Sezionamento del tessuto cerebrale del topo congelato: una procedura per ottenere sottili sezioni di tessuto congelato dal tessuto cerebrale murino congelato

Abstract

Fonte: Comba, A. et al. Microdissezione a cattura laser delle sottoregioni del glioma per la caratterizzazione spaziale e molecolare dell'eterogeneità intratumorale, degli oncostream e dell'invasione. J. Vis. Exp. (2020)

In questo video, dimostriamo il sezionamento di un tessuto tumorale cerebrale di topo congelato utilizzando un criostato. Le sezioni di tessuto cerebrale congelate così ottenute vengono conservate a basse temperature fino a ulteriori analisi.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Sezionamento dei tessuti tumorali cerebrali congelati

1. Etichettare i vetrini da 2 μm di polietilene naftalato (PEN) con le informazioni sul campione. Le sezioni di tessuto saranno posizionate direttamente su questi vetrini dopo il sezionamento.
2. Impostare la temperatura della camera del criostato tra -20 e -24 °C. Prima del sezionamento, posizionare il blocco del campione nella camera del criostato e lasciarlo equilibrare alla....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Vetrino a membrana PEN (2 μm)	Lieca	1150518
Criostato di ricerca	Leica	CM3050s
Soluzione di decontaminazione RNaseZap RNasi	Fisher Scientifico	AM9780
Staccare gli stampi per incorporamento usa e getta	Scienze della microscopia elettronica	Codice: 70182
Soluzione precisa	Ricerca Zymo	D3001-1
Composto Tissue-Plus O.C.T.	Fisher Scientifico	23-730-571