Questo video mostra il metodo per recuperare i batteri lattici stressati da freddo da uno stock di glicerolo congelato, ripristinare la vitalità batterica attraverso l'incubazione anaerobica e isolare le colonie attive per l'espansione della coltura.
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Articolo metodologico
Rinascita e crescita dei batteri lattici
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26 settembre 2025
In questo articolo
Abstract
Protocollo
1. Protocollo per l'attivazione e il controllo di qualità delle colture di batteri lattici (LAB)
- Prelevare la riserva di glicerolo preparata dei ceppi LAB (in provette da centrifuga da 2 mL) dal congelatore a bassissimo temperatura a -80 °C e non lasciarla scongelare prima dell'uso.
- Pulire e disinfettare l'apertura delle provette da centrifuga con alcool al 70% e agitare delicatamente prima dell'uso.
- Pipettare circa 250 μl (0,25 mL) della coltura stock LAB dalle provette da centrifuga in provette MRS (deMan, Rogosa e Sharpe multimedia) fresche da 2 mL.
- Agitare delicatamente, parafilmare le provette e incubarle anaerobicamente per una not....
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Blu Anilina | Termo Scientifico | Codice: R21526 | 25 g |
| Estratto di manzo | Prodotti di ricerca internazionale | 50-197-7509 | 500 g |
| Estratto di lievito | Fisher Scientifico | BP1422-500 | 500 g |
| Cloruro di calcio diidrato | Fisher Scientifico | C79-500 | 500 g |
| Destrosio anidro | Fisher Scientifico | BP350500 | 500 g |
| D-fruttosio | ACROS Organics | AC161355000 | 500 g |
| Difco agar in polvere | Difco | DF0812-07-1 | 2 kg |
| TPY agar | Difco | 211921 | 500 g |
| Provetta per microcentrifuga Eppendorf (Snap-Cap Microcentrifuge Safe-Lock) | Fisher Scientifico | 05-402-12 | 2 ml |
| Glicerolo | Termo Scientifico | PI17904 | 500 ml |
| Incubatore a CO₂ a infrarossi | Forma Scientifica | ||
| Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus | Collezione di cultura di tipo americano (ATCC) | Codice ATCC 11842 | |
| Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus | Bulgaria | S9 | |
| Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus | Bulgaria | LB6 | |
| Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus | Laboratorio di Microbiologia e Biotecnologie Alimentari (NCATSU) | TACCOLA | |
| Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus | Laboratorio di Microbiologia e Biotecnologie Alimentari (NCATSU) | E22 | |
| Lactobacillus reuteri | Biogai, Raleigh / Laboratorio di Microbiologia e Biotecnologie Alimentari (NCATSU) | RD2 | |
| L-cisteina cloridrato monoidrato | Sigma-Aldrich | Codice C6852-25G | 25 g |
| Maltosio monoidrato | Fisher Scientifico | Visualizzazione del materiale M75-100 | 100 g |
| Brodo MRS | Neogen | 50-201-5691 | 5 kg |
| Peptone n. 3 | Hach | 50-199-6719 | 500 g |
| Fosfato di potassio bibasico (K₂HPO₄) | Prodotti di ricerca internazionale | 50-712-761 | 500 g |
| Acetato di sodio triidrato | Fisher Scientifico | S220-1 | 1 kg |
| Cloruro di sodio | Fisher Scientifico | BP358-1 | 1 kg |
| Piruvato di sodio | Fisher Scientifico | BP356-100 | 100 g |
| Provette con tappi a vite rivestiti in gomma | Fisher Scientifico | FB70125150 | 25 x 150 millimetri |
| Interpolazione 80 | Fisher Scientifico | T164-500 | 500 ml |
| Congelatore ultra basso | Così basso | ||
| Uracile | ACROS Organics | AC157301000 | 100 g |
| Spettrofotometro UV-visibile | Thermo Fisher Scientifico | Evoluzione 201 | |
| Genio del vortice 2 | Fisher Scientifico | ||
| Estratto di lievito | Fisher Scientifico | BP1422-500 | 500 g |
| Etanolo | Fisher Scientifico | T08204K7 | 4 L |
| Acido cloridrico (6N (certificato), Fisher Chemical) | Fisher Scientifico | SA56-500 | 500 ml |
