Caenorhabditis elegans (verme)

In questo video, mostriamo un metodo per produrre una popolazione sincronizzata con lo sviluppo di C. elegans adulti sterili. Il protocollo di esempio sincronizza i vermi per studiare i tassi di consumo di ossigeno negli animali vivi.

Questo video descrive una tecnica per selezionare rapidamente un singolo nematode alla ricerca di un marcatore genetico mediante screening PCR. Nel protocollo di esempio, esaminiamo l'editing del genoma basato su CRISPR.

Questo video descrive un metodo tradizionale, basato su piastre, per misurare la durata della vita di C. elegans. Il protocollo di esempio misura la durata della vita dei vermi trattati con RNAi.

C. elegans comportamento di deposizione delle uova può fornire informazioni importanti negli studi sullo sviluppo, la riproduzione e l'anatomia. Questo video introduce le fasi importanti di un test di deposizione delle uova e mostra un esperimento campione in cui un farmaco viene testato per la tossicità riproduttiva.

Questo video descrive la microiniezione, un metodo comune per creare ceppi transgenici di C. elegans. Nell'esempio, vedremo la microiniezione utilizzata per introdurre un complesso di ribonucleoproteina (RNP) per l'editing genetico su basi CRISPR.

Questo video descrive il freeze-cracking, un metodo per rendere i tessuti di C. elegans accessibili per la colorazione degli anticorpi distruggendo la cuticola.

Durante l'imaging dal vivo di C. elegans, è possibile utilizzare un tampone di agarosio per tenere fermo il nematode senza danneggiarlo o seccarlo. Questo video descrive come preparare un semplice tampone di montaggio per la microscopia.

Questo video introduce i concetti alla base dell'imaging del calcio e include un protocollo di esempio per l'imaging time-lapse di vermi contenuti in pozzetti di agarosio modellati.

Qui, introduciamo un test per misurare SWIP, un fenotipo comportamentale di C. elegans che si verifica durante un movimento vigoroso come il nuoto. Il protocollo di esempio discute sia gli approcci di analisi manuali che quelli automatizzati.

Questo video introduce il test di assuefazione al tatto, un metodo comportamentale di C. elegans per valutare la meccanosensazione e quantificare il tempo di assuefazione.

Questo video introduce la chemiotassi nel nematode C. elegans e mostra un campione di protocollo che verifica l'avversione chemiotattica al solfato di rame.

I ricercatori possono innescare un movimento su richiesta in C. elegans applicando un campo elettrico che i vermi percepiscono e a cui rispondono. Questo video introduce il comportamento elettrotattico e mostra un protocollo campione che viene eseguito in un dispositivo microfluidico.

Questo video descrive l'uso di video e software di tracciamento per registrare il movimento dei vermi in un'arena. Il protocollo di esempio misura l'effetto dell'esposizione all'etanolo sulla locomozione dei vermi.

Questo video descrive un metodo per sezionare le gonadi da ermafroditi adulti di C. elegans, ottenendo tessuti adatti per l'immunocolorazione e l'imaging fluorescente.

Questo video presenta un test di sopravvivenza a breve termine che verifica la tossicità acuta di un trattamento o la resistenza di un ceppo genetico a una condizione tossica. Il protocollo di esempio mostra un esempio di test di sopravvivenza in cui i vermi vengono testati per la loro capacità di resistere allo stress ossidativo indotto dal paraquat (PQ).

C. elegans ha due tipi di muscoli, sarcomero singolo e sarcomero multiplo, o muscoli striati. Questo video descrive la disposizione dei muscoli striati della parete corporea, che sono responsabili della locomozione di un verme e include un protocollo di campionamento per misurare la morfologia muscolare utilizzando un software di analisi delle immagini.

Questo video introduce un metodo di ferita laser, che viene utilizzato per causare lesioni molto precise nell'epidermide del verme. Il protocollo di esempio proviene da uno studio sulla risposta e la riparazione delle ferite.

Questo video introduce un metodo per visualizzare e misurare l'integrità del lume intestinale di C. elegans alimentando vermi con destrano marcato FITC. Il protocollo di esempio mostra il test eseguito con vermi trattati con 3,3'-diindolilmetano (DIM) e alimentati con agenti patogeni.

Questo video descrive un protocollo per colorare i lipidi in vermi interi e fissi utilizzando il colorante Nile Red. Per visualizzare in modo specifico i lipidi neutri nel nucleo delle goccioline lipidiche, visualizza gli spettri di emissione verde del C. elegans colorato.

Questo video descrive un metodo per dissociare vermi interi in una sospensione a singola cellula adatta per FACS o immunoprecipitazione di cellule intatte.

Qui, descriviamo una tecnica utilizzata per visualizzare il DNA genomico in nematodi fissi e intatti. Il video include un protocollo di esempio per contare la cromatina negli ovociti di C. elegans non fecondati.

Questo video presenta un metodo per isolare i blastomeri di C. elegans dai primi embrioni. Le cellule risultanti sono adatte per colture cellulari o esperimenti ex vivo.

Questo video introduce un metodo per isolare e coltivare sterili cellule embrionali di C. elegans in vitro.

Questo video descrive i principi alla base del trattamento con RNAi in C. elegans e dimostra un protocollo per abbattere il lin-35 in un ceppo di verme transgenico.

RNAi è un potente strumento genetico a disposizione dei ricercatori di C. elegans. Questo video presenta un metodo per trattare più vermi con RNAi rispetto all'alimentazione su piastra utilizzando condizioni di coltura liquida.

I nematodi possono essere propagati facilmente in laboratorio, in parte perché gli ermafroditi possono riprodursi per autofecondazione. Tuttavia, gli incroci genetici e altri esperimenti possono richiedere un gran numero di maschi. Questo video descrive un metodo per arricchire i maschi di C. elegans.

La microiniezione di transgeni di solito produce ceppi di C. elegans con grandi array extracromosomici, che determinano un'espressione e una trasmissione variabili del transgene. L'irradiazione UV può indurre l'integrazione cromosomica dell'array e una trasmissione più stabile del transgene.