Saggio con sonda termica locale: un metodo per valutare la nocicezione delle alte temperature nelle larve di Drosophila

Abstract

Fonte: Chattopadhyay, A., et al. Metodi locali e globali per valutare la nocicezione termica nelle larve di Drosophila. J. Vis. Exp. (2012).

Le larve di Drosophila hanno neuroni sensoriali dedicati, nocicettori, la cui risposta a stimoli termici potenzialmente dannosi innesca comportamenti avversivi, o cosiddetti "nocifensivi", nell'animale. Questo video descrive un metodo per valutare la nocicezione termica registrando il comportamento larvale in risposta all'applicazione locale di una sonda termica sulla cuticola. Questo metodo è quindi chiamato saggio della sonda di calore locale.

Protocollo

Questo protocollo è un estratto da Chattopadhyay et al., Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2012).

1. Saggio della sonda termica locale

Forniamo uno stimolo termico nocivo a un singolo segmento di corpo larvale utilizzando una sonda termica costruita su misura prodotta da Pro-Dev Engineering (vedi Tabella dei materiali). Sebbene questa sonda abbia caratteristiche di progettazione ottimali (una piccola punta metallica di ~ 0,07 mm² area e la capacità di mantenere con precisione una temperatura di set point da 23 °C a 65 ....

Risultati

Figura 1: Impostazione sperimentale per il saggio con sonda di calore locale. La sonda termica è controllata da una centralina termica che serve per impostare e mantenere la temperatura della sonda. La sonda viene tenuta perpendicolarmente all'asse anteroposteriore e utilizzata per stimolare la larva con un angolo di 45° rispetto all'orizzontale. Il contatto con la sonda avviene in modo specifico sul segmento addominale .......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Sonda termica	Ingegneria Pro-Dev	Costruito su misura su richiesta	Le informazioni di contatto possono essere fornite su richiesta
Fotocamera a colori Leica DFC290 12v/400mA	Leica Microsystems	12730080	Qualsiasi fotocamera equivalente andrà bene.
Microscopio Leica MZ6	Leica Microsystems	Il codice articolo del corpo dello zoom MZ6 (supporto ottico) è 10445614
Unità modulante Schott Ace	Schott AG	Codice: A20500
Schott Dual Gooseneck 23 pollici Guida luminosa in fibra ottica	Schott AG	Schott A08575
Unità di controllo termico	TSCI corp.	Costruito su misura	I dettagli possono essere forniti su richiesta
Microscopio Zeiss Stemi 2000	Carl Zeiss, Inc.	NT55-605	Qualsiasi microscopio equivalente andrà bene.
forcipe	Strumenti per la scienza	FS-1670
pennello	Materiali artistici Blick	Codice 06762-1002
35 x 10 mm Piastra di Petri in polistirene	Falco BD	351008	Non abbiamo testato piatti alternativi.
Pezzo di vinile	Deposito uffici	480009