In questo articolo vengono descritte le procedure per lo svolgimento di un esame di base post-mortem di un topo o ratto, e la raccolta di organi di base, così come altri tipi di campioni difficili da per la valutazione istologica, microbiologici e PCR.
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Articolo metodologico
Necroscopia diagnostica e selezionati Collezione di tessuti e campioni di ratti e topi
In questo articolo
Sommario
Abstract
Ci sono diversi tipi di campioni che possono essere raccolte da un animale eutanasia al fine di diagnosticare o scoprire agenti infettivi in una colonia di animali. Corretta riscossione di tessuti per l'ulteriore elaborazione istologica possono influenzare la qualità dei risultati dei test. Questo articolo descrive il comportamento di un esame di base lorda compresa l'identificazione di cuore, fegato, polmoni, reni e milza, e come raccogliere questi organi. Inoltre quattro dei più difficili del tessuto / campione tecniche di raccolta sono dimostrati. La raccolta e la perfusione polmonare può essere particolarmente impegnativo come il tessuto ha bisogno di essere correttamente gonfiato con un fissatore in modo che all'interno del tessuto per fissare adeguatamente e per consentire approfondita valutazione istologica. Questo articolo illustra passo dopo passo la tecnica per rimuovere il polmone e gonfiare con fissativo al fine di ottenere una fissazione ottimale del tessuto entro 24 ore. Raccolta cervello può essere allo stesso modo impegnativo come il tessuto è morbido e facilmente danneggiabili. Questo articolo illustra passo dopo passo la tecnica per esporre e rimuovere il cervello dal cranio, con minimo danno al tessuto. Il linfonodo mesenterico è un tipo di campione buona in cui per rilevare molti agenti infettivi comuni come virus enterici persistono più a lungo nel linfonodo di quanto non siano nelle feci. Questo articolo illustra la procedura passo-passo per l'individuazione e la rimozione asetticamente il nodo mesenterica linfa. Infine, l'identificazione degli agenti infettivi delle vie respiratorie può essere effettuata da coltura batterica o test PCR di nasale e / o bronchiali dei fluidi aspirati prese a necroscopia. Questa procedura descrive raccogliere ed elaborare i campioni respiratori aspirare per la coltura batterica e test PCR.
Protocollo
1. Preparazione per la necroscopia
- Parti importanti di un esame post-mortem lordo (al lordo necroscopico) sono la storia dell'animale e la descrizione dei risultati.
- Un patologo veterinario leggendo le diapositive istopatologia potrebbe non aver visto l'animale e conta su di voi per le informazioni di background.
- Descrivere esattamente ciò che vedi prima di eutanasia degli animali. Ad esempio, "topo femmina, uno dei cinque nella gabbia; C57BL/6N, testa inclinata verso destra" o "ratto marrone maschile; ceppo sconosciuto; animale si gratta, non vi è perdita di capelli a chiazze sul dorso, vicino alla coda e testa ".
- Usa chiaro,....
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Discussione
La raccolta dei dati al termine di uno studio può prescrivere una visita post-mortem degli animali. Descrivono bene ciò che si vede e ricorda di esaminare tutti i tessuti. Queste procedure sono progettati principalmente per ottimizzare l'autopsia e la raccolta dei campioni di sorveglianza delle malattie infettive, ma la maggior parte sono facilmente adattabili alle indagini focalizzate di incidenti sospetto di malattia o epidemie, in cui forse solo un sottoinsieme della procedura possa essere impiegato. Molte delle .......
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Dichiarazioni
Gli autori sono tutti i dipendenti del laboratorio di Charles River roditore diagnostica di laboratorio, dove si offrono questi servizi sul mercato.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Reagente nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
| Tagliere | Thermo Electron Corp Cat # 36114 | Cat # 36114 | |
| Forbicine | Roboz | RS-5910, G204 | Lame 23mm, 3,5 "di lunghezza, dritto |
| Forbici di media | Roboz | RS-6808, G207 | 5 " |
| Forbici di grandi dimensioni | Roboz | RS-6826, G65 " | 6.25 " |
| Pinza-curvo | Roboz | RS-8254 (M1/21004) | 4,5 ", seghettata, leggera curva |
| Pinza-Microdissecting | Roboz | RS-5238 | Hudson-(EWALD) |
| Pinza-tessuto Pinze | Roboz | RS - 8160 | Rat dente |
| Fiamma sterilizzatore | Oxford da laboratorio Prodotti | Bacti-Cinerator # 5889-001007 | |
| Bisturi | Diagnosi cancro, Inc. | Bisturi dito # 60, Cat # FS0060 | |
| Pipette | VWR | Pasteur Pipettare 5 3 / 4 ", Cat # 14672-400 | |
| Sacchetti di autoclave | Manufacturing Company corretta | Sterilizzatore Paper Bag Pouches Cat # 021.002 (3.100.923) E09110 | Per pipette Pasteur |
| Pipetta a bulbo | VWR | Cat # 56310-240 | |
| Eppendorf tubi | Sarstedt | 2 ml microtubo SafeSeal, Rif. # 72,695 | |
| Eppendorf tubi | Argos | Microtubo Cat 5mL # T20765-C | |
| Siringa | BD (Beckton Dickenson) | 1ml-309602 3 ml-300910-309603 5 ml 10 ml Cat # 309604 Cat 20 mL # 309661 | |
| Aghi | BD | 26G 18G-309625-305195 | |
| Formalina tamponata neutra | VWR | 20L NBF 10%, Cat # 16004-128 | |
| Salino | ThermoScientific | Buffered Saline Banca del sangue, Cat # 23-309-178 | |
| Trypticase soia brodo | Becton Dickinson | TSB: disidratati, Cat # 211825 | |
| Tampone fosfato salino | Sigma Aldrich | HA tampone, Cat # P3813-10PAK | |
| Tazze di formalina | VWR | 4 once Cat # 36318-852 36318-860 Cat # 8 once 16 once Cat # 36318-858 | |
| Grandi tazze di formalina | Oakridge Prodotti | 32 once Cat # container 0432-1100 | |
| Extra tazza grande formalina | VWR | HDPE contenitore multiuso 160 once Cat # 89038-282 | |
| Materiale di sutura | Henry Schein | Sutura di seta intrecciata chirurgica, Rif. # 100-5000, M766750 | Per l'inflazione del mouse polmone |
| Spago | Staples | Cat # QUA-46173 | Per l'inflazione ratto del polmone |
Riferimenti
- AVMA. AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
- Feldman, D. B., Seely, J. C. Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , CRC Press. (1988).
- King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. The Necropsy Book. , 4th edn, C.L. Davis Foundation. (2006).
- Kittel, B. <....
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Ristampe e permessi
