Test di alimentazione: Valutazione delle preferenze alimentari in Drosophila melanogaster

Abstract

Fonte: Bovier, T. F., et al. Metodi per testare l'interferenza endocrina in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).

Questo video descrive un test di alimentazione per moscerini della frutta in cui il cibo colorato viene utilizzato per monitorare l'alimentazione e l'effetto che i composti aggiunti possono avere sull'attività di alimentazione. Il protocollo di esempio verifica gli effetti di diverse sostanze chimiche che alterano il sistema endocrino (EDC).

Protocollo

Questo protocollo è un estratto da Bovier et al., Metodi per testare l'interferenza endocrina in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Saggio di alimentazione

NOTA: Questo test è consigliato per verificare se la presenza dell'EDC selezionato nel terreno potrebbe influenzare l'alimentazione delle mosche.

1. Mettere 15 giovani mosche in fiale contenenti terreno di farina di mais (CM) integrato con diverse concentrazioni dell'EDC selezionato e un alimento colorante. Lasciare che le mosche si nutrano del terreno per 1 giorno.
   NOTA: Ad esempio, utilizzare il colorante rosso n. 40 (1 mg/mL).
2. Mettere 15 giovani mosche in fiale contenenti CM integrate con il solo solvente e un colorante alimentare per il controllo. Lascia che le mosche si nutrano del terreno per 1 giorno.
3. Anestetizzare individualmente ogni gruppo di mosche con l'etere.
   1. Trasferisci le mosche di ciascun gruppo in un contenitore cilindrico di vetro (eterizzatore) con un imbuto inserito nell'estremità aperta, capovolgendo la fiala sull'imbuto e picchiettando delicatamente i due contenitori insieme per far cadere le mosche nell'eterizzatore><. NOTA: L'imbuto impedirà loro di uscire dall'eterizzatore.
   2. Abbatti le mosche picchiettando delicatamente l'eterizzatore su una superficie morbida, come un tappetino per il mouse, e sostituisci rapidamente l'imbuto con un tappo di cotone e garza imbevuto di etere.
   3. Attendi circa 1 minuto fino a quando le mosche cadono sul fondo e smettono di muoversi.
      NOTA: Non superare il tempo o le mosche moriranno.
4. Mettere le mosche immobilizzate sotto uno stereomicroscopio e confrontare la colorazione addominale di ciascun gruppo di trattamento rispetto al gruppo di controllo.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
17α-etinilestradiolo	sigma	E4876-1G
Agar per Drosophila media	BIOSIGMA	789148
Bisfenolo A	sigma	Codice 239658-50G
Bisfenolo AF	sigma	90477-100MG
Mais	CA' BIANCA
Etere etilico	sigma
Fiale di Drosophila	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Fiale di Drosophila	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Fiale di Drosophila	Kaltek	187	22 mm x 63 mm
etanolo	FLUKA	Codice: 2860
Eterizzatore	Artigianato		contenitore cilindrico in vetro con tappo in cotone
Frullatore a immersione Pimmy	Ariete		robot da cucina
Lievito Instant Success	ESKA		Lievito in polvere
Colorante rosso n. 40	sigma	Codice: 16035
Stereomicroscopio con luci a LED	Leica		S4E