Tumore alla prostata

Gli organoidi derivati dai tumori sono un tipo di modello di coltura cellulare 3D in grado di mantenere le caratteristiche patologiche e la linea cellulare organo-specifica dei tumori. Nel protocollo di esempio, vedremo gli scienziati generare organoidi da un tumore alla prostata da un modello murino geneticamente modificato.

In questo video, eseguiamo un test spin-down per incorporare organoidi 3D per il cancro alla prostata nell'agarosio. Questi organoidi incorporati possono essere utilizzati per ulteriori analisi istopatologiche per studiare la crescita e lo sviluppo del cancro.

In questo video, dimostriamo la coltura di cellule epiteliali prostatiche isolate di topo utilizzando una tecnica di coltura basata su anello di gel a matrice. Questo approccio può fornire informazioni complementari sulla capacità di differenziazione delle cellule epiteliali della prostata per formare strutture ghiandolari 3D in risposta a manipolazioni genetiche o farmacologiche.

In questo video, dimostriamo l'estrazione di lisati proteici da organoidi prostatici coltivati in un anello di matrice di membrana basale. L'analisi delle frazioni proteiche estratte può aiutare a studiare l'espressione del marcatore di lineage negli organoidi.

Questo video descrive la tecnica di colorazione immunofluorescente di organoidi di cancro alla prostata intatti e la loro imaging mediante microscopia confocale a montaggio intero. Questa tecnica ha lo scopo di valutare la capacità differenziativa ex vivo delle cellule epiteliali prostatiche basali e luminali.

Questo video mostra una tecnica basata sui dati della risonanza magnetica per mirare a specifiche regioni contenenti tumore nel tessuto prostatico per il campionamento. I campioni bioptici raccolti possono essere conservati per scopi di biobanca o utilizzati per successive analisi a valle.

In questo video, dimostriamo l'isolamento di cellule tumorali epiteliali che esprimono EpCAM da campioni di sangue periferico. La tecnica prevede l'uso di un filo di grado medico funzionalizzato con anticorpi EpCAM per catturare le cellule bersaglio. Le cellule catturate vengono quindi successivamente estratte in una soluzione tampone.

Questo video descrive la tecnica per isolare singole cellule da un pool di cellule bersaglio per eseguire analisi a valle. In questo metodo, un micromanipolatore montato su un microscopio viene utilizzato per l'isolamento ad alta precisione di una singola cellula bersaglio.

Questo video descrive la tecnica per ottenere una singola cellula da una popolazione cellulare eterogenea utilizzando la microdissezione a cattura laser. La singola cellula isolata può essere utilizzata per ulteriori studi genomici o per la ricerca sul cancro.

Questo video descrive un protocollo per la generazione di modelli cellulari resistenti ai taxani del cancro alla prostata. Questi modelli possono aiutare a studiare le vie coinvolte nella progressione verso la resistenza a Docetaxel nei pazienti con carcinoma prostatico.

Questo video descrive un metodo per valutare la resistenza ai farmaci chemioterapici nelle cellule tumorali della prostata utilizzando il saggio di formazione di colonie. Questo test può essere utilizzato come strumento funzionale per identificare nuovi meccanismi molecolari e cellulari di chemioresistenza nelle cellule tumorali.

In questo video, dimostriamo l'induzione dell'autofagia basata sull'arginina deiminasi nelle cellule tumorali della prostata. Inoltre, la microscopia a fluorescenza avanzata può essere utilizzata per visualizzare i cambiamenti associati all'induzione dell'autofagia, compresa la formazione e la distribuzione di autofagosomi e lisosomi e la loro fusione in autolisosomi.

Questo video descrive la tecnica di estrazione e digestione delle proteine per ottenere peptidi dal tessuto tumorale della prostata. Questi peptidi, in seguito a ulteriori analisi, possono aiutare a identificare nuovi bersagli per l'oncoterapia.

In questo video, dimostriamo la cromatografia liquida ad alte prestazioni in fase inversa per purificare i peptidi da una miscela di lisato proteico digerito. Questi peptidi purificati vengono quindi liofilizzati e conservati per applicazioni a valle. L'analisi dei peptidi può aiutare a comprendere i meccanismi coinvolti nella segnalazione cellulare e nel cancro.

In questo video, dimostriamo l'immunoprecipitazione dei fosfopeptidi basata su anticorpi da una miscela di peptidi. I fosfopeptidi arricchiti sono concentrati sotto vuoto e conservati per l'analisi a valle.

Questo video dimostra l'arricchimento a base di biossido di titanio di fosfopeptidi estratti dal tessuto tumorale della prostata. Questi fosfopeptidi arricchiti possono essere utilizzati per applicazioni a valle, come la caratterizzazione delle proteine, per comprendere le vie di segnalazione cellulare coinvolte nella progressione del cancro alla prostata.

In questo video, descriviamo la procedura per la dissezione del sistema urogenitale o UGS da un modello murino maschile. Questo UGS viene ulteriormente sezionato ex vivo per isolare la ghiandola prostatica e studiarne il ruolo nello sviluppo del cancro alla prostata.

Questo video descrive una tecnica per prelevare singoli lobi dalla ghiandola prostatica di un modello murino. I singoli lobi possono quindi essere utilizzati per l'analisi istologica e la ricerca sul cancro.

In questo video, dimostriamo la procedura per la somministrazione di iniezione intra-prostatica di cellule tumorali della prostata in un modello murino. I modelli murini ortotopici possono essere utilizzati per studiare l'origine della malattia e la risposta alle terapie terapeutiche in un ambiente non invasivo e clinicamente rilevante.

In questo video, dimostriamo l'impianto di innesti di tessuto per cancro alla prostata di derivazione umana nella capsula renale di un topo ricevente immunocompromesso. Questa tecnica può essere utilizzata per valutare la progressione del tumore e sviluppare nuove strategie terapeutiche.

Questo video descrive un metodo per modificare geni specifici nelle cellule della ghiandola prostatica utilizzando un sistema di somministrazione basato su adenovirus. L'approccio consente l'alterazione ortotopica e localizzata dell'espressione genica utilizzando la tecnologia CRISPR per sviluppare nuovi modelli murini per il cancro alla prostata.