisire più immagini. Le immagini vengono combinate, creando un modello di interferenza che viene elaborato computazionalmente per creare l'immagine finale.
La microscopia a deplezione di emissione stimolata crea un modello utilizzando due laser. Un laser primario eccita il campione mentre un raggio a forma di ciambella sopprime la fluorescenza attorno ad esso, facendo apparire il punto fluorescente più piccolo.
Altre tecniche evitano la s
La microscopia a fluorescenza a super risoluzione (SRFM) fornisce una risoluzione migliore rispetto alla microscopia a fluorescenza convenzionale ridu…
Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Tutti i diritti riservati.