Protocollo sulla durata della vita per Drosophila melanogaster: generazione di curve di sopravvivenza per identificare le differenze nella longevità della mosca

Abstract

Fonte: Bovier, T. F., et al. Metodi per testare l'interferenza endocrina in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).

Gli scienziati utilizzano il protocollo della durata della vita della Drosophila per misurare come le diverse condizioni sperimentali influenzano la longevità delle mosche e generare curve di sopravvivenza nel processo per quantificare i risultati sperimentali. Il protocollo del campione prevede l'applicazione del test per studiare gli effetti sulla longevità derivanti dall'esposizione a concentrazioni variabili di sostanze chimiche interferenti endocrini, o EDC, come il 17-α-etinilestradiolo (EE2).

Protocollo

Questo protocollo è un estratto da Bovier et al., Metodi per testare l'interferenza endocrina in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Preparazione del cibo

1. Per il mantenimento delle scorte e per la crescita delle larve, utilizzare un terreno di farina di mais contenente il 3% di lievito in polvere, il 10% di saccarosio, il 9% di farina di mais precotta, lo 0,4% di agar, da allora in poi chiamato terreno di farina di mais (CM).
   1. Mettere 30 g di lievito in 100 ml di acqua di rubinetto, portare a ebollizione e lasciare bollire per 15 min.
   2. A parte, mescolare bene 90 g di f....

Risultati

Figura 1: Curve di durata della vita. A sinistra è riportata una tabella rappresentativa in cui è stato registrato il numero di mosche morte ogni 3 giorni, sia per il gruppo di trattamento (medium + EDC [0.05 mM EE2]) che per il gruppo di controllo (medium + solvente), durante l'intero periodo sperimentale. La durata media della vita di ciascun gruppo è stata calcolata utilizzando la SOMMA DELLE MATRICI. PRODOTTO.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
17α-etinilestradiolo	sigma	E4876-1G
Agar per Drosophila media	BIOSIGMA	789148
Mais	CA' BIANCA
Fiale di Drosophila	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Fiale di Drosophila	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Fiale di Drosophila	Kaltek	187	22 mm x 63 mm
etanolo	FLUKA	Codice: 2860
Bottiglia di vetro			Flaconi da 250 ml
Fiale di vetro	Microtecnologia	ST 10024	Tubo a fondo piatto 100 x 24
Lievito Instant Success	ESKA		Lievito in polvere
Metil4-idrossibenzoato	sigma	H5501
Stereomicroscopio con luci a LED	Leica		S4E
saccarosio	HIMEDIA	MB025
Frullatore a immersione Pimmy	Ariete		robot da cucina