Emoagglutinazione è una forma di agglutinazione in cui gli anticorpi si legano ai globuli rossi. Globuli rossi sono sempre disponibili ed i risultati sono facilmente osservabili ad occhio nudi. Questo video dimostra i passi coinvolti in un test di emoagglutinazione, interpretando i risultati e la determinazione del titolo.
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Articolo metodologico
Determinazione della reattività e Titolo di siero usando un test dell'emoagglutinazione
In questo articolo
Sommario
Abstract
Emoagglutinazione è una forma specifica di agglutinazione ed è utilizzato quando gli anticorpi si legano ai globuli rossi, che agiscono come un antigene particolato. I globuli rossi sono bersagli particolarmente utili in quanto sono facilmente disponibili e agglutinazione è osservabile ad occhio nudo. Questa tecnica viene comunemente utilizzata per determinare la concentrazione di un anticorpo (Ab), per gruppo sanguigno e la quantificazione virale. In questo video, le fasi coinvolte nella preparazione e nella esecuzione di un test di emoagglutinazione è dimostrata utilizzando anticorpi specifici per gruppo sanguigno A-antigeni aggiunto ai globuli rossi (Revercells). L'antisiero è diluito in una serie ben 96 U-basso vassoio microtitre, a cui si aggiunge una sospensione di Revercells. I campioni sono miscelati e poi incubate a 37 ° C per 60 minuti. Trascorso questo tempo, i campioni possono quindi essere facilmente segnato per ve, ve + e intermedi reazioni emoagglutinazione (-/+). Questo approccio permette la reattività e titolo di un campione di siero deve essere valutato con una tecnica rapida e semplice. Il video coprirà la teoria alla base del test, come i risultati vengono letti e interpretati, come determinare il titolo, come il dosaggio può essere modificato ed eventuali problemi associati con l'uso di questa tecnica.
Protocollo
Preparazione di 5x Veronal Buffered Saline (VBS)
- Per preparare il veronal Buffered Saline (VBS), tre soluzioni separate devono essere preparati.
- 1 Preparare la soluzione sciogliendo 21.25gm di NaCl e 0.94gm Barbitone di sodio in 350 ml di acqua distillata. Le concentrazioni finali dei Barbitone NaCl e sodio sono 1,02 e 13 mm rispettivamente.
- Preparare la soluzione 2 sciogliendo 1.44gm di Barbitone in 125ml di acqua distillata calda. La concentrazione finale di Barbitone è 62,5 mm.
- 3 Preparare la soluzione sciogliendo 20.33gm di MgCl 2 e 4.41gm di CaCl 2 in 100 ml di acqua distillata. La concentrazione fin....
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Discussione
Il saggio di emoagglutinazione è una tecnica molto semplice che permette un gran numero di campioni di siero da valutare in un breve lasso di tempo. Ha anche il vantaggio di essere letto senza la necessità di attrezzature specializzate, con l'occhio idoneo. Questa tecnica può anche essere modificato per il rilevamento di ormone umano della gonadotropina corionica presenti nelle urine, come parte di una prova di inibizione dell'emoagglutinazione. In relazione ad un test di emoagglutinazione standard, ci sono alcu.......
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Ringraziamenti
L'autore desidera ringraziare la signorina Lora Matthews per eseguire la tecnica e il signor Paolo Pastore per la cinematografia. Questo progetto è stato finanziato dalla University of South Australia, il programma di Medicina di Laboratorio.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Revercells | CSL | 02490201 | Usare al 1% finale |
| Siero anti-A | CSL | 02611305 | |
| Piastra a 96 pozzetti con fondo rotondo | TRP | 92097 | Deve essere con fondo rotondo |
| Soluzione salina veronale tampone | Usare a 1x finale | ||
| Stanza/incubatrice a 37°C | |||
| Guanti monouso |
Ristampe e permessi
