Saggio del gradiente di temperatura: un metodo per testare la preferenza di temperatura nelle larve di Drosophila

Abstract

Source: Liu, J., et al. Un saggio del gradiente di temperatura per determinare le preferenze termiche delle larve di Drosophila. J. Vis. Exp. (2018).

I moscerini della frutta Drosophila possono distinguere piccoli cambiamenti di temperatura e quindi selezionare ambienti con condizioni termiche favorevoli. Questo video descrive un test comportamentale che verifica la preferenza di temperatura delle larve di Drosophila su un gradiente termico lineare.

Protocol

Questo protocollo è un estratto da Liu et al. Un saggio del gradiente di temperatura per determinare le preferenze termiche delle larve di Drosophila, J. Vis. Exp. (2018).

1. Configurazione del gradiente di temperatura

1. Preparare il gradiente unidirezionale
   1. Per creare un ambiente umido durante i saggi, posizionare i due blocchi di alluminio collegati a due bagni d'acqua su tovaglioli di carta bagnati, separati da 10 cm (Figura 1A).
   2. Accendere i due bagni d'acqua ~2 ore prima di iniziare il test per consentire un tempo sufficiente affin....

Results

Figura 1: Configurazioni di saggi a gradiente singolo e bidirezionale. (A) Configurazione a gradiente unidirezionale con due piastre di analisi in alluminio su due blocchi di alluminio. Le temperature dei blocchi di alluminio sono controllate dalla circolazione dell'acqua proveniente da due bagni d'acqua. (B) La disposizione dei tre blocchi di alluminio, dei bagni d'acqua e di una piastr.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Apparecchio per saggi in gradiente
PolyScience 9106, Bagno di circolazione refrigerato/riscaldato da 6 litri	Thomas Scientific	Codice: 9106	Questo modello è fuori produzione. I modelli sostitutivi aggiornati includono: 1186R00 e 1197U04 per 120 V, 60 Hz, o 1184L08 e 1197U04 per 240 V, 50 Hz.
Piastra di analisi in alluminio (per gradiente unidirezionale)			Dimensioni esterne: 14 x 10,1 x 0,9 cm, dimensioni interne: 12,9 x 8,7 x 0,8 cm, anodizzato nero.
Piastra in alluminio (per pendenza bidirezionale)			25 x 22 x 0,2 cm, anodizzato nero.
Blocco in alluminio			Dimensioni esterne: 25,5 x 5 x 1,4 cm, i parametri dei canali interni sono mostrati nella Figura 1D.
Connettore per blocchi e tubi in alluminio	McMaster-Carr	Codice 91355K82
Tygon Tubi in silicone sanitario	Tygon	Codice: 57296	1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" parete
nome	società	Numero di catalogo	Commenti
Articoli e reagenti per il dosaggio
pestello	Stati Uniti d'America Scientific	Codice: 17361	Pestello per provette da microcentrifuga da 1,5 mL
termometro	colpo di fortuna	51II
termocoppia	colpo di fortuna	Tipo K
Coperchio universale per micropiastre	Corning	Codice 6980A77
Piatto da 35 mm	Corning	9380D40
Nastro di etichettatura (per gradiente bidirezionale)	Fisher Scientifico	15-951	Nastro per etichettatura Fisherbrand 2 pollici x 14 yds
agarosio	Invitrogen	16500500	Preparare una soluzione all'1%
saccarosio	sigma	S0389-5KG	Preparare la soluzione al 18% subito prima di iniziare il test
Pennello	Fisher Scientifico	Codice: 11860
Provette da centrifuga da 50 mL	Denville	C1062-P
Scoopula	Fisher Scientifico	14-357Q
Flacone rotondo a bocca larga da 500 mL	pirex	Codice: 1395-500
Filtro cellulare (poro 300 mm)	PluriSelect	43-50300	Articolo opzionale per il lavaggio delle larve
Scatola di cartone (vaschetta per fiale)	Genesee Scientifico	FS32-124