Questo volume video di documenti di grandi dimensioni (≥ 20 L) filtrazione di biomassa microbica, compresa tra 0.22μm e 2.7μm di diametro, dalla colonna d'acqua.
È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Articolo metodologico
Volume di grandi dimensioni (20L +) Filtrazione di campioni d'acqua di mare costiero
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il flusso di lavoro inizia con la raccolta delle acque marine costiere per la comunità microbica a valle, le analisi dei nutrienti e dei gas traccia. Per questo metodo, i campioni sono stati raccolti dal ponte della HMS operativo John Strickland a Inlet Saanich. Questo volume video di documenti di grandi dimensioni (≥ 20 L) filtrazione di biomassa microbica, compresa tra 0.22μm e 2.7μm di diametro, dalla colonna d'acqua. Due campioni 20L può essere filtrato contemporaneamente utilizzando una sola unità pompa dotata di quattro teste rotanti. La filtrazione è fatto nel settore lunghi viaggi, o immediatamente dopo il ritorno per gite di un giorno. E 'importante registrare la quantità di acqua che passa attraverso ogni unità sterivex filtro. Per prevenire la formazione di biofilm tra i viaggi di campionamento, tutte le apparecchiature di filtrazione devono essere lavate con acido cloridrico diluito e acqua deionizzata e sterilizzati in autoclave immediatamente dopo l'uso. Questa procedura richiederà circa 5 ore più un ora in più per la pulizia.
Protocollo
- Messa a punto di apparecchiature di filtrazione
- Per impostare l'apparato di filtrazione, utilizzare una pinzetta per posizionare un grado GF / D filtro in unità abitativa prefiltro. Liberamente stringere la custodia a mano. Come regola generale, non stringere troppo o l'unità perdite una volta che la parte di pompaggio.
- Sostituire il tappo di damigiana con il tappo in autoclave e il tubo attaccato con attenzione inserito il tubo interno in damigiana senza toccarla. Se necessario, utilizzare una pinzetta per guidare il tubo nel damigiana.
- Far passare il tubo esterno attraverso la pompa peristaltica.
- Coll....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Discussione
E 'indispensabile per pulire panche e pompe con un panno umido dopo l'uso per rimuovere ogni traccia persistente di acqua salata che altrimenti corrodere attrezzature. Anche se la procedura è semplice, il requisito di tempo può essere esteso a seconda della concentrazione di biomassa o detriti nel campione essere filtrato.
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da dichiarare.
Ringraziamenti
Vorremmo ringraziare la Fondazione canadese per l'innovazione, la British Columbia Fondo di conoscenza per lo sviluppo e la Nazionale di Scienze e Ingegneria Research Council (NSERC) del Canada per sostenere gli studi in corso sulle regioni di scarsità di ossigeno delle acque costiere oceaniche e aperto. DAW è stata sostenuta da borse di studio da NSERC, Killam e la fondazione TULA Centro finanziato per la diversità microbica e Evolution.
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti | |
|---|---|---|---|---|
| Pompa peristaltica | Masterflex (Cole Palmer) | 77913-20, 77200-62, 77200-04 | ||
| Tubazione Tygon LFL | Masterflex (Cole Palmer) | 06429-24 | Per l'apparato di filtrazione | |
| Pinze per tubi | Cole-Parmer | 0683204 | Per l'apparato di filtrazione | |
| Adattatori per tubi da 1/4” x 3/16” | Cole-Parmer | 31702-20 | Per l'apparato di filtrazione | |
| Contenitore per prefiltro in polipropilene | ADVANTEC | 501200 | Per l'apparato di filtrazione | |
| Connettore metallico luer (da estremità tubo a luer maschio con bloccaggio) | Cole-Parmer | 31507-27 | Per l'apparato di filtrazione | |
| Magneti da 2“ | Per l'apparato di filtrazione | |||
| Tappi per caraffe a 3 vie | Per l'apparato di filtrazione | |||
| Filtri GV 0.22 μm STERIVIX | EMD Millipore | SVGV01R5 | ||
| Filtri GF/D da 47 mm di diametro, 2,7 μm | Whatman, GE Healthcare | 1823047 | ||
| Tampone di lisi | Reagente | 0,75 M saccarosio, 40 mM EDTA, 50 mM Tris (pH 8,3) | ||
| HCl 0,1 % | Reagente | Per risciacquo post-filtrazione | ||
| Acqua autoclavata | Reagente | Per risciacquo post-filtrazione |
Ristampe e permessi
