Essiccazione chimica: preparazione di campioni biologici per microscopia elettronica a scansione (SEM)

Abstract

Fonte: Koon, M. A., et al. Preparazione di organismi procarioti ed eucariotici utilizzando l'essiccazione chimica per l'analisi morfologica in microscopia elettronica a scansione (SEM). J. Vis. Exp. (2019).

La microscopia elettronica a scansione (SEM) è un potente strumento per visualizzare, principalmente, le caratteristiche superficiali di un campione biologico. Una corretta preparazione del campione, tuttavia, è fondamentale per ottenere immagini di qualità. Questo video si concentra sulle fasi di disidratazione e asciugatura della preparazione della Drosophila adulta intatta per il SEM.

Protocollo

Questo protocollo è un estratto da Koon et al., Preparazione di organismi procariotici ed eucariotici utilizzando l'essiccazione chimica per l'analisi morfologica in microscopia elettronica a scansione (SEM), J. Vis.(2019).

1. Preparazione e fissazione

1. Preparare la Drosophila melanogaster (moscerino della frutta).
   1. Anestetizzare i moscerini adulti utilizzando il 100% di anidride carbonica. Mettere gli adulti anestetizzati (circa 10-30 mosche) in una piccola fiala di plastica con tappo a vite o in una provetta da centrifuga da 1,5 ml.
   2. Immergere le mosche anestetizzate in 1 mL di fi....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Adesivo conduttivo argento 503	Scienze della microscopia elettronica	Codice: 12686-15
piatto di pesata in alluminio	Fisher Scientifico	08-732-100
Tronchetti di montaggio in alluminio (12 mm)	Scienze della microscopia elettronica	Codice: 75210
Tronchetti di montaggio in alluminio (25 mm)	Scienze della microscopia elettronica	Codice: 75186
Linguette adesive	Scienze della microscopia elettronica	Codice: 76760
linguette adesive in carbonio conduttivo	Scienze della microscopia elettronica	Codice: 77825
Polietilenglicole terz-ottilfeniletere (Triton X-100)	VWR	97062-208
Hitachi 3400N-II SEM	Hitachi	https://www.hitachi-hightech.com/us/product_list/	L'azienda non sembra più vendere questo modello