Acoustoporesi assistita da aptamero per la separazione microfluidica di batteri Gram-negativi

Abstract

Fonte: Choi, H. J., et al. Acoustoforesi microfluidica per la separazione a flusso di batteri Gram-negativi mediante perle di affinità aptamero. J. Vis. Exp. (2022)

Questo video mostra il metodo per separare selettivamente i batteri Gram-negativi da un campione batterico misto utilizzando microsfere rivestite di aptamero e forze acustiche all'interno di un chip microfluidico.

Protocollo

1. Installazione e funzionamento dell'acoustophoresis<ol style='list-style-type:decimal;'>
2. Collegare le provette in polietereterchetone (PEEK) ai due ingressi per l'iniezione di due campioni e tampone e alle due uscite per la raccolta e lo scarico dei rifiuti (Figura 1).
3. Riempire manualmente il canale dell'acustoforesi microfluidica con acqua demineralizzata priva di bolle utilizzando una siringa da 10 ml.
4. Preparare un regolatore di pressione di precisione con due o più canali di uscita per controllare il flusso del fluido. Quindi, riempire a metà le fiale con il campione e il tampone, rispettivamente, con due fori nei loro tappi, e c....

Risultati

Figura 1: Schema del sistema acustofluidico utilizzato per separare e raccogliere le cellule. Il campione o la soluzione tampone viene iniettato nella porta di ingresso attraverso il controller di flusso. Per il centraggio del cordone.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
10 μm Microsfere rivestite di streptavidina	Bang Laboratories	CP01007	Perline di affinità Aptamer
Aptamer	Integrated DNA Technologies	GN3-6'RNA	per la coniugazione dei batteri
Escherichia coli DH5α	KCTC	KCTC2571	Batteri bersaglio
Generatore funzionale	GW Instek	AFG-2225	Genera frequenza
Telecamera ad alta velocità	Photron	FASTCAM Mini	Osservazione della separazione
KOVAX-SYRINGE 10 mL Siringa	Koreavaccine	22G-10ML	Riempire il canale di acustoforesi microfluidico con acqua demineralizzata senza bolle.
Microscopio	Olympus Corp.	IX-81	Osservazione della separazione
PEEK Tubes	Saint-Gobain Ppl Corp.	AAD04103	Iniettare o raccogliere particelle
Trasduttore piezoelettrico	Fuji Ceramics	C-213	Generare un'onda specifica nel canale
Amplificatore	potenza Ricerca	75A250A	Amplificare la frequenza
Regolatore di pressione/μflucon	AMED	AMED-μflucon	Controllo del regolatore di pressione/flusso dell'aria

di amplificatore