C. elegans Saggio della chemiotassi: un metodo per testare la chemiosensazione nei vermi

Abstract

Fonte: Campbell, J. C., et al. A Caenorhabditis elegans Saggio di avversione al rame basato sullo stato nutrizionale. J. Vis. Exp. (2017).

Questo video introduce la chemiotassi nel nematode C. elegans e mostra un campione di protocollo che verifica l'avversione chemiotattica al solfato di rame.

Protocollo

Il seguente protocollo è un estratto da Campbell et al, A Caenorhabditis elegans Nutritional-Status Based Copper Aversion Assay, J. Vis. Exp. (2017).

1. Preparazione di organismi sperimentali
   1. Prelevare 10 nematodi stadi L4 per ceppo 24 ore prima di iniziare il test per assicurarsi che gli organismi siano giovani adulti quando vengono testati. Per ogni nematode mutante o di controllo testato, scegliere 10 L4 (10 per il controllo e 10 per il test).
      1. Mantenere gli organismi L4 utilizzando metodi standard per 24 ore su piastre di agar standard seminate con OP50 Escherichia coli. S....

Risultati

Figura 1: Una rappresentazione visiva dei segni per indicare il posizionamento della soluzione di rame sul lato inferiore di una piastra di Petri di 5 cm. Queste indicazioni vengono utilizzate per garantire che le sezioni della piastra siano state misurate in modo appropriato e fungono da linea guida per il trasferimento del cerotto batterico e quindi della soluzione di rame sulla superficie dell'agar.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
M9 Soluzione [3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g NaCl, 1 ml 1 M MgSO4, H2O a 1 litro. Autoclave per sterilizzare prima dell'uso.]			Prodotto in laboratorio
Solfato rameico	sigma	C-1297	Utilizzare l'acqua per sospendere in modo appropriato a una concentrazione di 0,5 M