Estrazione individuale dei lobi dalla prostata: una tecnica per prelevare i singoli lobi prostatici dalla prostata di topo

Abstract

Fonte: Nath, D. et al. Identificazione, caratterizzazione istologica e dissezione dei lobi prostatici di topo per modelli di coltura sferoidale 3D in vitro. J. Vis. Exp. (2018)

Questo video descrive una tecnica per prelevare singoli lobi dalla ghiandola prostatica di un modello murino. I singoli lobi possono quindi essere utilizzati per l'analisi istologica e la ricerca sul cancro.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono gli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria di JoVE.

1. Anatomia macroscopica della prostata e microdissezione del lobo individuale

NOTA: Questo è illustrato nelle Figure 1(i-n) e nella Figura 2

1. Capovolgi il tessuto con un paio di pinze smussate in modo che il lato dorsale sia rivolto verso l'alto, mostrando i lobi dorsali, che assomigliano alle ali di una farfalla.
2. Raccogli i lobi dorsali tenendo il lobo con una pinza e tagliando alla base con le forbici (Figura 1j).
3. Capovolgere il tessuto rimanente sul lato ventrale.
4. Raccogli i lobi laterali, che sono piccoli e di solito avvolgono l'uretra sul lato, che sono incastrati tra i lobi anteriore, ventrale e dorsale (Figura 1k).
5. Successivamente, raccogli i lobi ventrali, che sono più grandi dei lobi laterali e giacciono sull'uretra ventralmente (Figura 1l).
6. Infine, prelevare i lobi anteriori, il più grande dei quattro, tagliando e scartando l'uretra (Figura 1m).
7. Processare i pezzi di tessuto in base alle esigenze sperimentali.

Risultati

Figura 1: Dissezione della prostata del topo. Immagini passo-passo per la dissezione della prostata di topo dall'UGS: (a) rimozione del grasso, (b) rimozione della vescica urinaria, (c) rimozione del dotto deferente, (d) vista ventrale della prostata con l'uretra, (e) vista dorsale della prostata con l'uretra, (

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Strumenti chirurgici per topi (kit per la dissezione dei topi)	Strumenti di precisione mondiali	KIT PER MOUSE
Microscopio di dissezione
RPMI medio	Thermofisher Scientifico	11875093
Terreno di dissezione (DMEM + 10%FBS)	Thermofisher Scientifico	Codice 11965-084
Siero fetale bovino	Thermofisher Scientifico	10438018
PBS (soluzione salina tamponata con fosfato)	Thermofisher Scientifico	10010031
Collagenasi	Thermofisher Scientifico	17018029	Produrre 10 volte il brodo (10 mg/ml) in RPMI, filtrare, sterilizzare, aliquotare e conservare a -20 °C
Siringhe e aghi	Fisher Scientifico