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Campionamento di microestrazione in fase solida: una tecnica basata su sonda per l'estrazione di campioni da tessuti da innesto

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fonte: Stryjak, I. et al. Utilizzo di una biopsia chimica per la valutazione della qualità dell'innesto. J. Vis. Exp. (2020)

In questo video, dimostriamo l'estrazione di metaboliti da un rene di donatore pre-raccolto basata su sonda SPME. I metaboliti estratti possono essere utilizzati per eseguire analisi metabolomiche e lipidomiche al fine di valutare la qualità dell'organo per il trapianto.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tutte le procedure che coinvolgono partecipanti umani sono state eseguite in conformità con le linee guida istituzionali, nazionali e internazionali per il benessere umano e sono state esaminate dal comitato di revisione istituzionale locale.

1. Preparazione delle sonde

  1. Preparare sonde in lega di titanio-nichel (lunghezza 40 mm; diametro 0,2 mm) rivestite con assorbente in modalità mista da 7 mm. Il numero di sonde dipende dai punti temporali presi di mira durante l'intera procedura e dal numero di repliche (si consiglia 3 per punto temporale).
    nota: La durata e il tipo di fase di estrazi....

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nessun conflitto di interessi dichiarato.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
acido aceticoMerck5330010050Additivo in fase mobile
acetonitrileAlchem696-34967-4X2.5LSolvente per HPLC
Acetato di ammonioMerck5330040050Additivo in fase mobile
BENCHMIXER XL VORTEXER MULTITUBOBenchmark scientificoBV1010Miscelatore a vortice
TappiTecnologie PerlanCodice: 5183-2076Scrw tp blu, PTFE/Si spta pre-fessura, 100PK
cloroformioMerck1024441000
Cartuccia Discovery HS F5 Supelguard, 3 μm, diametro interno L × 2 cm × 2,1 mmMerckCodice: 567570-UColonna di protezione HPLC
Discovery HS F5, 2,1 mm x 100 mm, 3 μmMerckCodice: 567502-UColonna HPLC
acido formicoAlchem497-94318-50MLAdditivo in fase mobile
Fiale di vetroTecnologie PerlanCodice: 5182-0714
HILIC Luna 3 μm, 200A, 100 x 2,0 mmShim-PolPHX-00D-4449-B0Colonna HPLC
Cartuccia HILIC SecurityGuard, 3 μm, 4 x 2,0 mmShim-PolPHX-AJ0-8328Colonna di protezione HPLC
IsopropanoloAlchem231-AL03262500Solvente per HPLC
metanoloAlchem696-34966-4X2.5LSolvente per HPLC
Acqua nano-puraMerck1037281002Solvente per HPLC
Q Exactive Focus ibrido quadrupolo-Orbitrap MSTermo ScientificoQ Messa a fuoco esattivaSpettrometro di massa
SeQuant ZIC-cHILIC 3μm,100Å 100 x 2,1 mmMerck1506570001Colonna HPLC
SeQuant Kit di protezione ZIC-HILIC 20 x 2,1 mmMerck1504360001Colonna di protezione HPLC
Sonde in fibra SPME LC, modalità mistaSupelcoFibre prototipo
Sistemi HPLC UltiMate 3000Termo ScientificoUltiMate 3000Sistema HPLC
Inserti per fiale (disattivati)Tecnologie Perlan5181-8872
XSelect CSH C18 3,5μm 2,1x75mmAcque186005644Colonna HPLC
Cartuccia XSelect CSH C18 VanGuard 3,5μm, 2,1x5mmAcque186007811Colonna di protezione HPLC

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Solid Phase MicroextractionSPME ProbeMetabolite ExtractionGraft Tissue SamplingOrgan Quality AssessmentHydroalcoholic CleaningActivation SolutionDesorption SolutionLC MS AnalysisSterile Processing

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