Articolo metodologico

Saggio di assuefazione al tocco: un metodo per studiare l'apprendimento non associativo in C. elegans

30 aprile 2023

In questo articolo

Abstract

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Fonte: Mersha, M. D., et al. Conseguenze comportamentali e riproduttive a lungo termine dell'esposizione embrionale a sostanze tossiche a basse dosi. J. Vis. Exp. (2018).

Questo video introduce il test di assuefazione al tatto, un metodo comportamentale di C. elegans per valutare la meccanosensazione e quantificare il tempo di assuefazione.

Protocollo

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Il seguente protocollo è un estratto da Mersha et al. Conseguenze comportamentali e riproduttive a lungo termine dell'esposizione embrionale a sostanze tossiche a basse dosi, J. Vis. Exp. (2018)

  1. Saggio di assuefazione al tatto anteriore
    1. Trasferire circa 10 giovani vermi adulti sincronizzati in nuove piastre NGM non seminate utilizzando un plettro di platino da 30 G sterilizzato a fuoco. Lasciare i vermi indisturbati per 5 minuti per dare loro il tempo di acclimatarsi alla nuova piastra.
    2. Per la risposta all'assuefazione, usa un pelo per sopracciglia attaccato all'estremità di uno spiedino di legno o di uno stuzzicadenti e sterilizza immergendolo in etanolo al 70%. Pulire con un fazzoletto pulito e privo di lanugine e attendere 1 minuto affinché l'etanolo evapori. Toccare delicatamente il verme sulla testa (anteriormente al bulbo faringeo) usando i peli delle sopracciglia. Ripeti i tocchi, lasciando 10 secondi tra i tocchi per consentire al verme di riprendersi.
    3. Continuare a toccare (lasciando intervalli di interstimolo di 10 s) fino a quando il verme non si muove più all'indietro. A questo punto, il verme si è abituato allo stimolo. Registra il numero + ber di tocchi necessari affinché il verme si abitui.
    4. Analizzare la differenza tra i tassi medi di assuefazione dei controlli trattati e non trattati utilizzando l'ANOVA unidirezionale seguita dal test post hoc di Tukey.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
EtOHSigma-Aldrich64-17-5
N2 (C. elegans di tipo selvatico) vermiCGCArchivio presso l'Università del Minnesota
Plettro in platinoGenesee Scientifico59-AWP
Piastre di Petripescatore07-202-011
Microscopio per dissezioneAmScopeSM-2TYY

Ristampe e permessi

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