Conoscenza dei meccanismi molecolari alla base di trasduzione gustativa ha recentemente goduto di significativi passi avanti, soprattutto grazie all'utilizzo di modelli animali. Tuttavia, la grande diversità di sensibilità e specificità tra gusto garantisce mammiferi studi nel tessuto umano. Descriviamo una tecnica di biopsia per raccogliere cellule gustative viventi dalle papille sulla lingua umana.
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Articolo metodologico
Tecnica per raccogliere fungiformi (Gusto) Papille da lingua umana
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il senso del gusto è fondamentale per la vita umana. Si informa il corpo circa la qualità del cibo che sarà potenzialmente ingerito e stimola i processi metabolici che preparano il canale alimentare per la digestione. Costanti progressi si stanno compiendo verso la comprensione degli eventi biochimici e molecolari primi sottostante trasduzione del gusto (per una rassegna, Breslin e Spector, 2008 1). Tuttavia, i progressi fino ad oggi è in gran parte il risultato di modelli animali. Tuttavia, dal momento che marcate differenze nella specificità del recettore e la densità dei recettori variano da specie a specie, trasduzione gusto umano essere compresa solo utilizzando tessuti umani gusto. Qui si descrive una tecnica di biopsia per raccogliere umano papille fungiformi, visibili come strutture rosa anteriori arrotondati, di circa 0,5 mm di diametro che contengono le papille gustative. Queste papille biopsie sono utilizzati per scopi diversi tra cui l'isolamento delle cellule vitali papille gustative, ibridazione in situ, immunoistochimica e, attraverso tecniche di biologia molecolare, l'identificazione del gusto proteine specifiche del romanzo.
Protocollo
1. Introduzione e considerazioni generali
La procedura generale prevede l'anestesia locale di un piccolo (1 cm 2) area della superficie dorsale della lingua anteriore, seguita da rimozione di un numero (6-8) di fungiformi (gusto) papille da quella zona anestetizzati con una curva primavera micro -forbici (McPherson-Vännäs tipo # SR 5603, Roboz, Rockville, MD). Il rimosso papille fungiformi sono circa 0,25 mm 3 ciascuna. C'è molto poco non papille (gusto) tessuto epiteliale rimosso con ogni papilla. Nuovo modulo papille in questo settore dopo 3 a 5 settimane e riprendere il funzionamento papille gustative (Spielman e Br....
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Discussione
Un notevole vantaggio di utilizzare cellule umane è la loro specificità. La procedura descritta in dettaglio fornisce tessuto lingua per l'isolamento delle cellule gustative recettore dagli esseri umani. Queste cellule gustative possono essere utilizzati per studi molecolari, cercando di scoprire molecole importanti per la trasduzione di informazioni gusto, e per studi di imaging del calcio che monitorano l'attività delle cellule gusto agli stimoli. Inoltre, il tessuto lingua forniti da questa procedura possono .......
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Dichiarazioni
Nessun conflitto di interessi dichiarati.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto da NIH R21 DC03969-01 (a JGB). Ringraziamo il Dr. Fritz Lischka per l'acquisizione di singole cellule papille gustative, il Dott. Tauf Huque per l'esecuzione della RT-PCR Figura 4B e il Sig. D. Bayley e la signora S. Alarcon per assistenza tecnica. M. Pepino Yanina è un tipo supportato da una DA07313 NIDAT32 Washington University School of Medicine, St. Louis, MO (Cottler, LB PI).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| McPherson-Vannas. Bordo tagliente curvo e affilato da 5 mm. Pettine, larghezza della punta 0,2 mm, lunghezza totale 3" | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5603, Roboz | |
| Pinzette piccole Dumont | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-4915, Roboz |
Riferimenti
- Breslin, P. A., Spector, A. C. Mammalian taste perception. Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).
- Miller, I. Anatomy of the peripheral taste system. Handbook of Olfaction and Gustation. Doty, R. I., Dekker, M. , Marcel Dekker. New York. 521-547 (1995).
- Figure 12.67.
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Ristampe e permessi
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