drosofila Dissezione cerebrale adulta: un metodo nella neurobiologia delle mosche

Abstract

Fonte: Kelly, S. M., et al. Dissezione e colorazione immunofluorescente del corpo del fungo e dei neuroni fotorecettori nel cervello adulto di Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2017).

Questo video descrive come sezionare e isolare il cervello adulto di Drosophila, una procedura necessaria per visualizzare l'organo, che altrimenti è oscurato dalla cuticola, dall'occhio e dal tessuto tracheale. Il protocollo di esempio mostra una dimostrazione dettagliata che produce preparati di alta qualità che possono essere utilizzati per l'immunocolorazione e i metodi di imaging nella neurobiologia della Drosophila.

Protocollo

Questo protocollo è un estratto da Kelly et al., Dissezione e colorazione immunofluorescente del corpo del fungo e dei neuroni fotorecettori nei cervelli adulti di Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017).

1. Preparazione della stazione di dissezione

1. Posizionare lo stereomicroscopio e la sorgente luminosa con i colli d'oca in fibra ottica attaccati su un ampio piano di lavoro. Per favorire movimenti costanti della mano e ridurre il "tremore" della mano durante la dissezione, è essenziale che sia disponibile un adeguato spazio per il poggiamani e le braccia intorno al microscopio. Assicurarsi che ci....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Pinze/pinzette per microdissezione	Ted Pella	505 NM
Piatti Sylgard	Strumentazione Living Systems	DD-50-S-BLK	Disponibile da amazon.com
Tampone fosfato Na monobasico	sigma	Episodio 3139
Tritone X 100	sigma	X100-100ml
Stereomicroscopio	Leica S6D con sorgente luminosa a LED KL300
Piatto a 9 pozzetti (piastra spot)	VWR	Codice 89090-482
Piatto da 35 mm	Genesee Scientifico	32-103
Sylgard	pescatore	50-366-794
Kimwipe	pescatore	06-666
Buffer PTN			0,1 M di NaFosfato, pH 7,2, 0,1% Triton-X-100, in genere costituiscono 0,5 L di tampone NaPhosphate 0,1 M e aliquote 50 ml alla volta secondo necessità