Stabilire una popolazione batterica intestinale definita nelle zanzare adulte

Abstract

Fonte: Liu, X., et al. Un test orale batterico con zanzare trattate con antibiotici. J. Vis. Esp. (2020)

Questo video dimostra la diminuzione del microbiota intestinale nativo nelle zanzare utilizzando una soluzione contenente saccarosio contenente antibiotici. Segue una ricolonizzazione controllata con una sospensione batterica somministrata tramite un sistema di alimentazione a membrana per stabilire una popolazione batterica definita nell'intestino della zanzara.

Protocollo

1. Trattamento antibiotico e reintroduzione dei batteri

1. Prepara la soluzione antibiotica.
   1. Pesa la quantità richiesta di saccarosio, penicillina e streptomicina per preparare una soluzione al 10% di saccarosio che include 20 unità di penicillina e 20 μg di streptomicina per mL.
2. Nutri le zanzare con la soluzione antibiotica.
   1. Anestetizzare le zanzare a 4 °C per 3–5 minuti. Trasferisci le zanzare in un bicchiere di carta. Copri la parte superiore con garze e chiudi la garza con del nastro adesivo per evitare che le zanzare scappino.
   2. Immergi dei batuffoli di cot....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Adenosina 5′-trifosfato sale disodio idrato	Sigma	A2383	L'adenosina 5′-trifosfato salare disodico idrato è stata utilizzata per preparare soluzioni standard di adenosina trifosfato (ATP)
Sistema di alimentazione a membrana Hemotek	Hemotek		Componenti del sistema di alimentazione, tra cui il regolatore di temperatura Hemotek, l'assemblaggio alloggiamento del mangiatore, il sistema metallico di alimentazione.
Parafilm	Sangon Biotech	F104002	4 in x 125 ft
Piastra di Petri	Sangon Biotech	F611203
Idratazione del sale di procaina di penicillina G	Sangon Biotech	A606248	Polvere bianca. Solubile in acqua, solubile in metanolo, leggermente solubile in acqua, etanolo
Solfato di streptomicina	Sangon Biotech	A610494	Lo streptomicino solfato è un antibiotico glucosaminanico che interferisce con la sintesi delle proteine procariotiche.
Sucrosio	Sangon Biotech	A502792	Solubile in acqua, etanolo e metanolo, leggermente solubile in glicerolo e piridina.
Buffer PBS 10X	Sangon Biotech	E607016	Questo prodotto è una soluzione 10X. Per favore, diluisci 10 volte prima dell'uso. Il valore del pH è 7,4.