$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato locale istituzionale per la cura degli animali e dal comitato veterinario JoVE.
1. Rilevare il tampone del lumen vaginale per quantificare il carico di GBS
- Prepara un tubo microcentrifuga da 1,5 ml per topo aggiungendo 100 μl di soluzione salina tamponata con fosfato (PBS). Poco prima di prelevare il tamponetto, bagna il tampone in PBS.
- Immobilizza il topo e inserisci il tampone per 10 mm nel lumen vaginale. Ruota delicatamente il tampone 4 volte in senso orario e 4 volte in senso antiorario, applicando una leggera pressione sulla parete vaginale.
- Trasferire il tampone nel tubo microcentrifuga da 1,5 ml con 100 μl di PBS. Prima della placcatura, si infila il tubo della microcentrifuga per ~15 secondi per liberare i batteri dal tampone. Diluire serialmente ogni campione in PBS e placcare 20 μl di diluizioni da 1:10 a 1:10.000 su piastre di agar a mezzo differenziale preparate secondo le istruzioni del produttore. Incubare le placche a 37 °C per 24 ore. Le colonie di Streptococcus del Gruppo B (GBS) appariranno di colore rosa acceso o malva. Altre flore endogene saranno inibite o appariranno come colonie blu, bianca o grigia.