Imaging del calcio: un metodo per visualizzare l'attività neurale in C. elegans vivo

Abstract

Fonte: Turek, M. et al. Agarose Microchambers per l'imaging del calcio a lungo termine di Caenorhabditis elegans.J. Vis. Exp.(2015).

Questo video introduce i concetti alla base dell'imaging del calcio e include un protocollo di esempio per l'imaging time-lapse di vermi contenuti in pozzetti di agarosio modellati.

Protocollo

Questo protocollo è un estratto da Turek et al, Agarose Microchambers for Long-term Calcium Imaging of Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2015).

1. Imaging del calcio

1. Utilizzare ceppi transgenici che esprimono sensori di calcio geneticamente codificati come HBR16 (goeIs5[pnmr-1::SL1-GCaMP3.35-SL2::unc-54-3'UTR, unc-119(+)]).
2. Utilizzare un microscopio composto attrezzato per l'epifluorescenza ad ampio campo. Collegare l'uscita TTL della telecamera EMCCD....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo Nome Azienda Numero di catalogo Commenti Sistema LED CoolLED pE-2 Microscopio composto Nikon legare Telecamera EMCCD Andor iXon 897 ora venduto come iXon Ultra 897 Z-stage per il microscopio priore Nano Scansione Z X-Y tavolino per il microscopio priore Proscan III Filtro luce rossa Chroma ET660/50m 35 mm Piastra di Petri Falcone Piastre di Petri monouso Falcon, sterili, Corning