Tutte le procedure che coinvolgono partecipanti umani sono state eseguite in conformità con le linee guida istituzionali, nazionali e internazionali per il benessere umano e sono state esaminate dal comitato di revisione istituzionale locale.
1. Apparecchio per affettare la prostata
- Acquistare l'apparecchio per affettare la prostata (Tabella dei materiali). In alternativa, stampa l'impugnatura di una lama utilizzando una stampante 3D.
2. Targeting del Tumore
- Rivedere le note cliniche per identificare la lesione indice come indicato dalla biopsia diagnostica, ad es. posteriore sinistro.
- Rivedi le immagini della risonanza magnetica per misurare la posizione del tumore di cui sopra.
- Trova la sequenza in cui il tumore è più visibile sul piano assiale, ad esempio pesato in T2.
- Scorrere le immagini assiali per trovare l'immagine in cui il tumore è più grande e stampare l'immagine come riferimento.
- Nell'immagine coronale corrispondente, misurare la distanza dalla base della prostata alla posizione assiale selezionata e l'intera lunghezza della prostata dall'apice alla base (mm) e stampare come riferimento.
3. Raccolta della prostata
- Controllare le note del paziente per assicurarsi che sia stato ottenuto il consenso informato appropriato per questa procedura e per qualsiasi applicazione di ricerca a valle.
- Dopo la prostatectomia radicale, raccogliere la prostata in un vaso asciutto. Assicurarsi che non sia stata aggiunta formalina o altro fissante alla prostata.
- Trasferimento in un luogo sterile adatto per il campionamento, ad esempio una cappa a flusso laminare in un laboratorio di patologia.
- Procedere al prelievo il prima possibile se è necessario tessuto fresco.
NOTA: Per alcune applicazioni (ad esempio, la valutazione del DNA, che non dovrebbe degradarsi rapidamente come l'RNA), potrebbe essere opportuno refrigerare il campione e prelevare campioni il giorno successivo.
4. Preparazione del campione
- Preparare la cappa a flusso laminare e l'apparato per affettare la prostata secondo le procedure di decontaminazione locali, utilizzando tecniche sterili. Qui, spruzzare etanolo al 70% e strofinare su tutte le superfici. Utilizzare aghi e bisturi sterili monouso. Utilizzare le lame dell'affettatrice fino a tre volte; Lavare dopo ogni utilizzo in acqua calda e sapone, quindi spruzzare e strofinare con etanolo al 70%.
- Pesare la prostata (g) utilizzando una bilancia standard.
- Inchiostrare la prostata. Dipingi il lato sinistro con inchiostro blu e il lato destro con inchiostro nero. Coprire l'intera capsula e le vescicole seminali con inchiostro per indicare in seguito i margini chirurgici.
NOTA: Le procedure di input penna possono variare localmente e possono essere modificate di conseguenza.
5. Taglio della prostata
- Assemblare l'affettatrice inserendo le pareti perpendicolarmente alla base del supporto (Figura 1A).
- Posizionare la prostata in modo che la base e l'apice siano rivolti verso le pareti opposte, con il lato posteriore rivolto verso il basso e quello anteriore verso l'alto. Posiziona spille d'oro intorno alla prostata. Spingere leggermente la prostata verso l'interno, se necessario, per ottenere una vestibilità aderente, che sosterrà la prostata durante l'affettatura.
- Misurare la lunghezza della prostata dalla base all'apice utilizzando un righello e confrontarla con la lunghezza della prostata misurata dalla risonanza magnetica. Se la prostata si è ristretta, applicare una correzione ad hoc alla distanza prevista dalla base alla fetta trasversale target. Ad esempio, se l'intera lunghezza della prostata nell'immagine MRI è di 50 mm, ma quando misurata con un righello a questo punto, mostra che si è ridotta a 45 mm, ridurre la posizione di taglio prevista del 10%.
- Misurare dalla base alla fetta trasversale desiderata. Scegli lo spillo che si trova più vicino a questa misura da tagliare.
- Indossando guanti di cotta di maglia per evitare lesioni, tenere il dispositivo di affettatura (Figura 1B), posizionare le lame su entrambi i lati del perno identificato e utilizzare il distanziatore per mantenere le lame a una distanza di 5 mm. Prendi una fetta muovendo lentamente e con decisione le lame verso il basso, in avanti e all'indietro con colpi lunghi (Figura 1C). Assicurarsi che una fetta intera sia stata separata prima di smontare l'apparecchio.
- Rimuovere le pareti e gli spilli e rimuovere con cura la fetta su un foglio sterile di sughero usando i guanti.
6. Campionamento dei tessuti
- Ispezionare visivamente la fetta trasversale e confrontarla con l'immagine della risonanza magnetica assiale. In alcuni casi, l'area del tumore può apparire più pallida del tessuto circostante.
- Palpare delicatamente la fetta trasversale. In alcuni casi, il tumore può sembrare più solido del tessuto circostante.
- Utilizzando l'immagine della risonanza magnetica assiale come guida, selezionare una o più aree per il campionamento.
- Eseguire punzoni bioptici dell'area di tessuto desiderata.
- Utilizzando un punzone da 6 mm, spingere verso il basso l'area di tessuto desiderata.
- Ruotare il punzone in tessuto sul punto e verso il basso contro il tappo per garantire una separazione completa e utilizzare un bisturi affilato per separare se necessario.
- Rimuovere il punzone e inserirlo in provette/stampi secondo necessità espellendolo con lo stantuffo.
- Ripetere l'operazione per ulteriori campioni tumorali e benigni, se necessario, con punzoni per biopsia sterili separati. Inchiostra in rosso i fori dove sono stati presi i punzoni.
- Annotare la posizione di ciascun pugno insieme al peso della prostata e qualsiasi osservazione sul colore/compattezza dei tessuti.
