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Articolo metodologico
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30 aprile 2023
Fonte: Kaisto, S. et al. Ottimizzazione dell'organoide renale e della coltura organotipica per la vascolarizzazione, lo sviluppo esteso e l'imaging microscopico migliorato. J. Vis. Exp. (2020)
Questo video descrive un metodo per studiare lo sviluppo degli organi utilizzando un sistema di xenotrapianto migliorato su membrana corioallantoica (CAM) da embrioni di uccelli. Questo metodo consente lo sviluppo di organi embrionali e organoidi in coltura completamente vascolarizzati.
Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE
1. Fabbricazione di miniserbatoi per la coltivazione di reni embrionali di topo e organoidi renali su CAM di pollo e impostazione di esperimenti di xenotrapianto
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| incubatore cellulare | Pananica | 13090543 | Temperatura impostata a 37° C, 90% di umidità, 5% di CO₂ |
| incubatore cellulare | SANYO | 10070347 | Incubatrice di colture CAM per polli. Temperatura impostata a 37° C, 90% di umidità, 5% di CO₂ |
| Medium dell'aquila modificata di Dulbecco | sigma | D777 | Glicemia alta |
| Etanolo (70%) | VWR | ||
| Siero fetale bovino | HyClone | SH3007003HI Thermo Scientific | |
| Pinze DUMONT #5 | Dumont | #5SF | |
| Pbs-/- | Corning | 20-031-CV | |
| PBS +/+ | Bioovest | X0520-500 | Lavaggio dei mini serbatoi. |
| Penicillina e streptomicina | sigma | P4333 | |
| Inserti per colture cellulari Thincert a 12 pozzetti con membrana in polistirene con pori da 0,4 μm | Greiner Bio-One | 665641 | |
| Inserti per colture cellulari Thincert a 6 pozzetti con membrana in polistirene con pori da 0,4 μm | Greiner Bio-One | Codice 657610 |
