drosofila Optogenetica: un metodo per manipolare i circuiti neuronali

In questo articolo

Abstract

Fonte: de Vries, S. E., Clandinin, T. Stimolazione optogenetica del comportamento di fuga in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2013).

L'optogenetica consente l'uso della luce per manipolare neuroni geneticamente modificati per esprimere opsine specifiche, proteine sensibili alla luce la cui attivazione della luce innesca un cambiamento nello stato del neurone. Qui descriviamo un approccio optogenetico in Drosophila utilizzando l'opsina Channelrhodopsin2. Il protocollo di esempio presenta un set di test di optogenetica per studiare i circuiti neuronali dietro il comportamento di fuga della mosca.

Protocollo

Questo protocollo è un estratto da de Vries e Clandinin, Stimolazione optogenetica del comportamento di fuga in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp.(2013).

1. Genera mosche Channelrhodopsin

Cross UAS-ChR2 vola con il driver Gal4 di tua scelta, usiamo G105-Gal4, che è espresso nei neuroni Foma-1 nel lobo ottico.
Per eliminare la possibilità di una risposta visiva alla stimolazione della luce blu, entrambe le linee di mosca sono in uno sfondo w⁺norpA.
Risultato finale: w⁺norpA; G105-Gal4/UAS-CHR2 +
Dopo che le mosche adulte si sono avvicinate, somministrare all....

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Risultati

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Figura 1: Configurazione sperimentale che mostra la piattaforma con il supporto verticale e i quattro bracci del tubo del refrigerante che sostengono i dissipatori di calore con array di LED fissati su di essi. (A) L'impostazione in condizioni di illuminazione ambientale. (B) La configurazione quando i LED sono accesi. (C) Una vista ravvicinata di un LED Tri-Star sul dis.......