Visualizzazione dell'infezione delle vie urinarie in un modello murino utilizzando la bioluminescenza

Abstract

Fonte: Luyts, N., et al. Follow-up longitudinale delle infezioni delle vie urinarie e il loro trattamento nei topi tramite imaging bioluminescenze. J. Vis. Esp. (2021).

Questo video dimostra l'induzione e il tracciamento dell'infezione delle vie urinarie in un modello murino utilizzando E. coli bioluminescente iniettate nella vescica, dove avvengono l'adesione, l'invasione e la replicazione intracellulare batterica. La luce emessa dall'operone bioluminescente funge da indicatore in tempo reale del carico batterico durante la progressione dell'infezione.

Protocol

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato locale istituzionale per la cura degli animali e dal comitato veterinario JoVE.

1. Inoculazione degli animali

1. Preparazione degli animali
   1. Scegli il ceppo di topo desiderato in base alla domanda di ricerca e alla disponibilità di linee knock-out, ai dettagli sperimentali e alle differenze nella suscettibilità alle infezioni urinarie. Tieni presente che la cateterizzazione transuretrale è più facile nei topi femmine. Non utilizzare animali sotto le 8 settimane, poiché sono immunologicamente immaturi. Qui sono state utilizzate femmine d....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Vaporizzatore per anestesia	Apparecchiatura Harvard limitata	N/A	https://www.harvardapparatus.com/harvard-apparatus-anesthetic-vaporizers.html
Baytril 100 mg/mL	Bayer	N/A	Enrofloxacina
BD Insyte Autoguard 24 GA	BD	382912	Angiocatetore giallo, usa una punta sterile in plastica per l'instillazione
Topi C57Bl/6J	Janvier	N/A
Centrifuga 5804R	Eppendorf	EP022628146
Dropsense 16	Laboratori Liberi	Trineo	per misurare OD 600nm
Soluzione salina tamponata a fosfato di Dulbecco, Gibco	ThermoFisher Scientific	REF 14040-083
Etanolo 70% denaturato 5L	VWR internazionale	85825360
Falcon 14ml tubo di polistirene con fondo rotondo, a scatto	Corning	352057
Falcon 50ml cellstart	Greiner	227285
Siringa Hamilton GASTIGHT, blocco Luer in PTFE, 100 μL	Sigma-Aldrich	26203	per garantire una lenta instillazione batterica di 50 μL
Anello di inoculazione	Roth	6174.1	possessore: Arte. N. 6189.1
Iso-Vet 1000mg/g	Prodotti Dechra Veterinary	N/A	Isoflurano
Sistema di imaging in vivo IVIS Spectrum	PerkinElmer	REF 124262	Dispositivo di imaging