Studio della risposta batterica all'etilene utilizzando un composto che rilascia etilene

In questo articolo

Abstract

Fonte: Augimeri, R. V. et. al., Utilizzo del composto di rilascio dell'etilene, acido 2-cloroetilfosfonico, come strumento per studiare la risposta dell'etilene nei batteri. J. Vis. Exp. (2016)

Questo video mostra l'effetto dell'etilene generato dall'acido 2-cloroetilfosfonico (CEPA) sulla crescita batterica e sulla produzione di cellulosa. L'etilene attiva le vie di segnalazione che stimolano la sintesi della cellulosa, con conseguente aumento della formazione di pellicole. Questi risultati evidenziano la risposta batterica all'etilene.

Protocollo

Saggi Pellicle
1. Coltiva e quantifica le colture starter di Komagataeibacter xylinus in triplice copia:
  1. In triplicato, inoculare una singola colonia di Komagataeibacter xylinus in 5 ml di terreno di Schramm e Hestrin (SH) (pH 5) integrato con cellulasi sterilizzata con filtro allo 0,2% (v/v). Incubare le colture a 30 °C con agitazione a 150 giri/min fino a raggiungere una densità ottica a 600 nm (OD₆₀₀) da 0,3 a 0,4 (circa 72 ore).
  2. Raccogliere le colture starter mediante centrifugazione (2.000 x g; 4 °C; 10 min). Lavare le cellule due volte con 5 ml di soluz....

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Risultati

Figura 1: Diagramma di flusso che illustra il protocollo utilizzato per il saggio e l'analisi della pellicola. Il terreno stock integrato con CEPA a pH 7 SH (60 ml) viene aliquotato per tre inoculazioni di repliche biologiche separate e un controllo sterile (14 ml ciascun.......