Colorazione periodica di Schiff acido o PAS: un metodo per valutare le deformità strutturali del glomerulo

Abstract

Fonte: Stevens, M., Oltean, S. Valutazione della funzione renale in modelli murini di malattia glomerulare.J. Vis. Exp. (2018)

In questo video, descriviamo il protocollo per eseguire la colorazione Periodic Acid Schiff (PAS) per valutare le anomalie strutturali nel glomerulo renale. Il metodo di colorazione PAS consente una valutazione appropriata della fisiopatologia del glomerulo.

Protocollo

1. Colorazione Periodica di Schiff Acido (PAS)

NOTA: La colorazione PAS evidenzierà le membrane basali delle anse capillari glomerulari e l'epitelio tubulare. Consente la visualizzazione dettagliata delle cellule glomerulari, della matrice mesangiale e dell'espansione del potenziale e delle potenziali variazioni del GBM (ad esempio, ispessimento e irregolarità).

1. Sezionare la corteccia renale incorporata in paraffina e fissata con PFA utilizzando un microtomo a 5 μm di spessore su vetrini rivestiti di poli-L-lisina. Asciugare a 37 °C per 1 ora. Assicurarsi che la sezione non contenga pieghe o fo....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Sistema di colorazione periodica acido-Schiff (PAS)	Sigma-Aldrich	395B-1KT
ematossilina	Sigma-Aldrich	H3136
xilene	MerckMillipore	108298
Vetrini Poly-Prep	Sigma-Aldrich	P0425-72EA
Supporto di montaggio	ThermoFisher Scientifico	8030
Penna idrofobica	Abcam	AB2601
Miscroscopio a luce fluorescente	Leica Microsystems
Software di analisi Image J	Immagine J