L'iniezione di sangue autologo modello di emorragia intracerebrale in topi descritti in questo protocollo utilizza la tecnica di iniezione doppio per minimizzare il rischio di reflusso del sangue il percorso dell'ago, non anticoagulanti nel sistema di pompaggio, ed elimina tutto lo spazio morto e tubi espandibili nel sistema.
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Articolo metodologico
Iniezione di sangue autologo Modello spontanea emorragia intracerebrale in topi
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'indagine sulla fisiopatologia delle lesioni successive a emorragia intracerebrale (ICH) richiede un modello animale riproducibile. Sebbene l'ICH rappresenti dal 10 al 15% di tutti gli ictus, al momento non esiste una terapia specifica ed efficace. Il modello di iniezione di sangue autologo nei topi prevede l'iniezione stereotassica di sangue arterioso nei gangli della base, riproducendo un'emorragia ipertensiva spontanea nell'uomo. La risposta all'emorragia può quindi essere studiata in vivo e i deficit neurocomportamentali possono essere quantificati, consentendo la descrizione della patologia conseguente e la sperimentazione di potenziali agenti terapeutici. La procedura descritta in questo protocollo utilizza la tecnica della doppia iniezione per ridurre al minimo il rischio di reflusso del sangue lungo il tratto dell'ago, l'assenza di anticoagulanti nel sistema di pompaggio e l'eliminazione di ogni spazio morto e di tubi espandibili nel sistema.
Protocollo
1. La preparazione delle attrezzature
- Pulire la struttura stereotassica e la pompa con il 75% di etanolo per minimizzare la contaminazione batterica.
- Sterilizzare siringa Hamilton e l'ago di silice fusa.
Nota: Se la sterilizzazione chimica è usato, assicuratevi di risciacquare più volte in acqua sterile prima dell'uso. - Pulire la superficie della carta paraffina con il 75% di etanolo e lasciare asciugare.
2. Preparazione del mouse per iniezione
Nota: i topi hanno trasportato al vostro impianto animale almeno 7 giorni prima dell'intervento per consentire loro di acclimatar....
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Discussione
Questo modello chirurgico dell'emorragia intracerebrale in topi con la coda risultati autologo del sangue dell'arteria in un modello riproducibile di emorragia spontanea gangli della base. Un modello ICH nei topi offre il vantaggio della disponibilità di animali transgenici per studiare fisiopatologia, tuttavia, la loro piccola dimensione rende le procedure neurochirurgiche più tecnicamente difficile che in animali più grandi.
Il modello di collagenasi e l'iniezione di sangue aut.......
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Dichiarazioni
Nessun conflitto di interessi dichiarati.
Ringraziamenti
Il lavoro è stato finanziato da una borsa di studio presso l'Istituto di Medicina Traslazionale e Therapeutics, e una borsa di formazione presso l'Istituto di Medicina e Ingegneria (T32HL007954) presso l'Università della Pennsylvania e della Marlene L. Cohen e Jerome H. Fleisch Scholar sovvenzione al University of Connecticut Health Center (LHS) e NIH NS-029331 (FAW).
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Materiali
Telaio per neurochirurgia stereotassica mouse (Stoelting, 51925)
Microinfusion pompa e processore (UMP-3 e Micro4, strumenti di precisione mondiale, Sarasota, FL)
Il mouse più caldo (Stoelting, 50300)
Topo anestesia per inalazione (Braintree scientifico, EZ-AF9000)
25 microlitri tenuta di gas borosilicato siringa Hamilton con pistone patinata e senza ago
(Società Hamilton, Reno, NV, siringa 1702RN: 765401, ghiera: 30949, spacer: 30946)
ago silice fusa tagliato a 2 cm di lunghezza (Hamilton, 17739)
* Nota Hamilton siringa e l'ago di silice fusa possono essere riutilizzati per interventi chirurgici multipli se sterilizzato prima di ogni intervento chirurgico. Questi materiali sono cruciali per evitare la coagulazione del sangue.
Guanti chirurgici sterili
Camice chirurgico, cofano e mascherina
Betadine
75% di etanolo
27 g ago sterile (uso singola)
1 siringa sterile cc (uso singola)
sterili lama chirurgica
Cidex
acqua sterile
buprenorfina e isoflurano
garza sterile
paraffina carta piazze
Colla chirurgica veterinaria (Vetbond, 3M, St. Paul, MN)
Riferimenti
- Hua, Y., Schallert, T., Keep, R. F., Wu, J., Hoff, J. T., Xi, G. Behavioral Tests After Intracerebral Hemorrhage in the Rat. Stroke. 33, 2478-2484 (2002).
- James, M., Warner, D., Laskowitz, D. Preclinical Models of Intracerebral Hemorrhage: A Translational Perspective. Neuro....
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Ristampe e permessi
